一种高稳定性的呕吐毒素试剂盒及其制备方法、检测方法技术

本申请涉及一种高稳定性的呕吐毒素试剂盒及其制备方法、检测方法；一种高稳定性的呕吐毒素试剂盒，包括金标微孔和试纸条，所述金标微孔包括呕吐毒素标记的鼠抗榛子单克隆抗体和胶体金标记的鼠抗呕吐毒素单克隆抗体；所述试纸条包括底板，所述底板上沿层析方向依次设有样品垫、反应膜以及吸水垫；所述反应膜上沿层析方向依次设有包被有榛子抗原的检测线和包被有羊抗鼠IgG的质控线。本申请的试剂盒可以改善传统的呕吐毒素定量试纸条对温湿度敏感的缺点，使其摆脱控温机器的限制，从而大大节省成本并提高检测效率。大节省成本并提高检测效率。

【技术实现步骤摘要】
一种高稳定性的呕吐毒素试剂盒及其制备方法、检测方法


[0001]本申请涉及免疫层析试纸条领域，更具体地说，它涉及一种高稳定性的呕吐毒素试剂盒及其制备方法、检测方法。

技术介绍

[0002]呕吐毒素(vomitoxin)，又称脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)，化学名为3α,7α,15
‑
三羟基草镰孢菌
‑9‑
烯
‑8‑
酮，主要来自镰刀菌属。呕吐毒素因可以引起猪的呕吐而得名；当人类及动物摄入被呕吐毒素污染的食物后，会产生厌食、呕吐、腹泻、发烧、站立不稳、反应迟钝等急性中毒症状，严重时会损害造血系统造成死亡。因此，快速、准确地检测食物中的呕吐毒素具有重要意义。
[0003]目前检测呕吐毒素的方法主要有两大类：仪器分析方法和免疫学检测法；仪器分析方法主要有薄层色谱法(TLC)、气相色谱法(GC)、高压液相色谱法(HPLC)、气质联用(GC
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MS)、液质联用(HPLC
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MS)等；免疫学检测法主要有免疫亲合柱
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荧光检测(IAC
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种高稳定性的呕吐毒素试剂盒，其特征在于，包括金标微孔和试纸条；所述金标微孔包括呕吐毒素标记的鼠抗榛子单克隆抗体和胶体金标记的鼠抗呕吐毒素单克隆抗体；所述试纸条包括底板，所述底板上沿层析方向依次设有样品垫、反应膜以及吸水垫；所述反应膜上沿层析方向依次设有包被有榛子抗原的检测线和包被有羊抗鼠IgG的质控线。2.根据权利要求1所述的一种高稳定性的呕吐毒素试剂盒，其特征在于，所述金标微孔采用如下方法制备：取呕吐毒素标记的鼠抗榛子单克隆抗体，与冻干稀释液混合均匀后，分装在低吸附酶标板中，冷冻干燥后，得到冻干粉饼Ⅰ；取胶体金标记的鼠抗呕吐毒素单克隆抗体，与冻干稀释液混合均匀后，分装在低吸附酶标板中，冷冻干燥后，得到冻干粉饼Ⅱ；将冻干粉饼Ⅱ转移到冻干粉饼Ⅰ所在的微孔中，得到金标微孔。3.根据权利要求2所述的一种高稳定性的呕吐毒素试剂盒，其特征在于，所述冻干稀释液包括如下浓度的组分：质量体积分数为3
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7％的海藻糖和质量体积分数为0.5
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2％的酪蛋白。4.根据权利要求2所述的一种高稳定性的呕吐毒素试剂盒，其特征在于，所述呕吐毒素标记的鼠抗榛子单克隆抗体与冻干稀释液的体积比为0.01
‑
1:60；所述胶体金标记的鼠抗呕吐毒素单克隆抗体与冻干稀释液的体积比为1
‑
10:56。5.根据权利要求1所述的一种高稳定性的呕吐毒素试剂盒，其特征在于，所述胶体金标记的鼠抗呕吐毒素单克隆抗体采用如下方法制备而成：向胶体金中加入碳酸盐溶液，混合均匀后，边搅拌边加入鼠抗呕吐毒素单克隆抗体，室温反应1
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3h后，再逐滴加入载体蛋白溶液，室温反应1
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2h后，离心收集沉淀并用复溶液重悬，得到胶体金标记的鼠抗呕吐毒素单克隆抗体。6.根据权利要求5所述的一种高稳定性的呕吐毒素试剂盒，其特征在于，所述复溶液包括如下浓度的组分：质量体积浓度为3
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7％的牛血清白蛋白、质量体积浓度为1
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5％的海藻糖以及质量体积浓度为0.5
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2％的吐温
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20。7.根据权利要求1所述的一种高稳定性的呕吐毒素试剂盒，其特征在于，所述呕吐毒素标记的鼠抗榛子单克隆抗体采用如下方法制备而成：取呕吐毒素溶于...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘红兵，方淑兵，于秋香，
申请(专利权)人：青岛普瑞邦生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：