偏向于白介素-2受体βγc二聚体并缀合非肽水溶性聚合物的人白介素-2缀合物制造技术

本发明专利技术描述了白介素

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】偏向于白介素
‑
2受体
βγ
c
二聚体并缀合非肽水溶性聚合物的人白介素
‑
2缀合物

技术介绍
(1)专利

[0001]本专利技术涉及白介素
‑
2(IL
‑
2)缀合物，其至少包含一个或多个偏向于结合至IL
‑
2受体βγ
c
二聚体而非结合至IL
‑
2受体αβγ
c
三聚体的氨基酸取代以及在N末端处或附近缀合至非肽水溶性聚合物的非天然氨基酸。IL
‑
2缀合物用于在患者中治疗和预防细胞增殖和癌症。
[0002](2)相关技术描述
[0003]白介素
‑
2(IL
‑
2)于1965年被鉴定为白细胞培养物中产生的因子，当转移时，IL
‑
2可诱导白细胞母细胞的形成。这种活性背后的因子是40多年前发现的第二种细胞因子，最初将其称为T细胞生长因子(TCGF)。在1979年将TCGF称为IL
‑
2，在1983年克隆了本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种白介素2(IL
‑
2)缀合物，其包含IL
‑
2多肽，所述IL
‑
2多肽包含与SEQ ID NO:53中所示的氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、95％、98％或99％同一性的氨基酸序列，并且还包含：(i)相对于野生型人IL
‑
2降低所述IL
‑
2多肽对人IL
‑
2受体αβγ
c
三聚体(IL
‑
2Rαβγ
c
)的亲和力的一个或多个氨基酸取代；和(ii)在所述IL
‑
2多肽的N末端处或附近用缀合至非肽水溶性聚合物的非天然氨基酸进行的氨基酸取代，或在所述IL
‑
2多肽的N末端处或附近的缀合至非肽水溶性聚合物的非天然氨基酸插入；其中相对于野生型人IL
‑
2，所述IL
‑
2多肽与人IL
‑
2受体βγ
c
二聚体(IL
‑
2Rβγ
c
)具有基本上相似的结合亲和力。2.根据权利要求1所述的IL
‑
2缀合物，其中所述IL
‑
2多肽与SEQ ID NO:53中所示的氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、95％、98％或99％同一性，条件是所述IL
‑
2多肽至少包含氨基酸E15、H16、L19、D20、D84、N88、V91、Q126、T123和I129，其中所述氨基酸位置对应于SEQ ID NO:53的氨基酸序列中所示的位置。3.根据权利要求1所述的IL
‑
2缀合物，其中根据表面等离子体共振测定所确定的，所述IL
‑
2多肽缀合物与人IL
‑
2受体α单体(IL
‑
2Rα)不具有可检出的结合。4.根据权利要求1所述的IL
‑
2缀合物，其中所述一个或多个氨基酸取代独立地选自由以下组成的组：K34、T36、R37、T40、F41、K42、F43、Y44、E60、E61、K63、P64、E67、L71、M103、C104和Y106，其中所述氨基酸取代位置对应于SEQ ID NO:53中所示的氨基酸序列中氨基酸的位置。5.根据权利要求3所述的IL
‑
2缀合物，其中在所述IL
‑
2多肽中的所述一个或多个氨基酸取代在位置R37和F41处。6.根据权利要求4所述的IL
‑
2缀合物，其中在所述IL
‑
2多肽中的所述氨基酸取代是R37A和F41K。7.根据权利要求1所述的IL
‑
2缀合物，其中所述IL
‑
2多肽还包含选自由A和S组成的组的氨基酸在位置124处取代半胱氨酸残基，其中所述氨基酸位置对应于SEQ ID NO:53中所示的氨基酸序列中的氨基酸的位置。8.根据权利要求1所述的IL
‑
2缀合物，其中所述IL
‑
2多肽还包含N末端丙氨酸残基。9.根据权利要求1所述的IL
‑
2缀合物，其中所述非天然氨基酸用于取代在位置P1、T2、S3、S4、S5、T6、K7、K8或T9处的氨基酸，或者通过酰胺键连接至N末端氨基酸。10.根据权利要求9所述的IL
‑
