一种用于组织修复的改性SIS膜、其制备方法及应用技术

本公开涉及一种用于组织修复的改性SIS膜、其制备方法及应用。具体来说，本公开涉及一种组合物，所述组合物含有融合多肽修饰的SIS膜和细胞外囊泡，以及所述组合物的制备方法和应用。本公开证实了融合多肽介导的SIS膜以及含有前述SIS膜和细胞外囊泡的组合物具有优异的生物功能，为治疗骨缺损或促进组织愈合或骨再生提供了广阔的前景。再生提供了广阔的前景。再生提供了广阔的前景。

【技术实现步骤摘要】
一种用于组织修复的改性SIS膜、其制备方法及应用


[0001]本公开属于生物医用材料领域，具体涉及一种用于组织修复的改性SIS膜、其制备方法及应用。

技术介绍

[0002]疾病或外伤引起的组织损伤会导致患者疼痛、功能缺陷以及审美和心理问题。适当的治疗通过提供有利于伤口愈合的环境来促进细胞增殖和迁移，从而诱导组织再生。聚丙烯(PP)、聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)、聚偏二氟乙烯(PVDF)等传统补片材料由于不可降解且不能提供适合组织修复的微环境，容易引起慢性疼痛、严重感染等并发症。据我们所知，伤口周围的局部微环境有助于组织再生的过程，该局部微环境包括细胞间通讯、细胞与细胞外基质的相互作用、信号分子、氧气和营养。因此，迫切需要一种新型仿生补片，它不仅可以降解，而且可以为组织再生建立适当的局部微环境。
[0003]小肠粘膜下层(SIS)膜因其来源广泛和极好的可降解性，是治疗心血管疾病、疝气修复、颈椎手术、气管鼓膜修复(tracheal tympanic membrane repair)等软组织损伤中应用最广泛的细胞外基质(ECM)材料之一。胶原蛋白的天然成分和丰富的生物活性因子，包括转化生长因子
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β(TGF
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β)、糖蛋白和纤连蛋白，为细胞粘附和扩散提供了具有三维空间结构的SIS膜，并且具有优异的生物相容性。
[0004]事实上，膜植入主要是依靠内源性组织再生的模式来完成连续动态的重塑，这需要多种化学物质和细胞因子。因此，微环境中生物活性成分的存在对于这个复杂的过程至关重要。考虑到生物补片是外源性生物材料，SIS材料诱导的修复过程极其依赖于细胞状态(如干细胞的募集和分化)和材料本身的潜在免疫原性，所以SIS膜在微环境模拟和组织诱导方面还存在不足。因此，在SIS材料上装载更多的生物活性物质有利于伤口的再生治疗。
[0005]间充质干细胞(MSCs)作为有效应用于组织工程的种子细胞，可以通过调节细胞因子和生长因子的表达来增加细胞间通讯。然而，动脉内注射MSCs已被证明会导致狗的心肌微梗塞(myocardial microinfarction)，这表面存在免疫排斥和栓塞的风险。
[0006]源自脐带间充质干细胞(ucMSCs)的细胞外囊泡可以调节伤口愈合过程中的细胞免疫反应、血运重建和组织重建。此外，ucMSC
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EVs的细胞外囊泡miR
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1263直接靶向受体细胞中的Mob1以抑制细胞凋亡并实现细胞快速增殖，最终获得更好的组织诱导特性。然而，传统的细胞外囊泡加载方法，如直接吸收和化学包被，存在加载效率低、体内突然释放和细胞外囊泡结构破坏等缺点，可能会影响治疗效果，限制其广泛应用。
[0007]日常生活中经常发生的组织损伤，在临床医学中仍然具有挑战性。开发一种能够在伤口周围提供理想微环境和体内平衡的新型生物材料，对于实际的组织再生医学来说是非常理想的。

