一种抗氧化及预防肿瘤的硒肽螯合物的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种抗氧化及预防肿瘤的硒肽螯合物的制备方法。本发明专利技术选用了蚕蛹、富硒猴头菇，通过碱溶酸沉法和硫酸铵沉降法提取其中的蛋白，具有较高提取率，通过控制蛋白酶解时间，独立提纯制备获得具有高硒螯合活性的生物活性肽，并与无机硒进行螯合制备得到硒肽螯合物，得到的螯合物中含有动植物蛋白质，同时富有微量元素，而且还具有抗氧化、抗菌、抗肿瘤和免疫调节等功能活性，对蚕蛹、富硒猴头菇的深加工处理，为有价值资源的利用开辟了新的途径，具有广阔的市场前景。具有广阔的市场前景。

【技术实现步骤摘要】
一种抗氧化及预防肿瘤的硒肽螯合物的制备方法


[0001]本专利技术涉及硒肽螯合物
，具体为一种抗氧化及预防肿瘤的硒肽螯合物的制备方法。

技术介绍

[0002]硒是人体必需的一种重要矿质元素，人体硒含量与人体健康状况密切相关，人体主要是通过饮食获得硒，人工补硒的方法是口服含硒制剂。蚕蛹含有丰富的营养物质，如蛋白质、脂肪酸和维生素等。蚕蛹蛋白质由18种氨基酸组成，其中8种必需氨基酸占氨基酸总量的42％，是良好的生物肽来源。目前，研究发现蚕蛹蛋白源生物肽具有抗氧化、降血压、降血脂、抗肿瘤和免疫调节等功能活性。猴头菇是一种因外形酷似猴头而得名的菌类，猴头菇的营养成分很高，干品中每百克含蛋白质26.3克，含有氨基酸多达17种，其中人体所需的占8种，氨基酸种类丰富，且含有一些其他食品所少见的稀有氨基酸，猴头菇蛋白与普通动植物蛋白相比具有更丰富的生物活性。
[0003]利用生物技术对富硒猴头菇、蚕蛹进行深加工，螯合制备多肽
‑
硒螯合物，通过深加工得到的螯合物中含有动植物蛋白质，同时富有微量元素，有很高的开发价值和应用前景。

