一种乳酸菌素及其在防控畜禽细菌感染的应用制造技术

本申请涉及微生物领域，具体公开了一种乳酸菌素及其在防控畜禽细菌感染的应用。所述乳酸菌素由乳酸乳球菌（Lactococcus lactis）经发酵产生，所述菌株被命名为乳酸乳球菌5019，于2021年01月13日被保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：中国，北京，保藏编号为CGMCC NO.21607。本申请的乳酸乳球菌产生的乳酸菌素可用于防控畜禽细菌感染，其具有耐温性高以及抑菌活性强的优点。其具有耐温性高以及抑菌活性强的优点。其具有耐温性高以及抑菌活性强的优点。

【技术实现步骤摘要】
一种乳酸菌素及其在防控畜禽细菌感染的应用


[0001]本申请涉及微生物
，更具体地说，它涉及一种乳酸菌素及其在防控畜禽细菌感染的应用。

技术介绍

[0002]由于抗生素在人类和动物中的过量和不正确使用，导致细菌的多重耐药性日益严重，除了医院重症监护室成为超级耐药菌滋生的集中地以外，还有很多报道称从动物源性食品中分离出多重耐药菌。为了应对上述问题，全球科研队伍都在研发新型抗菌药物，以期或协同作用增强抗生素的杀菌效果，或代替抗生素达到杀菌治疗细菌感染性疾病的效果。在人类公共卫生意义重大的今天，对抗生素的使用需要尤为严谨的科学方法指导和严厉的法律监管，所以在动物饲养、食品来源、食品储存等环节都需要开发新型抗菌成分，确保公共卫生安全和食品防腐的有效性。
[0003]在食品领域里，有一类乳酸菌(Lactic acid bacteria，LAB)发挥着重要的作用，这是能够发酵糖类产生乳酸的一类无芽孢、革兰氏染色阳性细菌的总称。乳酸菌是一类益生菌，可以激活巨噬细胞、NK细胞等免疫细胞以消灭体内的有害菌和癌细胞。研究资料表明，乳酸菌能促进动物生长，调节胃肠道正常菌群、维持微生态平衡，从而改善胃肠道功能、提高食物消化率和生物效价、降低血清胆固醇、控制内毒素、抑制肠道内腐败菌生长以及提高机体免疫力等。然而，益生菌活菌也存在一定问题，例如乳酸菌极其不稳定，其存在抗逆性较差、不耐贮存、胃肠道存活率低、难以定植以及增殖耗能的问题。
[0004]研究发现益生菌的无生命菌体和(或)其代谢产物也具有明显益生作用，并且不同组分的益生功能不尽相同。乳酸菌通过发酵产生的有机酸、特殊酶系、乳酸菌素等代谢产物同样具有一定的杀菌、抑菌作用。然而目前乳酸菌的发酵代谢产物仍然存在高温条件下抑菌活性明显下降的问题，导致其应用范围受到限制。