技术实现思路

[0008]专利技术要解决的问题
[0009]基于现有技术存在的缺陷，本公开提供了一种嵌合肽修饰的SIS膜、以及含有前述嵌合肽修饰的SIS膜和细胞外囊泡的组合物具有促进软组织愈合和骨再生的功能。本公开证明了嵌合肽修饰的SIS膜、以及含有前述嵌合肽修饰的SIS膜和细胞外囊泡的组合物可以用于骨缺损的临床治疗。
[0010]用于解决问题的方案
[0011]本公开涉及的技术方案如下。
[0012](1)一种组合物，其中，所述组合物含有融合多肽修饰的SIS膜和细胞外囊泡，所述融合多肽的序列包含由如下序列所示的序列组成的组中的至少一种：
[0013](i)如SEQ ID NO：5所示的序列、如SEQ ID NO：6所示的序列、如SEQ ID NO：7所示的序列、如SEQ ID NO：8所示的序列组成的组；
[0014](ii)和(i)所示的序列相比，存在一个、两个、三个、四个或五个保守置换的序列。
[0015](2)根据(1)所述的组合物，其中，所述融合多肽的序列由如下序列组成的组中的至少一种组成：
[0016](i)如SEQ ID NO：5所示的序列、如SEQ ID NO：6所示的序列、如SEQ ID NO：7所示的序列、如SEQ ID NO：8所示的序列组成的组；
[0017](ii)和(i)所示的序列相比，存在一个、两个、三个、四个或五个保守置换的序列；
[0018]在一个具体的实施方式中，所述融合多肽的序列为和如SEQ ID NO：5所示的序列、如SEQ ID NO：6所示的序列、如SEQ ID NO：7所示的序列、如SEQ ID NO：8所示的序列相比，存在一个或两个保守置换的序列，并且含有所述融合多肽修饰的SIS膜的组合物仍然具有如下(a)
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(c)至少一种用途：
[0019](a)作为或制备成骨的生物材料；(b)作为或制备促进组织愈合的生物材料；(c)作为或制备治疗骨缺损的生物材料。
[0020](3)根据(1)
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(2)任一项所述的组合物，其中，所述含有融合多肽修饰的SIS膜上的融合多肽的序列为SEQ ID NO：5所示的序列和如SEQ ID NO：6所示的序列。
[0021]在一个具体的实施方式中，所述融合多肽的序列为和如SEQ ID NO：5所示的序列、如SEQ ID NO：6所示的序列相比，存在一个或两个保守置换的序列，并且含有所述融合多肽修饰的SIS膜的组合物仍然具有如下(a)
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(c)至少一种用途：
[0022](a)作为或制备成骨的生物材料；(b)作为或制备促进组织愈合的生物材料；(c)作为或制备治疗骨缺损的生物材料。
[0023](4)根据(1)
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(3)任一项所述的组合物，其中，所述细胞外囊泡源自间充质干细胞；优选的，所述细胞外囊泡为源自脐带间充质干细胞的细胞外囊泡。
[0024](5)根据(1)
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(4)任一项所述的组合物，其中，所述组合物通过所述融合多肽修饰的SIS膜和所述细胞外囊泡孵育得到。
[0025](6)一种根据(1)
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(5)任一项所述的组合物的制备方法，其中，所述修饰的方法包括以下步骤(a)
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(d)或者(i)
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(iv)：
[0026](a)将所述融合多肽溶解至溶剂中，得到含有融合多肽的溶解液；
[0027](b)将步骤(a)得到的溶解液和细胞外囊泡混合孵育，得到孵育溶液；
[0028](c)将步骤(b)得到的孵育溶液施加至所述SIS膜的表面；优选的，将所述SIS膜浸入步骤(b)得到的孵育溶液中；
[0029](d)干燥表面带有所述孵育溶液的所述SIS膜以得到所述组合物；或者
[0030](i)将所述融合多肽溶解至溶剂中，得到含有融合多肽的溶解液；
[0031](ii)将步骤(i)得到的溶解液施加至所述SIS膜的表本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种组合物，其中，所述组合物含有融合多肽修饰的SIS膜和细胞外囊泡，所述融合多肽的序列包含由如下序列所示的序列组成的组中的至少一种：(i)如SEQ ID NO：5所示的序列、如SEQ ID NO：6所示的序列、如SEQ ID NO：7所示的序列、如SEQ ID NO：8所示的序列组成的组；(ii)和(i)所示的序列相比，存在一个、两个、三个、四个或五个保守置换的序列。2.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述融合多肽的序列由如下序列组成的组中的至少一种组成：(i)如SEQ ID NO：5所示的序列、如SEQ ID NO：6所示的序列、如SEQ ID NO：7所示的序列、如SEQ ID NO：8所示的序列组成的组；(ii)和(i)所示的序列相比，存在一个、两个、三个、四个或五个保守置换的序列。3.根据权利要求1
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2任一项所述的组合物，其中，所述含有融合多肽修饰的SIS膜上的融合多肽的序列为SEQ ID NO：5所示的序列和如SEQ ID NO：6所示的序列。4.根据权利要求1
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3任一项所述的组合物，其中，所述细胞外囊泡源自间充质干细胞；优选的，所述细胞外囊泡为源自脐带间充质干细胞的细胞外囊泡。5.根据权利要求1
‑
4任一项所述的组合物，其中，所述组合物通过所述融合多肽修饰的SIS膜和所述细胞外囊泡孵育得到。6.一种根据权利要求1
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5任一项所述的组合物的制备方法，其中，所述修饰的方法包括以下步骤(a)
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(d)...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵博，魏鹏飞，景伟，刘子豪，
申请(专利权)人：北京博辉瑞进生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：