【技术实现步骤摘要】
一种抗菌物质吉类菌素的制备及重组表达方法和医用用途
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[0002]本专利技术公开一种吉类菌素，为一种新型抗菌物质，尤其是提供了吉类菌素的制备及重组表达方法，同时还提供了吉类菌素在制备抗细菌感染药物中的医用用途，属于生物医药
技术介绍
[0003]耐药细菌对动物养殖和人类健康构成了巨大威胁，开发能有效抵抗耐药细菌的新型抗菌物质显然已成为迫切需要。然而正在研发的化学合成抗生素很少，而且其中大多数是当前抗生素的衍生物。因此，不断寻求新型抗菌药物已成为人们的共识。畜禽养殖中抗生素类药物作为饲料添加剂和治疗药物广为使用，但抗生素的长期不合理使用，带来严重的安全性问题如药物残留和病原菌耐药性扩散。故而寻找高效、广谱、无残留、无耐药性、低副作用的抗生素替代品，是近些年来人们一直努力的目标。抗菌蛋白或多肽具有独特的结构序列、作用机制和高效的杀菌效果，同时和传统的抗生素基本不会产生交叉耐药现象，因而是抗生素的最佳替代品。
[0004]细菌素是微生物在进化过程中产生的一类防御分子，是由特定细菌产生的蛋白质或多肽，能抑...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种吉类菌素，其特征在于：是由吉林类芽孢杆菌产生的抗菌物质，氨基酸序列如SEQIDNO.1所示，其编码基因的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。2.权利要求1所述的吉类菌素的制备方法，包括如下步骤：（1）发酵上清制备：将
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80℃冻存的吉林类芽孢杆菌在TSB平板划线，37℃培养至形成单菌落，然后挑取单菌落至3mlTSB液体培养基中，37℃、200rpm摇晃培养12h，然后以1%比例转接至5LTSB液体培养基中，37℃、200rpm摇晃培养10h，10000rpm离心10min，0.22μm滤器过滤得发酵上清；（2）粗提液制备：将发酵上清以70%饱和度的硫酸铵进行4℃沉淀过夜，之后10000rpm离心20min，收集沉淀，以蒸馏水复溶之后用1000Da的透析袋进行透析，直至硫酸铵被完全去除，然后冷冻干燥获得粗提物；（3）纯化：将粗提物应用凝胶过滤层析和HPLC进行纯化；将粗提物通过SephadexG
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75凝胶过滤层析柱，流速1ml/min，以0.22μm滤膜过滤的无菌蒸馏水进行洗脱，以280nm为检测波长，收集各洗脱峰，测定抗菌活性确定目标峰；进一步将目标峰利用C18液相色谱柱经HPLC进行纯化，流动相为A，蒸馏水；B：乙腈，0
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20min线性洗脱，多次重复进样后，将检测具有抗菌作用的活性峰合并，冷冻干燥获得吉类菌素。3.权利要求1所述的吉类菌素的一种重组表达方法，其特征在于步骤为：1）基因片段扩增：设计相应引物，扩增吉类菌素基因片段，经酶...
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