一种基于RT-RAA和CRISPR/Cas12a的人鼻病毒A型和C型检测体系制造技术

本发明专利技术公开了一种基于RT

【技术实现步骤摘要】
一种基于RT
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RAA和CRISPR/Cas12a的人鼻病毒A型和C型检测体系


[0001]本专利技术涉及一种检测体系、方法以及用途，特别涉及一种基于RT
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RAA和CRISPR/Cas12a的人鼻病毒A型和C型检测体系、方法以及用途。

技术介绍

[0002]人鼻病毒(human rhinovirus，HRV)血清型已经超过120多种。人鼻病毒是一种无包膜、单股正链RNA病毒，基因组大约7200bp，属于小核糖核酸病毒科肠病毒属。人鼻病毒A型和C型被认为是儿童呼吸道病毒感染的主要致病病毒，可导致三分之二的普通感冒以及与哮喘恶化和呼吸困难等慢性肺病的病因。该病毒主要感染对象是婴幼儿和学前儿童，以及免疫力低下的人群。该病毒主要流行季节是春季和秋季，主要临床症状为鼻塞、打喷嚏、头痛、轻度喉咙痛、发烧以及下呼吸道疾病。该病毒变异快、环境抵抗力强、感染剂量低，感染后潜伏期短、排毒时间长、免疫保护时间短，且传播途径多样。因此，人鼻病毒具有高度传染性和快速传播能力。其中，鼻病毒A型和C型为最常见的致人感冒及其他下呼吸道相关本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种基于RT
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RAA和CRISPR/Cas12a的人鼻病毒A型和C型检测体系，其特征在于：其包括RT
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RAA体系和CRISPR/Cas12a检测体系；所述RT
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RAA体系包括基于人鼻病毒A型和C型共同保守序列设计的RT
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RAA引物对，所述RT
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RAA引物对包括正向引物和反向引物，所述正向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；所述CRISPR/Cas12a检测体系包括基于人鼻病毒A型和C型共同保守序列设计的crRNA，所述crRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。2.根据权利要求1所述的基于RT
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RAA和CRISPR/Cas12a的人鼻病毒A型和C型检测体系，其特征在于：所述RT
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RAA体系还包括无核酸酶水、缓冲液和镁离子。3.根据权利要求2所述的基于RT
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RAA和CRISPR/Cas12a的人鼻病毒A型和C型检测体系，其特征在于：所述RT
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RAA体系还包括：正向引物，浓度10μM，体积2μL；反向引物，浓度10μM，体积2μL；2
×
缓冲液，体积25μL；镁离子，浓度280
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300mM，体积2
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3μL；无核酸酶水，体积13.5
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14.5μL。4.根据权利要求1～3任一项所述的基于RT
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RAA和CRISPR/Cas12a的人鼻病毒A型和C型检测体系，其特征在于：该人鼻病毒A型和C型检测体系还包括crRNA制备所需的DNA单链序列组，所述crRNA制备所需的DNA单链序列组包括crRNA1制备所需的DNA单链序列组或crRNA2制备所需的DNA单链序列组；所述crRNA1制备所需的DNA单链序列组包括crRNA1
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F和crRNA1
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R，crRNA1
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F的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，crRNA1
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R核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示；所述crRNA2制备所需的DNA单链序列组包括crRNA2
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F和crRNA2
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R，所述crRNA2
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F核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示，所述crRNA2
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R核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示；所述CRISPR/Cas12a检测体系还包括Cas12a蛋白、ssDNA报告分子、缓冲液和无核酸酶水；ssDNA报告分子分别为ssDNAFAM reporter为5
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，F为荧光素，Q为荧光淬灭剂和ssDNA LFA report...

【专利技术属性】
技术研发人员：李永东，张丹丹，徐荣，焦素黎，倪红霞，
申请(专利权)人：宁波市疾病预防控制中心，
类型：发明
国别省市：