技术实现思路

[0005]为了解决上述问题，本申请提供一种乳酸菌素及其在防控畜禽细菌感染的应用。
[0006]本申请的目的通过下述技术方案实现：第一方面，本申请提供一种乳酸菌素，采用如下的技术方案：一种乳酸菌素，所述乳酸菌素由乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)经发酵产生，所述菌株被命名为乳酸乳球菌5019，于2021年01月13日被保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：中国，北京，保藏编号为CGMCC NO.21607。
[0007]通过采用上述技术方案，本申请涉及的乳酸菌素是由乳酸乳球菌5019发酵产生的具有抑菌活性的小分子多肽，它通过在靶细胞上穿孔、抑制肽聚糖合成，与核糖体或tRNA相互作用抑制蛋白质合成，直接降解靶细胞DNA，从而起到抑菌效果。
[0008]本申请的乳酸菌素耐酸，在pH为2.0的条件下能保持稳定的生物活性；并且其耐性温高，在150℃的温度下处理5min后，并不会明显影响其效价，可以结合实际生产开发出适
合多种应用场景的制剂，可防治养殖端受到病原菌的感染。
[0009]可选的，所述乳酸菌素的抑菌谱为葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、魏氏梭菌、巴氏杆菌、副鸡嗜血杆菌、副溶血弧菌、鸭疫里默氏菌。
[0010]通过采用上述技术方案，本申请的乳酸菌素广谱性强，其能够裂解革兰氏阳性细菌，如葡萄球菌、魏氏梭菌等，并且可裂解多种革兰氏阴性细菌，如大肠杆菌、沙门氏菌、鸭疫里默氏菌、巴氏杆菌、副溶血弧菌、副鸡嗜血杆菌等。鉴于乳酸菌素对多种病原菌有裂解作用，本申请开发了更多的应用领域，如在养殖场内防控多种病原菌的水平传播、辅助或代替抗生素杀菌防治细菌感染、作为饲料添加剂促进肉鸡的生长性能，从而减少食源性动物体内抗生素的蓄积以及降低因超级耐药菌引起的公共卫生安全隐患。
[0011]第二方面，本申请提供一种药物制剂，采用如下的技术方案：一种药物制剂，包含所述的乳酸菌素。
[0012]第三方面，本申请提供一种乳酸菌素的制备方法，采用如下的技术方案：一种乳酸菌素的制备方法，包括如下步骤：S1、乳酸菌种子的准备：将乳酸乳球菌5019接种于培养基中，静置培育，使其增殖活化，得到乳酸乳球菌种子液；S2、乳酸菌放大培养：将乳酸乳球菌种子液接种于培养基中，静置培育，使其增殖活化，得到乳酸乳球菌发酵液；S3、乳酸菌素的制备：将乳酸乳球菌发酵液用浓盐酸调节pH为2
‑
3后，进行灭活处理；然后取上清液即为乳酸菌素。
[0013]通过采用上述技术方案，在S3中将乳酸乳球菌发酵液用浓盐酸进行酸处理，可以促进乳酸菌素从细胞壁上解离，提高其在发酵液中的溶解度；然后经过灭活处理，使得细胞壁破裂，有利于乳酸菌素的充分释放，从而提高乳酸菌素的提取率。
[0014]优选的，所述S3中，灭活处理的条件为：在100
‑
110℃的温度下加热3
‑
10min。
[0015]优选的，所述S3中，采用离心的方法得到上清液，离心条件为：在8000
‑
12000rpm的转速下离心3
‑
8min。
[0016]第四方面，本申请提供一种乳酸菌素的应用，采用如下的技术方案：一种乳酸菌素的应用，所述乳酸菌素用于防控畜禽细菌感染。
[0017]可选的，所述乳酸菌素在畜禽体内裂解细菌、预防细菌感染以及制备畜禽饲料中的应用。
[0018]可选的，所述乳酸菌素在畜禽饲料中的添加量为50
‑
200ppm。
[0019]综上所述，本申请具有以下有益效果：1.本申请的乳酸菌素耐酸，在pH为2.0的条件下能保持稳定的生物活性；并且其耐性温高，在150℃的温度下处理5min后，并不会明显影响其效价，可以结合实际生产开发出适合多种应用场景的制剂，可防治养殖端受到病原菌的感染。
[0020]2.本申请的乳酸菌素广谱性强，其能够裂解革兰氏阳性细菌，如葡萄球菌、魏氏梭菌等，并且可裂解多种革兰氏阴性细菌，如大肠杆菌、沙门氏菌、鸭疫里默氏菌、巴氏杆菌、副溶血弧菌、副鸡嗜血杆菌等。
[0021]3.本申请的乳酸菌素对多种病原菌有裂解作用，本申请开发了更多的应用领域，如在养殖场内防控多种病原菌的水平传播、辅助或代替抗生素杀菌防治细菌感染、作为饲
料添加剂促进肉鸡的生长性能，从而减少食源性动物体内抗生素的蓄积以及降低因超级耐药菌引起的公共卫生安全隐患。
附图说明
[0022]图1是本申请实施例一中乳酸乳球菌5019的菌落形态图。
[0023]图2是本申请实施例一中乳酸乳球菌5019的细胞形态图。
[0024]图3是本申请实施例四中高温处理后的乳酸菌素的抑菌作用对比图。
[0025]图4是本申请实施例四中高温处理(110℃、120℃)后的乳酸菌素对大肠杆菌、葡萄球菌和ML菌的抑菌效果图。
[0026]图5本申请实施例四中高温处理(130℃、140℃、150℃)后的乳酸菌素对葡萄球菌的抑菌效果图。
[0027]图6是本申请实施例五中的肝脏病变评分对比图。
[0028]图7是本申请实施本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种乳酸菌素，其特征在于：所述乳酸菌素由乳酸乳球菌（Lactococcus lactis）经发酵产生，所述菌株被命名为乳酸乳球菌5019，于2021年01月13日被保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：中国，北京，保藏编号为CGMCC NO.21607。2.一种如权利要求1所述的乳酸菌素，其特征在于，所述乳酸菌素的抑菌谱为葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、魏氏梭菌、巴氏杆菌、副鸡嗜血杆菌、副溶血弧菌、鸭疫里默氏菌。3.一种药物制剂，其特征在于：包含如权利要求1所述的乳酸菌素。4.权利要求1所述的乳酸菌素的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：S1、乳酸菌种子的准备：将乳酸乳球菌5019接种于培养基中，静置培育，使其增殖活化，得到乳酸乳球菌种子液；S2、乳酸菌放大培养：将乳酸乳球菌种子液接种于培养基中，静置培育，使其增殖活化，得到乳酸乳球菌发酵液；S3、乳酸菌素的制备：将乳酸乳球菌发酵液用浓盐酸调节...

【专利技术属性】
技术研发人员：潘强，任慧英，孙虎芝，孔健，郭婷婷，赵鹏，刘爽，张勇超，田苗苗，
申请(专利权)人：青岛诺安百特生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：