【技术实现步骤摘要】
一种转基因青蒿以及提高青蒿中青蒿素含量的方法
[0001]本专利技术涉及一种转基因青蒿以及提高青蒿中青蒿素含量的方法,涉及转基因
技术介绍
[0002]青蒿素是一种含有过氧桥键的倍半萜内酯化合物,对疟原虫具有较强的杀灭作用,是治疗效果最好的抗疟疾药物。青蒿素在青蒿中的含量低,仅占叶片干重的0.1
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1%。青蒿是青蒿素的主要来源,提高青蒿中青蒿素的含量具有重要的应用价值和实际意义。通过杂交育种、控制生长环境等方式有助于提高青蒿中青蒿素的含量,但提高效果有限。通过基因工程技术提高青蒿腺毛密度以及提高控制青蒿素合成关键酶的基因的表达,是提高青蒿中青蒿素含量的有效手段。
[0003]如何确定合适的基因从而提高青蒿腺毛密度以及青蒿素含量,是本领域技术人员持续关注的问题。
技术实现思路
[0004]本专利技术提供一种转基因青蒿以及提高青蒿中青蒿素含量的方法,用于提高青蒿腺毛密度以及青蒿素含量。
[0005]本专利技术第一方面提供一种转基因青蒿,所述转基因青蒿能够表达ADS、CYP71AV1、DBR2、ALDH1、MsGSW2基因,其中:
[0006]所述ADS具有如SEQ ID NO.1所示的核酸序列;
[0007]所述CYP71AV1具有如SEQ ID NO.2所示的核酸序列;
[0008]所述DBR2具有如SEQ ID NO.3所示的核酸序列;
[0009]所述ALDH1具有如SEQ ID NO.4所示的核酸序列;
[0010 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种转基因青蒿,其特征在于,所述转基因青蒿能够表达ADS、CYP71AV1、DBR2、ALDH1、MsGSW2基因,其中:所述ADS具有如SEQ ID NO.1所示的核酸序列;所述CYP71AV1具有如SEQ ID NO.2所示的核酸序列;所述DBR2具有如SEQ ID NO.3所示的核酸序列;所述ALDH1具有如SEQ ID NO.4所示的核酸序列;所述MsGSW2具有如SEQ ID NO.6所示的核酸序列。2.根据权利要求1所述的转基因青蒿,其特征在于,基于每平方毫米的转基因青蒿叶片,腺毛密度大于等于32个/mm2。3.根据权利要求1或2所述的转基因青蒿,其特征在于,基于每片转基因青蒿叶片的干重,青蒿素的含量为16.4
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24.7mg/g。4.一种提高青蒿中青蒿素的方法,其特征在于,所述方法包括:使青蒿表达ADS、CYP71AV1、DBR2、ALDH1、MsGSW2基因。5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,使青蒿表达ADS、CYP71AV1、DBR2、ALDH1、MsGSW2基因,具体包括如下步骤:构建包括所述ADS、CYP71AV1、ALDH1、DBR2、MsGSW2、HPTII、Bar基因的重组载体,所述HPTII具有如SEQ ID NO.5所示的核酸序列,所述Bar具有如SEQ ID NO.7所示的核酸序列;构建包括所述重组载体的重组转化体;将所述重组转化体转入青蒿中,筛选得到能够表达所述基因的青蒿植株。6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,构建包括所述ADS、CYP71AV1、ALDH1、DBR2、MsGSW2、HPTII、Bar基因的重组载体具体包括如下步骤:分别以所述ADS、CYP71AV1、ALDH1、DBR2、MsGSW2、HPTII、Bar基因为模板,在其上游和下游分别连接引物,得到基因扩增片段;所述引物分别具有SEQ ID NO.21
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34所示的核苷酸序列;将所述ADS、CYP71AV1、ALDH1、DBR2、MsGSW2、HPTII、Bar的基因扩增片段与pUPD2质粒进行边切边连,获得pUPD2
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ADS
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2A
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CYP71AV1、pUPD2
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DBR2
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2A
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ALDH1、pUPD2
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MsGSW2、pUPD2
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HPTII、pUPD2
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Bar五个一级载体;将pUPD2
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MsGSW2、pUPD2
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ADS
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2A
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CYP71AV1两个一级载体分别与启动子和终止子组合并构建至pDGB3_alpha1载体质粒上,将pUPD2
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DBR2
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2A
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ALDH1、pUPD2
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HPTII、pUPD2
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Bar三个一级载体分别与启动子和终止子组合并构建至pDGB3_alpha2载体质粒上,获得α1
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MsGSW2、α1
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ADS
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2A
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CYP71AV1、α2
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DBR2
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2A
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...
【专利技术属性】
技术研发人员:唐克轩,李勇鹏,严欣,彭柏文,付雪晴,孙小芬,秦维,
申请(专利权)人:上海交通大学,
类型:发明
国别省市:
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