Gas5基因敲除小鼠构建肾纤维化的方法技术

本发明专利技术属于生物领域，具体涉及Gas5基因敲除小鼠构建肾纤维化模型的方法。本发明专利技术提供了用于Gas5基因敲除小鼠构建肾纤维化的Cas9/sgRNA靶点，本发明专利技术还提供了Gas5基因敲除小鼠构建肾纤维化的方法。本发明专利技术运用CRISPR

【技术实现步骤摘要】
Gas5基因敲除小鼠构建肾纤维化的方法


[0001]本专利技术属于生物领域，具体涉及Gas5基因敲除小鼠构建肾纤维化模型的方法。

技术介绍

[0002]基因编辑技术是利用人工设计的核酸酶对基因组定点修饰，其修饰手段包括基因敲除、敲入、单碱基编辑、引导编辑等。近年来，基因编辑技术飞速发展。从锌指核酸酶(Zinc findernucleases,ZFNs)技术到类转录激活因子样效应物核酸酶(Transcription activator
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like effectornucleases,TALEN)技术，再到突破性的规律成簇的间隔短回文重复及其相关蛋白(Clusteredregularly interspaced short palindromic repeat/associated protein,CRISPR/Cas9)系统，基因编辑水平日益成熟。CRISPR/Cas系统来源于细菌和古细菌，是为抵御噬菌体病毒和外源质粒DNA入侵的一种适应性免疫系统，它通过小段RNA(sgRNA)与宿主DNA识别并借助Cas9核酸酶对基因进行高效本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.用于Gas5基因敲除小鼠构建肾纤维化的Cas9/sgRNA靶点，其特征在于为如下任一：Gas5
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1：TAATGGGTCACCTCAAGTGAGas5
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2：TTTCTGAGGTGCCTGGATGGGas5
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3：ATGGAGGCTCAAATAGAAGAGas5
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4：TCTGTGGCAAAGGAGGATGAGas5
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5：CACAAGATGTCCCATCACAGGas5
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6：ATAATGGTTTGAATAAAGAA。2.Gas5基因敲除小鼠构建肾纤维化的方法，其特征在于包含下述步骤：步骤一、构建Gas5全身敲除小鼠；步骤二、利用步骤一所得的小鼠构建肾纤维化小鼠模型。3.根据权利要求2所述的Gas5基因敲除小鼠构建肾纤维化的方法，其特征在于：所述步骤一的构建Gas5全身敲除小鼠包括以下步骤：1.1)、体外设计构建sgRNA；获得小鼠的Gas5基因序列，设计针对Gas5基因的sgRNA序列；1.2)体外受精及胚胎移植：运用血清和人绒毛膜促性腺激素促使雌性小鼠超数排卵后与雄性小鼠合笼，次日挑取见栓雌鼠剪取双侧输卵管获得受精卵，并将其置于显微注射操作系统中；将sgRNA与Cas9蛋白混合后调整至适宜浓度，注射至受...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈红波，张祥，高祥福，寿旗扬，周佳玥，项晓骏，胡守慈，叶晴晴，
申请(专利权)人：浙江省中医院，浙江中医药大学附属第一医院浙江省东方医院，
类型：发明
国别省市：