一种乳酸菌素及其在防控宠物细菌感染的应用制造技术

本申请涉及微生物领域，具体公开了一种乳酸乳球菌、乳酸菌素及其在防控禽畜细菌感染的应用。所述乳酸菌素由乳酸乳球菌（Lactococcus lactis）经发酵产生，所述菌株被命名为乳酸乳球菌5019，于2021年01月13日被保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：中国，北京，保藏编号为CGMCC NO.21607。本申请的乳酸乳球菌产生的乳酸菌素可用于防控宠物细菌感染，其具有耐温性高以及抑菌活性强的优点。的优点。的优点。

【技术实现步骤摘要】
一种乳酸菌素及其在防控宠物细菌感染的应用


[0001]本申请涉及微生物
，更具体地说，它涉及一种乳酸菌素及其在防控宠物细菌感染的应用。

技术介绍

[0002]在公共卫生形势严峻的今天，因为抗生素的滥用导致更多的耐药菌株的出现，所以替抗减抗的任务目标刻不容缓，亟待全球做出相应的应对策略。目前益生菌制剂作为主要的抗生素替代品已被广泛应用于动物生产中，其具有促进营养物质的消化吸收、改善胃肠道菌群平衡和增强肠道免疫等众多功能，能显著提高畜禽生长性能和防治疾病等。然而，益生菌活菌也存在一定问题，例如抗逆性较差、不耐贮存、胃肠道存活率低、难以定植以及增殖耗能等，并且一些益生菌具有毒力因子和一定耐药性，甚至可能引起感染。
[0003]研究发现益生菌的无生命菌体和(或)其代谢产物也具有明显益生作用，并且不同组分的益生功能不尽相同。2013年，西班牙人Tsilingiri正式提出“postbiotics”的概念，中文名暂译为“后生元。2021年5月，国际益生菌和益生元科学协会(ISAPP)在Nature杂志上对后生元的定义和范围发表了一个共识声明，即后生元为“对宿主有益的无生命微生物和/或其成分的制剂。与活的益生菌相比，后生元具有安全的剂量参数、更长的货架期以及良好的吸收、代谢、分布和排泄能力，同时还克服了益生菌在使用过程中存在的潜在风险，如腹胀和肠胃气胀，益生菌相关的易位、菌血症和真菌病，以及可能的抗生素抗性基因漂移等风险。由此可见，后生元的开发将具有更广阔的市场前景。
[0004]然而目前乳酸菌的发酵代谢产物仍然存在高温条件下抑菌活性明显下降的问题，导致其应用范围受到限制。

