一种小鼠皮肤光老化模型构建方法及装置制造方法及图纸

技术编号:37042094 阅读:28 留言:0更新日期:2023-03-29 19:21
本发明专利技术公开了一种小鼠皮肤光老化模型构建方法及装置,包括照明箱,所述照明箱的顶壁安装有控制开关,所述照明箱的两侧外壁贯穿安装有通风管,所述通风管远离照明箱的一端安装有过滤网,所述通风管的内侧安装有换风扇,所述照明箱的内侧顶壁安装有照明灯,所述照明箱的底壁活动安装有底板,所述底板的顶部安装有嵌合框,嵌合框位于照明箱的内侧。本发明专利技术通过安装有多组照明灯,照明灯固定在照明箱的内侧,多组照明灯中分为UVA灯和UVB灯,保证照明灯可以平稳运行,UVA灯和UVB灯配合发出复合光线,以一个最小红斑量为初始剂量,递增重复照射,观察照射对实验动物的影响,以不改变其活动状态为宜,可以降低饲养成本,节约实验时间。节约实验时间。节约实验时间。

【技术实现步骤摘要】
一种小鼠皮肤光老化模型构建方法及装置


[0001]本专利技术涉及小鼠皮肤光老化模型构建
,具体为一种小鼠皮肤光老化模型构建方法及装置。

技术介绍

[0002]皮肤衰老是目前快速更新的化妆品市场以及众多整形科医师研究的热点问题。内源性老化和外源性老化联合作用于机体,最终导致衰老的发生。内源性老化是一种生理性过程,影响因素包括基因、激素变化等。外源性老化是病理性过程,主要由紫外线影响,除了太阳光外,人造灯同时也可产生中波紫外线(UVB及)长波紫外线(UVA),因此不仅仅是户外被迫长期接受紫外线辐射的人群外,一些室内工作者每天也无意识的会接受紫外线辐射。
[0003]现有的小鼠皮肤光老化模型构建存在的缺陷是:
[0004]1、专利文件CN103421763A,“一种细胞光老化模型的体外构建方法,包括如下步骤:(1)获取新生小鼠皮肤成纤维原代细胞,并在体外使用DMEM+10%FBS培养;(2)待小鼠皮肤成纤维细胞生长至80%时传代,允许细胞贴壁生长24小时;然后进行首次中波紫外线照射,随后每隔12小时,重复照射4次;最末次照射24

72h后得到小鼠皮肤成纤维细胞光老化模型。本专利技术应用小鼠来源细胞,一次取材即可获得大量原代细胞;避免了细胞系的反复冻存和活力不足的缺点;另外,体外培养时细胞活力好,在限定代次内不会对UVB诱导的衰老表型产生干扰;且造模所需时间短,仅需2天;效果稳定,末次照射后24小时即可观察到衰老表型”,但是上述公开文件中缺少逐渐递增光源强度的步骤,无法对小鼠表皮的便捷进行详细观察。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种小鼠皮肤光老化模型构建方法及装置及其生产工艺,以解决上述
技术介绍
中提出的问题。
[0006]为实现上述目的,本专利技术提供如下技术方案:一种小鼠皮肤光老化模型构建装置,包括照明箱,所述照明箱的顶壁安装有控制开关,所述照明箱的两侧外壁贯穿安装有通风管,所述通风管远离照明箱的一端安装有过滤网,所述通风管的内侧安装有换风扇,所述照明箱的内侧顶壁安装有照明灯,所述照明箱的底壁活动安装有底板,所述底板的顶部安装有嵌合框,嵌合框位于照明箱的内侧,所述底板的顶部安装有支撑杆,所述支撑杆的顶部安装有动物箱,所述动物箱的顶部通过连接座活动连接有轴承杆,轴承杆的正面安装有顶框,所述动物箱的两侧内壁开设有贯穿孔,所述动物箱的两侧安装有支撑架,所述支撑架的内侧活动安装有喂水器,喂水器的底端贯穿贯穿孔的内侧,所述照明箱的一侧安装有温度湿度感应器,温度湿度感应器位于通风管的前方,所述动物箱的底部通过螺纹安装有安装螺钉,所述动物箱的底部通过安装螺钉安装有安装框,所述安装框的内侧安装有支撑网,所述动物箱的内壁安装有食槽。
[0007]优选的,一种小鼠皮肤光老化模型构建方法,包括如下步骤:第一步,材料准备,准
备8周龄雌性BALB/c小鼠20只、动物房9和照明箱1,然后将小鼠每笼5只,造模过程中,将小鼠放置在动物房9内,过程中采用饲料投喂小鼠,
[0008]第二步,将20只BALB/c小鼠随机分为2组,每组10只,即模型组、对照组;
[0009]第三步,动物房9适应性喂养1周后,然后将照明箱1套在动物房9的外侧;
[0010]第四步,光老化小鼠动物模型建立和成模标准。
[0011]优选的,所述第一步中,动物房9内环境温度为25
±
2℃,相对湿度为50%~70%,每天予以12h光照。
[0012]优选的,所述饲料每100g产能营养供能比:碳水化合物60%、脂肪19%、蛋白质21%。
[0013]优选的,所述第三步中,使用电动剃毛器剃除小鼠背部约5
×
4cm2的毛发,再使用脱毛膏除去小鼠背部绒毛,以后隔天使用电动剃毛器剃除绒毛,每周使用脱毛膏保证小鼠背部无毛发遮挡,影响照射效果与最小红斑量的观察。
[0014]优选的,所述第三步中,调整照射箱的高度,使灯管距离小鼠背部脊柱最高点约30cm,照射前灯管预热15min,等待辐射计显示照射强度稳定后开始造模。连续照射4小时后,在结束照射后6小时皮肤出现恰可见的红斑,24小时后红斑消退,无脱屑现象,根据紫外线生物剂量分级可判断为2个MED,确定小鼠的最小红斑量为UVA0.05J/cm2、UVB2.16J/cm2;
[0015]MED指最小红斑量。
[0016]优选的,所述第四步中光老化小鼠动物模型建立,各组小鼠照射前后自由饮食水,采用每日不间断照射,第1周每次2h;第2周每次2.5h;第3周每次3h;第4周每次3.5h;第5~9周每次4h,共计照射9周,UVA照射强度为300μw/cm2,UVB辐射强度为60μw/cm2,根据公式:辐射剂量=辐射强度
×
辐射时间,故累计UVA辐射量为234.36J/cm2,UVB辐射量为54.68J/cm2。
[0017]优选的,所述第四步中,成模标准:在接受UV照射后9周,取小鼠背部皮肤组织行HE染色后,表皮变厚、真皮变薄;Masson染色后胶原纤维变薄、排列杂乱、断裂;Weigert染色后弹力纤维增多,变粗,扭曲;MDA表达量增多;SOD表达量减少;MMP

