一种用液相色谱法测盐酸文拉法辛片有关物质的方法技术

本发明专利技术公开一种用液相色谱法测盐酸文拉法辛片有关物质的方法，色谱条件：色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流速1.0ml/min；柱温30℃，检测波长226nm；以三乙胺

【技术实现步骤摘要】
一种用液相色谱法测盐酸文拉法辛片有关物质的方法


[0001]本专利技术涉及药物分析
，具体涉及一种用液相色谱法测盐酸文拉法辛片有关物质的方法。

技术介绍

[0002]盐酸文拉法辛片为抗抑郁症药，主要成分为盐酸文拉法辛，文拉法辛通过抑制5
‑
羟色胺(5
‑
HT)、去甲肾上腺素(NE)的再摄取而增强中枢神经系统的5
‑
HT、NE效应有关。盐酸文拉法辛化学名：(
±
)
–1–
[2
–
(二甲胺基)
–1–
(4
–
甲氧苯基)乙基]–
环己醇盐酸盐；分子式：C17H27NO2HCl。
[0003]据悉，目前盐酸文拉法辛中含有8个已知杂质，如下表：
[0004][0005]
技术实现思路

[0006]本专利技术提供一种用液相色谱法测盐酸文拉法辛片有关物质的方法，可有效的分离分析盐酸文拉法辛及杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、杂质G、杂质H。
[0007]具体技术方案如下：
[0008]一种用液相色谱法测盐酸文拉法辛片有关物质的方法，
[0009]1)色谱条件：色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流速1.0ml/min；柱温30℃，检测波长226nm；以三乙胺
‑
乙腈
‑
水(1:20:80)，用磷酸调节pH至3.5，作为流动相A；以三乙胺
‑
乙腈
‑/>水(1:50:50)，用磷酸调节pH至3.5，作为流动相B；按照下表梯度程序进行洗脱，进样体积20μl；
[0010][0011]2)供试品溶液的制备：取样品加入流动相A，超声10min使溶解，放冷，用流动相A溶液稀释至刻度，摇匀，经0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；
[0012]3)测定：将供试品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图。
[0013]本专利技术的方法具有良好的进样精密度、重复性、中间精密度，准确度、回收率好，耐用性良好。
附图说明：
[0014]图1
‑
图6为盐酸文拉法辛杂质A、杂质C、杂质D、杂质F、杂质G、盐酸文拉法辛有关物质线性图。
具体实施方式：
[0015]下面结合具体实施例对本专利技术所提供的一种用液相色谱法测盐酸文拉法辛片有关物质的方法进行详细说明。
[0016]1、色谱条件筛选
[0017](1)检测波长的选择
[0018]杂质对照品溶液储备液配制：分别精密称取杂质A10.84mg、杂质B10.47mg、杂质C10.20mg、杂质D10.43mg、杂质E10.43mg、杂质F10.13mg、杂质G10.18mg、杂质H10.15mg、盐酸文拉法辛10.20mg，分别置于20ml量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度作为对照品储备液。
[0019]杂质对照品溶液的配制：分别精密量取上述各杂质对照品储备液加甲醇稀释制成每1ml约含10μg溶液。
[0020]测定方法：取上述各杂质对照品溶液及盐酸文拉法辛对照品溶液适量，于紫外
‑
可见分光光度计在190
‑
400nm处进行全波长扫描，记录色谱图，检测结果见下表。
[0021]检测波长的选择检测结果：
[0022]名称浓度(μg/ml)最大吸收波长(nm)吸光度A杂质A10.77224.50.55664杂质B10.43229.00.38588杂质C10.16226.00.35838杂质D10.41226.00.37318杂质E10.21226.50.36197杂质F10.08228.00.38362杂质G10.15226.00.31368杂质H10.11225.50.48863盐酸文拉法辛10.19226.50.39043
[0023]根据上述试验结果及盐酸文拉法辛片项下有关物质检测，最终选择检测波长为226nm。
[0024](2)色谱条件
[0025]色谱柱：Partisil ODS 3 250
×
4.6mm SN:H82920；
[0026]检测波长：226nm；
[0027]流速：1.0ml/min；
[0028]进样体积：20μl；
[0029]混合杂质对照品溶液配制：精密量取“检测波长的选择”项下各杂质对照品储备液1ml，盐酸文拉法辛对照品储备液2ml，置同一25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
[0030]流动相A：三乙胺
‑
乙腈
‑
水(1:20:80)，用磷酸调节pH至3.5；
[0031]流动相B：三乙胺
‑
乙腈
‑
水(1:50:50)，用磷酸调节pH至3.5；
[0032]按下表进行梯度洗脱
[0033][0034]取混合杂质对照品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图，检测结果见下表。
[0035]色谱条件结果：
[0036][0037]实验结论：由上表可知，杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、杂质G、杂质H的相对保留时间能较好分开，且各杂质及主成分的理论塔板数均大于2000，杂质之间的分离度均大于2.5，该色谱条件较适合盐酸文拉法辛片的有关物质检测。
[0038](3)单个杂质定位
[0039]在上述色谱条件下进行。
[0040]杂质单标溶液：分别精密量取“检测波长的选择”项下各杂质对照品储备液各1ml，分别置于25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；其中杂质E单标另外配制为：称取杂质E2.43mg置于100ml量瓶中加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀即得。
[0041]取各对照品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图，检测结果见下表。
[0042]杂质定位结果：
[0043][0044]实验结论：由上述试验结果可知，该色谱条件下，杂质与杂质之间，杂质与主峰之间的分离度较好、相对保留时间较合理，理论板数符合要求。
[0045]2、供试品溶液制备考察
[0046](1)提取溶剂的考察
[0047]色谱条件：色谱柱Partisil ODS
‑
3250
×
4.6mm SN:H82920；流速1.0ml/min；柱温30℃，检测波长226nm；以三乙胺
‑
乙腈
‑
水(1:20:80)，用磷酸调节pH至3.5，作为流动相A；以三乙胺
‑
乙腈
‑
水(1:50:50)，用磷酸调节pH至3.5，作为流动相B；按照下表梯度程序进行洗脱，进样体积20μl。
[0048][0049]供试品溶液的制备：分别称取本品细粉0.8g三份，分别置于100ml量瓶中，分别加入约80ml 2.4％磷酸溶液，水、流动相A，超声15分钟，取出放至本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用液相色谱法测盐酸文拉法辛片有关物质的方法，其特征在于，1)色谱条件：色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流速1.0ml/min；柱温30℃，检测波长226nm；以三乙胺
‑
乙腈
‑
水(1:20:80)，用磷酸调节pH至3.5，作为流动相A；以三乙胺
‑
乙腈
‑
水(1:50:50)，用磷酸调节pH至3.5，作为流动相B；按照下表梯度程序进行洗脱，进样体积20μl；2)供试品溶液的制备：取样品加入流动相A溶解；3)测定：将供试品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图。2.根据权利要求1所述的一种用液相色谱法测盐酸文拉法辛...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗安华，潘小海，王定兵，叶琴，周舟，
申请(专利权)人：贵州圣济堂制药有限公司，
类型：发明
国别省市：