一种预防骨质疏松的鼠李糖乳杆菌JYLR-219及其菌剂和应用制造技术

本发明专利技术涉及微生物技术领域，具体涉及一种预防骨质疏松的鼠李糖乳杆菌JYLR

【技术实现步骤摘要】
一种预防骨质疏松的鼠李糖乳杆菌JYLR
‑
219及其菌剂和应用


[0001]本专利技术涉及微生物
，具体涉及一种预防骨质疏松的鼠李糖乳杆菌JYLR
‑
219及其菌剂和应用。

技术介绍

[0002]骨质疏松是一种以骨量低下、骨微结构损坏，导致骨脆性增加、易发生骨折为特征的全身性骨病，以绝经期妇女及老年人的原发性骨质疏松最为多见，其发病原因主要是破骨细胞主导的骨吸收大于成骨细胞主导的骨形成，骨密度降低，易导致骨折和残疾。
[0003]目前，针对骨质疏松症常见的治疗方法有饮食补充、保健品服用及药物治疗。一、通过饮食大量摄入肉类、蛋类等增加钙的补充，从而达到预防骨质疏松的效果；但随着现当代人“富贵病”的发生，高肉类、蛋类食品的补充往往造成“三高”的发生。二、通过大量服用保健品，如钙片、氨糖软骨素等进行补充；但目前市面上保健品良莠不齐，往往具有夸大功效宣传，更兼老年人消化吸收系统大大弱化，吸收问题得不到有效保证，甚至容易造成上火便秘等现象，而且保健品价格昂贵，普通消费者难以长久服用。三、通过服用维生素D、钙制剂、抗骨吸收药等进行药物治疗；而通常治疗骨质疏松的药物都会具有一定程度的副作用，损害患者的肝肾功能和消化道功能，或者影响患者体内的内分泌代谢水平，不宜长期服用。