1表达量增多,提示造模成功。
[0018]与现有技术相比,本专利技术的有益效果是:
[0019]1、本专利技术通过安装有多组照明灯,照明灯固定在照明箱的内侧,多组照明灯中分为UVA灯和UVB灯,保证照明灯可以平稳运行,UVA灯和UVB灯配合发出复合光线,以一个最小红斑量为初始剂量,递增重复照射,观察照射对实验动物的影响,以不改变其活动状态为宜,可以降低饲养成本,节约实验时间。
[0020]2、本专利技术通过安装有动物箱和照明箱,照明箱罩在动物箱的外侧,通过底板对顶部的动物箱和照明箱进行支撑,底板对顶部的嵌合框进行固定,保证嵌合框对顶部的照明箱限位支撑,方便使用者对实验器材进行组装。
附图说明
[0021]图1为本专利技术的整体结构示意图;
[0022]图2为本专利技术的剖面组装结构示意图;
[0023]图3为本专利技术的动物箱结构示意图;
[0024]图4为本专利技术的支撑网结构示意图;
[0025]图5为本专利技术的模型构建方法流程示意图;
[0026]图6为本专利技术的BALB/c小鼠背部皮肤示意图;
[0027]图7为本专利技术的BALB/c小鼠背部皮肤HE染色示意图;
[0028]图8为本专利技术的BALB/c小鼠背部皮肤Masson染色示意图;
[0029]图9为本专利技术的BALB/c小鼠背部皮肤Weigert染色示意图;
[0030]图10为本专利技术的皮肤组织中MDA(nmol/mL)表达水平的检测结果示意图;
[0031]图11为本专利技术的皮肤组织中SOD(U/mL)表达水平的检测结果示意图;
[0032]图12为本专利技术的皮肤组织中GSH

Px(U/L)表达水平的检测结果示意图;
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种小鼠皮肤光老化模型构建装置,包括照明箱(1),其特征在于:所述照明箱(1)的顶壁安装有控制开关(4),所述照明箱(1)的两侧外壁贯穿安装有通风管(2),所述通风管(2)远离照明箱(1)的一端安装有过滤网(3),所述通风管(2)的内侧安装有换风扇(16),所述照明箱(1)的内侧顶壁安装有照明灯(15),所述照明箱(1)的底壁活动安装有底板(7),所述底板(7)的顶部安装有嵌合框(6),嵌合框(6)位于照明箱(1)的内侧,所述底板(7)的顶部安装有支撑杆(8),所述支撑杆(8)的顶部安装有动物箱(9),所述动物箱(9)的顶部通过连接座活动连接有轴承杆(10),轴承杆(10)的正面安装有顶框(11),所述动物箱(9)的两侧内壁开设有贯穿孔(12),所述动物箱(9)的两侧安装有支撑架(13),所述支撑架(13)的内侧活动安装有喂水器(14),喂水器(14)的底端贯穿贯穿孔(12)的内侧,所述照明箱(1)的一侧安装有温度湿度感应器(5),温度湿度感应器(5)位于通风管(2)的前方,所述动物箱(9)的底部通过螺纹安装有安装螺钉(19),所述动物箱(9)的底部通过安装螺钉(19)安装有安装框(18),所述安装框(18)的内侧安装有支撑网(20),所述动物箱(9)的内壁安装有食槽(17)。2.一种小鼠皮肤光老化模型构建方法,其特征在于:包括如下步骤:第一步,材料准备,准备8周龄雌性BALB/c小鼠20只、动物房(9)和照明箱(1),然后将小鼠每笼5只,造模过程中,将小鼠放置在动物房(9)内,过程中采用饲料投喂小鼠,第二步,将20只BALB/c小鼠随机分为2组,每组10只,即模型组、对照组;第三步,动物房(9)适应性喂养1周后,然后将照明箱(1)套在动物房(9)的外侧;第四步,光老化小鼠动物模型建立和成模标准。3.根据权利要求2所述的一种小鼠皮肤光老化模型构建方法,其特征在于:所述第一步中,动物房(9)内环境温度为(25
±
2)℃,相对湿度为50%~70%,每天予以12h光照。4....

【专利技术属性】
技术研发人员:刘阳刘雁军杨华武
申请(专利权)人:成都市第三人民医院
类型:发明
国别省市:

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