技术实现思路

[0005]为了解决上述问题，本申请提供一种乳酸菌素及其在防控禽畜细菌感染的应用。
[0006]本申请的目的通过下述技术方案实现：第一方面，本申请提供一种乳酸菌素，采用如下的技术方案：一种乳酸菌素，所述乳酸菌素由乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)经发酵产生，所述菌株被命名为乳酸乳球菌5019，于2021年01月13日被保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC No.21607。
[0007]通过采用上述技术方案，本申请涉及的乳酸菌素是由乳酸乳球菌5019发酵产生的具有抑菌活性的小分子多肽，它通过在靶细胞上穿孔、抑制肽聚糖合成，与核糖体或tRNA相互作用抑制蛋白质合成，直接降解靶细胞DNA，从而起到抑菌效果。
[0008]本申请的乳酸菌素耐酸，在pH为2.0的条件下能保持稳定的生物活性；并且其耐性温高，在高温和低温不同温度处理后依然可以保持原本抑菌效价和效果；因此，本申请的乳酸菌素可以作为宠物粮添加剂应用到宠物粮食中，解决了宠物粮食高温膨化工艺的引起乳
酸菌素效果下降的问题。
[0009]可选的，所述乳酸菌素的抑菌谱为葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、魏氏梭菌、巴氏杆菌、副鸡嗜血杆菌、副溶血弧菌、鸭疫里默氏菌、肺炎克雷伯菌、产气荚膜梭菌、屎肠球菌。
[0010]通过采用上述技术方案，本申请的乳酸菌素广谱性强，其够裂解革兰氏阳性细菌，如葡萄球菌、魏氏梭菌、产气荚膜梭菌、屎肠球菌等，并且可裂解多种革兰氏阴性细菌，如大肠杆菌、沙门氏菌、鸭疫里默氏菌、巴氏杆菌、副溶血弧菌、副鸡嗜血杆菌、肺炎克雷伯菌等，可以减少食源性动物体内抗生素的蓄积以及降低因超级耐药菌引起的公共卫生安全隐患。
[0011]第二方面，本申请提供一种药物制剂，采用如下的技术方案：一种药物制剂，包含所述的乳酸菌素。
[0012]第三方面，本申请提供一种乳酸菌素的制备方法，采用如下的技术方案：一种乳酸菌素的制备方法，包括如下步骤：S1、乳酸菌种子的准备：将乳酸乳球菌5019接种于培养基中，静置培育，使其增殖活化，得到乳酸乳球菌种子液；S2、乳酸菌放大培养：将乳酸乳球菌种子液接种于培养基中，静置培育，使其增殖活化，得到乳酸乳球菌发酵液；S3、乳酸菌素的制备：将乳酸乳球菌发酵液用浓盐酸调节pH为2
‑
3后，进行灭活处理；然后取上清液即为乳酸菌素。
[0013]通过采用上述技术方案，在S3中将乳酸乳球菌发酵液用浓盐酸进行酸处理，可以促进乳酸菌素从细胞壁上解离，提高其在发酵液中的溶解度；然后经过灭活处理，使得细胞壁破裂，有利于乳酸菌素的充分释放，从而提高乳酸菌素的提取率。
[0014]优选的，所述S3中，灭活处理的条件为：在100
‑
110℃的温度下加热3
‑
10min。
[0015]优选的，所述S3中，采用离心的方法得到上清液，离心条件为：在8000
‑
12000rpm的转速下离心3
‑
8min。
[0016]第四方面，本申请提供一种乳酸菌素的应用，采用如下的技术方案：一种乳酸菌素的应用，所述用于防控宠物细菌感染。
[0017]可选的，所述乳酸菌素在宠物体内裂解细菌、宠物体内预防细菌感以及制备宠物饲料中的应用。
[0018]可选的，所述乳酸菌素在宠物犬饲料中的添加量为1000
‑
1500ppm。
[0019]综上所述，本申请具有以下有益效果：1、本申请的乳酸菌素耐酸，在pH为2.0的条件下能保持稳定的生物活性；并且其耐性温高，在高温和低温不同温度处理后依然可以保持原本抑菌效价和效果；因此，本申请的乳酸菌素可以作为宠物粮添加剂应用到宠物粮食中，解决了宠物粮食高温膨化工艺的引起乳酸菌素效果下降的问题。
[0020]2、本申请的乳酸菌素广谱性强，其够裂解革兰氏阳性细菌，如葡萄球菌、魏氏梭菌、产气荚膜梭菌、屎肠球菌等，并且可裂解多种革兰氏阴性细菌，如大肠杆菌、沙门氏菌、鸭疫里默氏菌、巴氏杆菌、副溶血弧菌、副鸡嗜血杆菌、肺炎克雷伯菌等，可以减少食源性动物体内抗生素的蓄积以及降低因超级耐药菌引起的公共卫生安全隐患。
附图说明
[0021]图1是本申请实施例一中乳酸乳球菌5019的菌落形态图。
[0022]图2是本申请实施例一中乳酸乳球菌5019的细胞形态图。
[0023]图3是本申请实施例六中肠杆菌粪便载菌量检测图。
[0024]图4是本申请实施例六中乳酸菌粪便载菌量检测图。
具体实施方式
[0025]以下结合附图和实施例对本申请作进一步详细说明。
[0026]实施例一：乳酸乳球菌的分离培养和生物学特性1.乳酸乳球菌的分离、培养使用无菌取样器采集新疆传统酸奶样品，低温运输至实验室环境。将样品溶入无菌水中，混匀。取100μL样品溶液进行10倍梯度系列稀释，然后取100μL稀释液涂布在GM17培养基琼脂平板上，倒置平板30℃培养24小时，挑取白色、圆形、过氧化氢酶阴性的菌落，显微镜观察为球状或椭球状，反复划线确定纯菌落。
[0027]上述GM17培养基的配方：葡萄糖5g/L，蛋白胨5.0g/L，酵母提取物5.0g/L，聚蛋白本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种乳酸菌素，其特征在于：所述乳酸菌素由乳酸乳球菌（Lactococcus lactis）经发酵产生，所述菌株被命名为乳酸乳球菌5019，于2021年01月13日被保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：中国，北京，保藏编号为CGMCC NO.21607。2.一种如权利要求1所述的乳酸菌素，其特征在于，所述乳酸菌素的抑菌谱为葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、魏氏梭菌、巴氏杆菌、副鸡嗜血杆菌、副溶血弧菌、鸭疫里默氏菌、肺炎克雷伯菌、产气荚膜梭菌、屎肠球菌。3.一种药物制剂，其特征在于：包含如权利要求1所述的乳酸菌素。4.权利要求1所述的乳酸菌素的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：S1、乳酸菌种子的准备：将乳酸乳球菌5019接种于培养基中，静置培育，使其增殖活化，得到乳酸乳球菌种子液；S2、乳酸菌放大培养：将乳酸乳球菌种子液接种于培养基中，静置培育，使其增殖活化，得到乳酸乳球菌发酵液；S3、乳酸菌素的制备：将乳酸乳球菌发...

【专利技术属性】
技术研发人员：潘强，任慧英，孙虎芝，孔健，郭婷婷，赵鹏，刘爽，张勇超，田苗苗，
申请(专利权)人：青岛诺安百特生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：