一种小鼠味蕾组织生物传感器在筛选TRPM8受体拮抗剂中的应用制造技术

本发明专利技术提供一种小鼠味蕾组织生物传感器在筛选TRPM8拮抗剂中的应用，所述小鼠味蕾组织生物传感器是以丝网印刷电极为检测器件，小鼠味蕾组织膜为辨识原件，构建小鼠味蕾组织生物传感器，该组织生物传感器方法灵敏度高，特异性强，所需样品体积小，检测浓度低至10

【技术实现步骤摘要】
一种小鼠味蕾组织生物传感器在筛选TRPM8受体拮抗剂中的应用


[0001]本专利技术属于中药领域，具体涉及一种小鼠味蕾组织生物传感器在筛选TRPM8受体拮抗剂中的应用。

技术介绍

[0002]TRP通道是电压门控阳离子通道，能感知光线、温度、触觉、疼痛、味觉等刺激，其中热激活通道包括TRPV1
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4，冷激活通道包括TRPM8和TRPA1。TRP离子通道与中药的药性—辛温、辛凉有一定的关联，许多来源于辛味中药的天然化合物可以调节TRP通道，因此针对TRP通道的研究可在一定程度上解释中药药性的科学内涵。TRPM8是研究较多的TRP通道之一，是一种冷激活的温觉TRP通道，分布于背根神经节和三叉神经的感觉神经元。TRPM8通道可被多种刺激激活，其中包括一定的低温(8
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26℃)以及冷却剂，比如WS
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3、薄荷醇、等激活剂。TRPM8的激动剂和拮抗剂都已被研究用于各种治疗，TRPM8拮抗剂作为治疗神经性疼痛、炎症、偏头痛和癌症的潜在药物。但大多数TRPM8拮抗剂缺乏对TRPM8的选择性，可与TRPV1本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种小鼠味蕾组织生物传感器在筛选TRPM8受体拮抗剂中的应用，其特征在于，包括一种小鼠味蕾组织生物传感器，该组织生物传感器是以丝网印刷电极为检测器件，以小鼠味蕾组织膜为辨识原件；还包括此组织生物传感器在筛选TRPM8受体拮抗剂中的应用。2.根据权利要求1任一所述的一种小鼠味蕾组织生物传感器的应用，其特征在于，具体步骤如下：步骤1：将小鼠味蕾组织放置于两张微孔滤膜之间，用海藻酸钠淀粉胶溶液进行固定，形成三明治结构的生物组织膜；步骤2：将制备好的组织膜浸入CaCl2溶液后，固定在丝网印刷工作电极上，组织传感器构建完成，并进行检测参数优化；步骤3：采用步骤2中的小鼠味蕾组织传感器，依次加入空白溶剂和浓度由低到高的TRPM8激动剂溶液，采用电化学工作站记录电极间的电流强度；步骤4：以TRPM8激动剂溶液的浓度为横坐标，以电流变化率为纵坐标，进行拟合，确定WS
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3溶液进一步细分的浓度范围；在细分的不同浓度的TRPM8激动剂溶液中加入固定浓度的备选拮抗剂，以混合液的浓度为横坐标，响应电流变化率为纵坐标，进行双曲线拟合，通过动力学方程的拟合确定TRPM8拮抗剂对TRPM8激动剂的动力学过程；步骤5：以TRPM8激动剂与拮抗剂混合溶液浓度的倒数为横坐标，以响应电流变化率的倒数为纵坐标，绘制双倒数曲线，计算拮抗剂对TRPM8激动剂的抑制常数，并根据酶促动力学原理判断拮抗剂对TRPM8受体的拮抗类型。3.根据权利要求1所述的一种小鼠味蕾组织生物传感器的应用，其特征在于，所述的海藻酸钠淀粉胶溶液的质量分数为1％
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5％，通过可溶性淀粉与1％
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5％的海藻酸钠的戊二醛溶液混合制成。4.根据权利要求1所述的一种小鼠味蕾组织生物传感器的应用，其特征在于，权利要求2步...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴志生，王静，
申请(专利权)人：北京中医药大学，
类型：发明
国别省市：