氟噻唑吡乙酮抗性基因型G699V芋疫霉的LAMP引物组合物及其应用制造技术

本申请涉及检测氟噻唑吡乙酮抗性基因型G699V芋疫霉的LAMP引物组合物及其应用。本申请提供一种检测氟噻唑吡乙酮抗性基因型G699V芋疫霉的LAMP引物组合，所述引物组合包括如SEQ ID NO.1～4所示的核苷酸序列，该引物组特异性强、准确性好。将所述引物组用于芋疫霉对氟噻唑吡乙酮抗药性检测，可以快速、方便、准确地判断对氟噻唑吡乙酮杀菌剂抗药性菌株。地判断对氟噻唑吡乙酮杀菌剂抗药性菌株。

【技术实现步骤摘要】
氟噻唑吡乙酮抗性基因型G699V芋疫霉的LAMP引物组合物及其应用


[0001]本申请属于生物
，具体涉及一种检测氟噻唑吡乙酮抗性基因型G699V芋疫霉的LAMP引物组合物及其应用。

技术介绍

[0002]芋疫霉菌(Phytophthora colocasiae)属于卵菌门(Oomycota)、卵菌纲(Oomycetes)、霜霉目(Peronosporales)、腐霉科(Pythiaceae)、疫霉属(Phytophthora)。在芋头种植过程中，由芋疫霉引起的芋疫病是芋头最具毁灭性的病害；它已成为芋头种植国家芋头生产的主要制约因素，造成25
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30％的产量损失。该病原体还会导致采后块茎腐烂，从而导致严重的储存损失。芋疫病症状表现为小的水渍斑，随着时间的推移，它们的面积增大、数量增多。在适宜的环境条件下，疾病迅速蔓延到整个田地，叶片呈现枯萎现象。东南亚等地区受重度感染的芋头田的作物损失超过30％。目前，生产上主要使用杀菌剂防治芋疫霉引起的植物病害。氟噻唑吡乙酮是美国杜邦公司研发的具有全新化学结构的新型杀菌剂，靶标蛋白为氧本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测氟噻唑吡乙酮抗性基因型G699V芋疫霉的LAMP引物组合，其特征在于，所述引物组合包括核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的正向内引物FIP、核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的反向内引物BIP、核苷酸序列如SEQ IDNO.3所示的正向外引物F3和核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示的反向外引物B3。2.一种检测氟噻唑吡乙酮抗性基因型G699V芋疫霉的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1中所述的引物组合。3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括DNA提取试剂、LAMP扩增所需的其他试剂和可视化指示剂中的一种或多种。4.一种鉴定芋疫霉对氟噻唑吡乙酮抗药性的方法，包括检测芋疫霉中的基因型是否为氟噻唑吡乙酮抗性基因型G699V；所述氟噻唑吡乙酮抗性基因型G699V为芋疫霉基因组中ORP1基因自5
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端第2165位核苷酸由G突变为T，造成其编码的蛋白质的第699位氨基酸由Gly突变为Val。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：提取待测芋疫霉的DNA；以所述DNA为模板，利用权利要求1所述的引物组合进行LAMP扩增反应；及对所述LAMP扩增反应的结果进行判断。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述判断通过肉眼观察进行，需要在反应体系中加入可视化指示剂羟基萘酚蓝，在反应结束后，扩增产物的颜色从紫罗兰变为天蓝色，判断待测芋疫霉为氟噻唑吡乙酮抗性基因型G699V，表示待测芋疫霉对氟噻唑吡乙酮产生抗药性；扩增产物的颜色为紫罗兰色，判定为待测芋疫霉为非氟噻唑吡乙酮抗性基因型G699V，表示待测芋疫霉为非氟噻唑吡乙...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈庆河，王之欣，冯婉珍，李智婷，
申请(专利权)人：海南大学三亚研究院，
类型：发明
国别省市：