技术实现思路

[0004]鉴于现有技术中所存在的问题，本专利技术公开了一种抗氧化及预防肿瘤的硒肽螯合物的制备方法，包括步骤如下：步骤一、蚕蛹肽粉的制备，具体如下：步骤11、选取蚕蛹清洗干净，放入气流干燥设备内，通过10
‑
20℃的风连续干燥，直至得到干燥蚕蛹；步骤12、将干燥后的蚕蛹粉碎，选用900
‑
1100目的筛网进行筛分，得到蚕蛹粉；步骤13、将蚕蛹粉与纯净水混合，得到质量浓度为2
‑
5wt％的悬浮液；步骤14、搅拌同时加入氢氧化钠溶液调节溶液pH为9
‑
11，在25
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35℃状态下浸泡20
‑
30min，将该溶液升温至50
‑
70℃，再加入质量为蚕蛹粉的1
‑
3％的碱性蛋白酶，恒温酶解1
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3h后，调节pH为5.0
‑
7.0，再加入质量为蚕蛹粉的0.5
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3％的木瓜蛋白酶，恒温搅拌水解1
‑
3h后升温至80
‑
90℃，灭酶10min；步骤15、将灭酶后的溶液冷却至常温，通过离心机以4000r/min的速度离心10min，收集上清液得蚕蛹肽溶液；步骤16、用截断分子量为2000Da的超滤膜进行超滤，渗透液浓缩，冷冻干燥，获得蚕蛹肽冻干粉；步骤二、猴菇硒蛋白的制备，具体如下：步骤21、选用富硒猴头菇，将富硒猴头菇超微粉碎，选用900
‑
1100目的筛网进行筛分，得到富硒猴头菇粉；
步骤22、将富硒猴头菇粉与纯净水混合，逐步加入固体硫酸铵使硫酸铵的饱和度达44
‑
58wt％；步骤23、通过离心机进行离心得猴菇硒蛋白沉淀，将猴菇硒蛋白溶解在水中，使质量浓度达2
‑
6wt％；步骤24、搅拌同时加入氢氧化钠溶液调节溶液pH为8
‑
10，在30
‑
60℃状态下加入质量为猴菇硒蛋白的2
‑
5％的碱性蛋白酶，恒温酶解1
‑
3h，升温至80
‑
90℃，灭酶10min；步骤25、将灭酶后的溶液冷却至常温，通过离心机以4000r/min的速度离心10min，收集上清液得猴菇硒蛋白多肽复合溶液；步骤26、用截断分子量为2000Da的超滤膜进行超滤，渗透液浓缩，冷冻干燥，获得猴菇硒蛋白多肽冻干粉；步骤三、取步骤一得到的蚕蛹肽冻干粉，步骤二得到的猴菇硒蛋白多肽冻干粉按比例混合，在200
‑
400℃的温度下加热制备，获得蚕蛹肽猴菇蛋白
‑
硒螯合物。
[0005]作为本专利技术的一种优选方案，步骤三中蚕蛹肽冻干粉、猴菇硒蛋白多肽冻干粉的配比比例为，蚕蛹肽冻干粉：猴菇硒蛋白多肽冻干粉＝2:5
‑
5:5。
[0006]本专利技术的有益效果：本专利技术选用了蚕蛹、富硒猴头菇，通过碱溶酸沉法和硫酸铵沉降法提取其中的蛋白，具有较高提取率，通过控制蛋白酶解时间，独立提纯制备获得具有高硒螯合活性的生物活性肽，并与无机硒进行螯合制备得到硒肽螯合物，得到的螯合物中含有动植物蛋白质，同时富有微量元素，而且还具有抗氧化、抗菌、抗肿瘤和免疫调节等功能活性，对蚕蛹、富硒猴头菇的深加工处理，为有价值资源的利用开辟了新的途径，具有广阔的市场前景。
具体实施方式
[0007]实施例1
[0008]本专利技术的一种抗氧化及预防肿瘤的硒肽螯合物的制备方法，包括步骤如下：步骤一、蚕蛹肽粉的制备，具体如下：步骤11、选取蚕蛹清洗干净，放入气流干燥设备内，通过10℃的风连续干燥，直至得到干燥蚕蛹；步骤12、将干燥后的蚕蛹粉碎，选用900目的筛网进行筛分，得到蚕蛹粉；步骤13、将蚕蛹粉与纯净水混合，得到质量浓度为2wt％的悬浮液；步骤14、搅拌同时加入氢氧化钠溶液调节溶液pH为9，在25℃状态下浸泡20min，将该溶液升温至50℃，再加入质量为蚕蛹粉的1％的碱性蛋白酶，恒温酶解1h后，调节pH为5.0，再加入质量为蚕蛹粉的0.5％的木瓜蛋白酶，恒温搅拌水解1h后升温至80℃，灭酶10min；步骤15、将灭酶后的溶液冷却至常温，通过离心机以4000r/min的速度离心10min，收集上清液得蚕蛹肽溶液；步骤16、用截断分子量为2000Da的超滤膜进行超滤，渗透液浓缩，冷冻干燥，获得蚕蛹肽冻干粉；步骤二、猴菇硒蛋白的制备，具体如下：步骤21、选用富硒猴头菇，将富硒猴头菇超微粉碎，选用900目的筛网进行筛分，得
到富硒猴头菇粉；步骤22、将富硒猴头菇粉与纯净水混合，逐步加入固体硫酸铵使硫酸铵的饱和度达44wt％；步骤23、通过离心机进行离心得猴菇硒蛋白沉淀，将猴菇硒蛋白溶解在水中，使质量浓度达2wt％；步骤24、搅拌同时加入氢氧化钠溶液调节溶液pH为8，在30℃状态下加入质量为猴菇硒蛋白的2％的碱性蛋白酶，恒温酶解1h，升温至80℃，灭酶10min；步骤25、将灭酶后的溶液冷却至常温，通过离心机以4000r/min的速度离心10min，收集上清液得猴菇硒蛋白多肽复合溶液；步骤26、用截断分子量为2000Da的超滤膜进行超滤，渗透液浓缩，冷冻干燥，获得猴菇硒蛋白多肽冻干粉；步骤三、取步骤一得到的蚕蛹肽冻干粉，步骤二得到的猴菇硒蛋白多肽冻干粉按2:5的比例混合，在200℃的温度下加热制备，获得蚕蛹肽猴菇蛋白
‑
硒螯合物。
[0009]实施例2
[0010]本专利技术的一种抗氧化及预防肿瘤的硒肽螯合物的制备方法，包括步骤如下：步骤一、蚕蛹肽粉的制备，具体如下：步骤11、选取蚕蛹清洗干净，放入气流干燥设备内，通过105℃的风连续干燥，直至得到干燥蚕蛹；步骤12、将干燥后的蚕蛹粉碎，选用1000目的筛网进行筛分，得到蚕蛹粉；步骤13、将蚕蛹粉与纯净水混合，得到质量浓度为4wt％的悬浮液；步骤14本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗氧化及预防肿瘤的硒肽螯合物的制备方法，其特征在于，包括步骤如下：步骤一、蚕蛹肽粉的制备，具体如下：步骤11、选取蚕蛹清洗干净，放入气流干燥设备内，通过10
‑
20℃的风连续干燥，直至得到干燥蚕蛹；步骤12、将干燥后的蚕蛹粉碎，选用900
‑
1100目的筛网进行筛分，得到蚕蛹粉；步骤13、将蚕蛹粉与纯净水混合，得到质量浓度为2
‑
5wt％的悬浮液；步骤14、搅拌同时加入氢氧化钠溶液调节溶液pH为9
‑
11，在25
‑
35℃状态下浸泡20
‑
30min，将该溶液升温至50
‑
70℃，再加入质量为蚕蛹粉的1
‑
3％的碱性蛋白酶，恒温酶解1
‑
3h后，调节pH为5.0
‑
7.0，再加入质量为蚕蛹粉的0.5
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3％的木瓜蛋白酶，恒温搅拌水解1
‑
3h后升温至80
‑
90℃，灭酶10min；步骤15、将灭酶后的溶液冷却至常温，通过离心机以4000r/min的速度离心10min，收集上清液得蚕蛹肽溶液；步骤16、用截断分子量为2000Da的超滤膜进行超滤，渗透液浓缩，冷冻干燥，获得蚕蛹肽冻干粉；步骤二、猴菇硒蛋白的制备，具体如下：步骤21、选用富硒猴头菇，将富硒猴头...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡海颖，
申请(专利权)人：和乐聚健康产业扬州有限公司，
类型：发明
国别省市：