分子转子分析α-D-1,4葡聚糖混合物组分含量及其比值的应用制造技术

本发明专利技术公开了分子转子在分析α

【技术实现步骤摘要】
分子转子分析
α
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1,4葡聚糖混合物组分含量及其比值的应用


[0001]本专利技术涉及分子转子分析α
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1,4葡聚糖混合物组分含量及其比值的应用。

技术介绍

[0002]α
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1,4葡聚糖是在食品、化工、制药等领域具有重要应用的功能性高分子化合物。常见的含有α
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1,4葡聚糖的物质有麦芽糖浆、麦芽寡糖、麦芽糊精、直链淀粉和脱支淀粉等，通常由不同比例的多糖(聚合度大于10)和寡糖(聚合度小于10)组成。大量研究表明，α
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1,4葡聚糖混合物的组分含量及其比值会影响其贮藏稳定性、凝胶性、溶解性、甜度、还原性等重要功能性质。目前，α
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1,4葡聚糖混合物的组分含量及其比值分析主要依赖体积排阻色谱(SEC)和荧光辅助毛细管电泳(FACE)等色谱分析技术，费用高、耗时长、需要专业人员，分析效率不高。因此，灵敏简便的、用于分析α
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1,4葡聚糖混合物的组分含量及其比值的新技术意义重大。
[0003]目前，分子转子的荧光行为主要被用于监控细胞质(膜)等的黏度变化、蛋白质聚合等生物化学过程，尚无分子转子用于α
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1,4葡聚糖混合物的组分含量及其比值的报道。

技术实现思路

>[0004]本专利技术的目的是提供分子转子分析α
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1,4葡聚糖混合物的组分含量及其比值的应用。本专利技术首先保护分子转子在分析α
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1,4葡聚糖混合物的组分含量及其比值中的应用。本专利技术通过使用分子转子作为荧光探针，其产生的荧光可以灵敏地反映周围微环境的空间约束，而α
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1,4葡聚糖混合物中不同链长的葡聚糖对分子转子的约束强度不同，从而可以使用分子转子的荧光特性来表征α
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1,4葡聚糖混合物的组分含量及其比值。
[0005]本专利技术还提供一种α
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1,4葡聚糖混合物的组分含量及其比值的荧光分析方法。
[0006]本专利技术所提供的α
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1,4葡聚糖混合物的组分含量及其比值的荧光分析方法，包括如下步骤：
[0007](1)将待测α
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1,4葡聚糖混合物分散在溶剂中，得到待测葡聚糖混合物分散液；
[0008](2)向上述待测葡聚糖混合物分散液中加入分子转子，分散均匀，得到待测的含分子转子的葡聚糖混合物分散液；
[0009](3)测定分子转子在所述待测的含分子转子的葡聚糖混合物分散液中的发射荧光特征参数；
[0010](4)选择已知组分含量及其比值的α
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1,4葡聚糖混合物样品，使用相同成分的溶剂制备与待测样品浓度相同的标准α
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1,4葡聚糖混合物分散液，并加入同样浓度的分子转子，分散均匀，得到含分子转子的标准α
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1,4葡聚糖混合物分散液；
[0011](5)测定所述含分子转子的标准α
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1,4葡聚糖混合物分散液中分子转子的发射荧光特征参数，以获得的特征参数值进行单点校正，或建立标准曲线，确定待测α
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1,4葡聚糖混合物的多糖和寡糖含量及其比值。
[0012]步骤(1)、(4)中，所述溶剂为水、缓冲液、强碱溶液、N,N
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二甲基甲酰胺、N,N
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二甲基乙酰胺、二甲基亚砜、吡啶、丙酮、四氢呋喃中的一种或几种；
[0013]所述待测葡聚糖混合物分散液、标准α
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1,4葡聚糖混合物分散液中，待测葡聚糖混合物的浓度可为0.1％—2％(w/v)，具体可为0.5％(w/v)或1％(w/v)；
[0014]步骤(4)中，所述已知组分含量及其比值的α
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1,4葡聚糖混合物样品的测定方法，可使用但不限于体积排阻色谱法；
[0015]步骤(1)
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(5)中，所述分子转子为结构中包括电子受体基团、电子供体基团和共轭π键结构，在周围环境的阻滞作用下会产生荧光的物质；
[0016]所述分子转子包括但不限于久洛啶衍生物、二烷基苯胺衍生物、硼
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二吡咯亚甲基衍生物、卟啉衍生物等；
[0017]所述待测的含分子转子的葡聚糖混合物分散液、含分子转子的标准α
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1,4葡聚糖混合物分散液中，分子转子的浓度为1μM以上，具体可为10μM；
[0018]步骤(3)、(5)中，所述的发射荧光特征参数为荧光强度、量子产率中的一种或多种；
[0019]步骤(5)中，所述单点校正的操作为：以单个标准α
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1,4葡聚糖混合物分散液中的发射荧光特征参数和空白分散液的发射荧光特征参数为参照，建立标准工作曲线从而确定待测α
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1,4葡聚糖混合物的组分含量及其比值；
[0020]所述建立标准曲线的操作为：配制2个及以上的已知组分含量及其比值的标准α
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1,4葡聚糖混合物分散液，以其含量和发射荧光光谱特征确定标准工作曲线上的点，根据标准工作曲线确定待测α
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1,4葡聚糖混合物的组分含量及其比值。
[0021]与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：
[0022]本专利技术的方法易于操作，对操作人员没有特殊技能要求；样品的前处理方法简便，溶剂消耗少，对环境较为友好；所需样品量少，可低至微克级；可实现高通量检测，分析速度大幅提高；仪器要求低，成本显著降低；分析结果稳定可靠。
附图说明
[0023]图1为本专利技术实施例1所作的标准工作曲线。
[0024]图2为本专利技术实施例2所作的标准工作曲线。
具体实施方式
[0025]下面结合具体实施方式对本专利技术进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本专利技术，而不是为了限制本专利技术的范围。以下提供的实施例可作为本
普通技术人员进行进一步改进的指南，并不以任何方式构成对本专利技术的限制。
[0026]下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.分子转子在分析α
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1,4葡聚糖混合物组分含量及其比值的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述分子转子为结构中包括电子受体基团、电子供体基团和共轭π键结构，在周围环境的阻滞作用下会产生荧光的物质。3.一种α
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1,4葡聚糖混合物组分含量及其比值的荧光分析方法，包括如下步骤：(1)将待测α
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1,4葡聚糖混合物分散在溶剂中，得到待测葡聚糖混合物分散液；(2)向上述待测葡聚糖混合物分散液中加入分子转子，分散均匀，得到待测的含分子转子的葡聚糖混合物分散液；(3)测定分子转子在所述待测的含分子转子的葡聚糖混合物分散液中的发射荧光特征参数；(4)选择已知组分含量及其比值的α
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1,4葡聚糖混合物样品，使用相同成分的溶剂制备与待测样品浓度相同的标准α
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1,4葡聚糖混合物分散液，并加入同样浓度的分子转子，分散均匀，得到含分子转子的标准α
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1,4葡聚糖混合物分散液；(5)测定所述含分子转子的标准α
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1,4葡聚糖混合物分散液中分子转子的发射荧光特征参数，以获得的特征参数值进行单点校正，或建立标准曲线，确定待测α
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1,4葡聚糖混合物组分含量及其比值。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：步骤(1)、(4)中，所述溶剂为水、缓...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭星云，黄明飞，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：