技术实现思路

[0004]针对上述骨质疏松症治疗方式的不足，本专利技术提供了一种预防骨质疏松的鼠李糖乳杆菌JYLR
‑
219及其菌剂和应用，为防治骨质疏松症提供一种新的途径，具有无副作用、安全有效的优点。
[0005]第一方面，本专利技术提供的一种预防骨质疏松的鼠李糖乳杆菌JYLR
‑
219，所述鼠李糖乳杆菌（Lactobacillus rhamnosus）JYLR
‑
219已于2019年7月8日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC NO.18097。
[0006]第二方面，本专利技术提供一种包含如权利要求1所述的鼠李糖乳杆菌JYLR
‑
219的菌剂。
[0007]进一步的，所述菌剂包括鼠李糖乳杆菌JYLR
‑
219的冻干型菌粉。
[0008]进一步的，所述冻干型菌粉的制备方法包括以下步骤：（1）取保藏的鼠李糖乳杆菌JYLR
‑
219在MRS平板培养基上活化，将活化后的鼠李糖乳杆菌按照1%的接种量接种于MRS液体培养基中培养24h，获得菌液；（2）将菌液离心后，收集菌体，使用无菌生理盐水洗涤后，重悬于质量比为15%的复原脱脂乳中，获得悬浊液；调整悬浊液中鼠李糖乳杆菌JYLR
‑
219的浓度为1.0~2.0
×
10
10
cfu/mL，获得菌悬液；将菌悬液冷冻干燥后，获得冻干型菌粉。
[0009]进一步的，所述步骤（1）中的MRS平板培养基制备方法为：将蛋白胨 10g、牛肉粉 5g、三水醋酸钠 5g、七水磷酸氢二钾 2g、吐温
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80 1mL、四水硫酸锰 0.05g、柠檬酸三铵2g、
葡萄糖20g、七水硫酸镁 0.2g、琼脂 15g、蒸馏水 1000mL混合，自然pH，搅拌混合液，在121℃、0.1MPa下灭菌20min，将灭菌后的混合液倒入平皿中，放凉后待用。
[0010]第三方面，本专利技术提供一种如权利要求1所述的鼠李糖乳杆菌JYLR
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219在制备增强骨密度、预防骨质疏松产品中的应用。
[0011]第四方面，本专利技术提供一种如权利要求2所述的菌剂在制备增强骨密度、预防骨质疏松产品中的应用。
[0012]本专利技术的有益效果在于：1. 本专利技术提供的一种预防骨质疏松的鼠李糖乳杆菌JYLR
‑
219主要应用于骨质疏松症人群，解决骨密度低下问题。该菌种有较强的胃肠道存活率和肠道定植能力，能够显著增加成骨细胞密度并明显降低破骨细胞的密度，从而起到增强骨密度、预防骨质疏松的作用。
[0013]2. 本专利技术利用保藏菌株鼠李糖乳杆菌JYLR
‑
219制成内服产品，便于临床治疗骨质疏松，安全有效，且无副作用。
附图说明
[0014]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，对于本领域普通技术人员而言，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0015]图1是本专利技术实施例5中对照组和实验组小鼠成骨细胞的显微镜观察结果。
[0016]图2是本专利技术实施例6中对照组和实验组小鼠破骨细胞的显微镜观察结果。
具体实施方式
[0017]为了使本
的人员更好地理解本专利技术中的技术方案，下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本专利技术保护的范围。
[0018]实施例1 鼠李糖乳杆菌JYLR
‑
219的筛选、纯化和鉴定1、菌源2018年4月23日采集于新疆伊犁州牧民自制发酵酸奶。
[0019]2、菌株的筛选（1）对酸奶随取样，进行稀释，稀释梯度为10
‑1、10
‑2、10
‑3、10
‑4、10
‑5、10
‑6、10
‑7，标号分别为1#、2#、3#、4#、5#、6#、7#，待用；（2）制备MRS平板培养基：将蛋白胨 10g、牛肉粉 5g、三水醋酸钠 5g、七水磷酸氢二钾 2g、吐温
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80 1mL、四水硫酸锰 0.05g、柠檬酸三铵2g、葡萄糖20g、七水硫酸镁 0.2g、琼脂 15g、蒸馏水 1000mL混合，自然pH，搅拌菌液后，在121℃、0.1MPa下灭菌20min，将灭菌后的培养基倒入平皿中，放凉后待用；（3）培养：将1#、2#、3#、4#、5#、6#、7#溶液分别取0.1mL使用涂布器涂布在MRS平板培养基中，于37℃、厌氧条件下培养48h；
（4）挑选菌落：按照直径1~2mm，菌落圆润、边缘整齐、微白色中间有凸起的菌落特征挑选菌落；（5）分离纯化：根据步骤（4）的菌落特征挑取5个单菌落，采用划线法接种至MRS平板培养基上，于37℃、厌氧条件下培养48h，挑取单菌落，置于甘油管中
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70℃保藏。
[0020]2、鉴定将分离纯化后的单菌落送去鉴定，鉴定单位：生工生物工程（上海）股份有限公司。
[0021]（1）鉴定过程中，使用的引物如下：27F：5'
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‑
3'；1492R：5'
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GGTTAC本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种预防骨质疏松的鼠李糖乳杆菌JYLR
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219，其特征在于，所述鼠李糖乳杆菌（Lactobacillus rhamnosus）JYLR
‑
219已于2019年7月8日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC NO.18097。2.一种包含如权利要求1所述的鼠李糖乳杆菌JYLR
‑
219的菌剂。3.如权利要求2所述的菌剂，其特征在于，所述菌剂包括鼠李糖乳杆菌JYLR
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219的冻干型菌粉。4.如权利要求3所述的菌剂，其特征在于，所述冻干型菌粉的制备方法包括以下步骤：（1）取保藏的鼠李糖乳杆菌JYLR
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219在MRS平板培养基上活化，将活化后的鼠李糖乳杆菌按照1%的接种量接种于MRS液体培养基中培养24h，获得菌液；（2）将菌液离心后，收集菌体，使用无菌生理盐水洗涤后，重悬于质量比为15%的复原脱脂乳中，获得...

【专利技术属性】
技术研发人员：潘仕城，庞颂，刘红亮，王丽媛，郄璐，王雪娇，刘鑫，
申请(专利权)人：中科嘉亿营养医学山东微生态研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：