2缀合物，其中所述非天然氨基酸位于对应于SEQ ID NO:2中所示的氨基酸序列的位置4的氨基酸位置处。11.根据权利要求1所述的IL
‑
2缀合物，其中所述非天然氨基酸包含官能团且所述水溶性聚合物连接有能够与所述官能团反应以形成共价键的反应性基团。12.根据权利要求1所述的IL
‑
2缀合物，其中所述非天然氨基酸选自由以下组成的组：对叠氮基甲基
‑
L
‑
苯丙氨酸、对叠氮基
‑
L
‑
苯丙氨酸、对乙酰基
‑
L
‑
苯丙氨酸、N6
‑
叠氮基乙氧基
‑
L
‑
赖氨酸、N6
‑
炔丙基乙氧基
‑
L
‑
赖氨酸(PraK)、BCN
‑
L
‑
赖氨酸、降冰片烯赖氨酸、TCO
‑
赖氨酸、甲基四嗪赖氨酸、烯丙氧基羰基赖氨酸、2
‑
氨基
‑8‑
氧代壬酸、2
‑
氨基
‑8‑
氧代辛酸、O
‑
甲基
‑
L
‑
酪氨酸、L
‑3‑
(2
‑
萘基)丙氨酸、3
‑
甲基
‑
苯丙氨酸、O
‑4‑
烯丙基
‑
L
‑
酪氨酸、4
‑
丙基
‑
L
‑
酪氨酸、三
‑
O
‑
乙酰基
‑
GlcNAc
‑
丝氨酸、L
‑
多巴、氟化苯丙氨酸、异丙基
‑
L
‑
苯丙氨酸、对苯甲酰基
‑
L
‑
苯丙氨酸、L
‑
磷酸丝氨酸、膦酰基丝氨酸、膦酰基酪氨酸、对碘
‑
苯丙氨酸、对溴苯丙氨酸、对氨基
‑
L
‑
苯丙氨酸、异丙基
‑
L
‑
苯丙氨酸、对炔丙基氧基
‑
苯丙氨酸、2
‑
氨基
‑3‑
((2
‑
((3
‑
(苄氧基)
‑3‑
氧代丙基)氨基)乙基)硒烷基)丙酸、2
‑
氨基
‑3‑
(苯基硒烷基)丙酸、硒半胱氨酸、间乙酰基苯丙氨酸、2
‑
氨基
‑8‑
氧代壬酸和对炔丙基氧基苯丙氨酸。13.根据权利要求1所述的IL
‑
2缀合物，其中所述非天然氨基酸是对叠氮基甲基
‑
L
‑
苯丙氨酸。14.根据权利要求1所述的IL
‑
2缀合物，其中所述非肽水溶性聚合物具有1kDa至100kDa之间的平均分子量。15.根据权利要求1所述的IL
‑
2缀合物，其中所述非肽水溶性聚合物具有约30kDa的平均分子量。16.根据权利要求1所述的IL
‑
2缀合物，其中所述非肽水溶性聚合物是聚乙二醇(PEG)、聚(丙二醇)(PPG)、乙二醇和丙二醇的共聚物、聚(氧乙基化多元醇)、聚(烯醇)、聚(乙烯吡咯烷酮)、聚(羟烷基甲基丙烯酰胺)、聚(甲基丙烯酸羟烷基酯)、聚(糖)、聚(α
‑
羟基酸)、聚(乙烯醇)、聚磷腈、聚噁唑啉(POZ)、聚(N
‑
丙烯酰吗啉)或其组合。17.根据权利要求1所述的IL
‑
2缀合物，其中所述非肽水溶性聚合物是线性或支链PEG。18.根据权利要求11所述的IL
‑
2缀合物，其中连接至所述反应性基团的所述非肽水溶性聚合物具有下式：(RG)
‑
(接头)
‑
(POLY)
‑
x其中RG是能够与非天然氨基酸的官能团形成共价键的反应性基团；接头是共价键或者取代的或非取代的C1‑
20
烷基；POLY是非肽水溶性聚合物；和x是在所述POLY末端处的醇或甲基基团。19.根据权利要求11所述的IL
‑
2缀合物，其中所述非肽水溶性聚合物的所述反应性基团包含炔且所述非天然氨基酸的所述官能团包含叠氮化物，或者所述非肽水溶性聚合物的所述反应性基团包含叠氮化物且所述非天然氨基酸的所述官能团包含炔。20.根据权利要求18所述的IL
‑
2缀合物，其中连接至所述反应性基团的所述非肽水溶性聚合物具有下式：其中n是约681。21.根据权利要求1所述的IL
‑
2缀合物，其中所述IL
‑
2缀合物包含SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:19、SEQ ID NO:20或SEQ ID NO:21中所示的氨基酸序列。22.一种具有下式的白介素2(IL
‑
2)缀合物
其中n是约681，或其具有下式的区域异构体其中n是约681。23.一种组合物，其包含：根据前述权利要求中任一项所述的IL
‑
2缀合物和药学上可接受的载体或赋形剂。24.一种在个体中治疗增殖性疾病或癌症的方法，其包括：向有需要的个体施用治疗有效量的权利要求1
‑
22中任一项所述的IL
‑
2缀合物或权利要求23所述的组合物，以在所述个体中治疗所述增殖性疾病或癌症。25.一种用于在个体中治疗增殖性疾病或癌症的联合疗法，其包括：向有需要的个体施用治疗有效量的权利要求1
‑
22中任一项所述的IL
‑
2缀合物或权利要求23所述的组合物，以及向所述个体施用治疗有效量的治疗剂，以在所述个体中治疗所述增殖性疾病或癌症。26.根据权利要求25所述的联合疗法，其中所述治疗剂是抗PD1抗体或抗PDL1抗体。27.根据权利要求25所述的联合疗法，其中在施用所述治疗剂之前施用所述IL
‑
2缀合物或组合物。
28.根据权利要求25所述的联合疗法，其中在施用所述治疗剂之后施用所述IL
‑
2缀合物或组合物。29.根据权利要求25所述的联合疗法，其中所述IL
‑
2缀合物或组合物与所述治疗剂同时施用。30.根据权利要求1
‑
22中任一项所述的IL
‑
2缀合物或者根据权利要求23所述的组合物用于治疗增殖性疾病或癌症的用途。31.治疗剂和根据权利要求1
‑
22中任一项所述的IL
‑
2缀合物或者根据权利要求23所述的组合物用于治疗增殖性疾病或癌症的用途。32.根据权利要求31所述的用途，其中所述治疗剂是抗PD1抗体或抗PDL1抗体。33.根据权利要求1
‑
22中任一项所述的IL
‑
2缀合物或者根据权利要求23所述的组合物在制备用于治疗增殖性疾病或癌症的药物中的用途。34.一种白介素2(IL
‑
2)缀合物，其包含IL
‑
2多肽，所述IL
‑
2多肽包含与SEQ ID NO:53中所示的氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、95％、98％或99％同一性的氨基酸序列，并且还包含：(i)一种或多种选自由以下组成的组的氨基酸取代：K34、T36、R37、T40、F41、K42、F43、Y44、E60、E61、K63、P64、E67、L71、M103、C104和Y106；以及(ii)在所述IL
‑
2多肽的N末端处或附近用缀合至非肽水溶性聚合物的非天然氨基酸进行的氨基酸取代，或在所述IL
‑
2多肽的N末端处或附近的缀合至非肽水溶性聚合物的非天然氨基酸插入，其中所述氨基酸位置对应于SEQ ID NO:53的氨基酸序列中所示的位置。35.根据权利要求34所述的IL
‑
2缀合物，所述IL
‑
2多肽氨基酸序列与SEQ ID NO:2中所示的氨基酸序列具有至少80％、85％、90％、95％、98％或99％同一性，条件是所述IL
‑
2多肽至少包含氨基酸E15、H16、L19、D20、D84、N88、V91、Q126、T123和I129，其中所述氨基酸位置对应于SEQ ID NO:53的氨基酸序列中所示的位置。36.根据权利要求34所述的IL
‑
2缀合物，其中在所述IL
‑
2多肽中的所述一个或多个氨基酸取代在位置R37和F41处。37.根据权利要求36所述的IL
‑
2缀合物，其中在所述IL
‑
2多肽中的所述氨基酸取代是R37A和F41K。38.根据权利要求34所述的IL
‑
2缀合物，其中所述IL
‑
2多肽还包含在位置124处的半胱氨酸残基被选自由A和S组成的组的的氨基酸取代。39.根据权利要求34所述的IL
‑
2缀合物，其中所述IL
‑
2多肽还包含N末端丙氨酸残基。40.根据权利要求34所述的IL
‑
2缀合物，其中所述非天然氨基酸用于取代在位置P1、T2、S3、S4、S5、T6、K7、K8或T9处的氨基酸，或者通过酰胺键连接至N末端氨基酸。41.根据权利要求40所述的IL
‑
2缀合物，其中所述非天然氨基酸位于对应于SEQ ID NO:2中所示的氨基酸序列的位置4的氨基酸位置处。42.根据权利要求34所述的IL
‑
2缀合物，其中所述非天然氨基酸包含官能团，并且所述水溶性聚合物连接有能够与所述官能团反应以形成共价键的反应性基团。43.根据权利要求34所述的IL
‑
2多肽缀合物，其中所述非天然氨基酸选自由以下组成的组：对叠氮基甲基
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L
‑
苯丙氨酸、对叠氮基
‑
L
...

【专利技术属性】
技术研发人员：C，
申请(专利权)人：默沙东有限责任公司，
类型：发明
国别省市：