一种黄精总黄酮提取物及其提取方法和应用技术

本发明专利技术属于黄精成分提取技术领域，公开了一种黄精总黄酮提取物及其提取方法和应用，所述提取方法为:将生黄精清洗后浸于酒水混合物A中至完全泡发后，采用酒水混合物B蒸制7～9h，闷润8～12h，再蒸制7～9h，获得酒黄精；将酒黄精干燥后粉碎，随后均匀分散于醇溶液中，调节pH为4.7～4.9，加入纤维素酶，38～42℃下活化后于48～52℃下超声提取，灭活、过滤，滤液中即含有酒黄精总黄酮。本发明专利技术的提取方法简单易操作，且提取效果稳定，可重复性高，提取方法可靠，且提取的黄精总黄酮提取物能够缓解顺铂致小鼠急性肾损伤，为协同顺铂增效减毒治疗非小细胞肺癌提供新的思路，能够用于制备缓解顺铂诱导的急性肾损伤的药物。诱导的急性肾损伤的药物。诱导的急性肾损伤的药物。

【技术实现步骤摘要】
一种黄精总黄酮提取物及其提取方法和应用


[0001]本专利技术涉及黄精成分提取
，尤其涉及一种黄精总黄酮提取物及其提取方法和应用。

技术介绍

[0002]现代药理学研究表明黄精中由于黄酮、黄精多糖和皂苷等多种营养成分的存在，使黄精具备调节血脂血糖、增强免疫、抗氧化、抗衰老等多种药理活性，其中，黄酮具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种积极作用，具有非常广泛的应用前景，所以提供一种有效的黄精总黄酮的提取方法是非常有必要的。
[0003]目前现有技术中，黄精总黄酮的提取方法主要有浸提法、超声波辅助提取、微波辅助提取等，然而由于生黄精中总黄酮含量低，且上述方法需要进行高压或高温处理会造成黄精有效成分的损失，导致上述方法提取获得黄精总黄酮含量低，不利于黄精总黄酮的进一步应用和研究。
[0004]为此，本专利技术提供一种黄精总黄酮提取物及其提取方法和应用。

技术实现思路

[0005]为了解决上述现有技术中的不足，本专利技术提供一种黄精总黄酮提取物及其提取方法和应用。
[0006]本专利技术的一种黄精总黄酮提取物及其提取方法和应用是通过以下技术方案实现的:
[0007]本专利技术的第一个目的是提供一种黄精总黄酮提取物的提取方法，包括以下步骤:
[0008]本专利技术的第一个目的是提供一种黄精总黄酮提取物的提取方法，包括以下步骤:
[0009]步骤1，将生黄精清洗后浸于酒水混合物A中至完全泡发，过滤，获得泡发后的生黄精；用酒水混合物B将泡发后的生黄精蒸制7～9h，然后闷润8～12h，再次蒸制7～9h，获得酒黄精；
[0010]步骤2，将酒黄精干燥后进行粉碎处理，获得酒黄精粉末；
[0011]步骤3，将酒黄精粉末均匀分散于醇溶液中，并采用缓冲溶液调节pH为4.7～4.9后，加入纤维素酶，冰浴38～42℃下进行活化处理后于48～52℃下进行超声提取，随后灭活、过滤，滤液中即含有酒黄精总黄酮。
[0012]进一步地，所述酒水混合物A和所述酒水混合物B均为酒与水的混合物，且酒与水的质量比为1:9～11。
[0013]进一步地，所述酒水混合物A和酒水混合物B中，酒为黄酒，且黄酒的酒精度为11％。
[0014]进一步地，所述生黄精与所述酒水混合物A的料液比为1g:1～3mL。
[0015]进一步地，采用柠檬酸
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柠檬酸钠缓冲溶液作为缓冲溶液，且所述柠檬酸
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柠檬酸钠缓冲溶液的浓度为0.08～0.12mol/L。
[0016]进一步地，所述酒黄精粉末与所述醇溶液的料液比为1g:5～30mL。
[0017]进一步地，所述纤维素酶的用量为酒黄精的1.5％～3.5％。
[0018]进一步地，所述活化处理的时间为20～40min。
[0019]进一步地，所述灭活处理的时间为5～20min。
[0020]进一步地，所述超声提取的超声功率为450～500W，超声频率为30～50KHz，超声时间为5～45min。
[0021]本专利技术的第二个目的是提供一种上述提取方法获得的黄精总黄酮提取物。
[0022]本专利技术的第三个目的是提供一种上述黄精总黄酮提取物在用于制备顺铂诱导的急性肾损伤药物中的应用。
[0023]本专利技术与现有技术相比，具有以下有益效果：
[0024]中医认为，黄酒气味苦、甘、辛、大热，主行药势，有百邪恶毒、通经络、行血脉、脾胃、养皮肤、散湿气、扶肝、除风下气、活血、利小便等功效。本专利技术以酒作为有机溶媒，通过用酒水混合物对生黄精进行处理，并且在处理过程中，采用常压蒸制获得酒黄精，不仅有助于黄精中黄酮类、脂类、挥发油、生物碱及其盐类等黄酮类的溶出，同时还能够减轻黄精的刺激性，增强黄精补脾润肺的效果，以实现减毒增效，从而使得黄精经酒制后黄酮含量较生品和饮片，总黄酮含量提高；同时本专利技术在酒制黄精的过程中，采用常压蒸制的方式，能够避免负压液浓度和负压时间可能会对酒黄精饮片外观性状的影响，也避免了高压蒸制对设备的高要求极可能对有效物质的损失，以提高黄精中总黄酮的提取效果。然后，再将酒黄精粉碎后置于醇溶液中，通过超声协同醇溶液对酒黄精中的总黄酮进行提取，能够显著提高黄精中总黄酮的提取率，并且，本专利技术在超声协同醇溶液对酒黄精中的总黄酮进行提取的过程中，还加入了纤维素酶，可以增加植物细胞破壁率，提高黄酮得率，进而使得总黄酮得率可达1.19mg
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g
‑1。
[0025]本专利技术的提取方法简单易操作，且提取效果稳定，可重复性高，提取方法可靠，有利于用于研究黄精总黄酮的药理活性。
[0026]本专利技术提取方法提取获得的黄精总黄酮可清除DPPH，羟自由基和ABTS，具备显著的抗氧化能力，尤其是其对羟自由基的IC50几乎是维生素C的5倍、BHT(2,6
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二叔丁基
‑4‑
甲基苯酚)的11倍，故本专利技术提取方法提取获得的黄精总黄酮是一种潜在的天然自由基强清除剂，且其体外可剂量依赖性抗A549细胞增殖，能够缓解顺铂致小鼠急性肾损伤，为协同顺铂增效减毒治疗非小细胞肺癌提供新的思路。
附图说明
[0027]图1为实施例1
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实施例5的总黄酮提取率；
[0028]图2为实施例1、以及实施例6
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实施例13的总黄酮提取率；
[0029]图3为实施例1、以及实施例14
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实施例17的总黄酮提取率；
[0030]图4为实施例1、以及实施例19
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实施例26的总黄酮提取率；
[0031]图5为本专利技术提取的酒黄精总黄酮清除DPPH自由基的能力；
[0032]图6为本专利技术提取的酒黄精总黄酮清除羟自由基的能力；
[0033]图7为本专利技术提取的酒黄精总黄酮清除ABTS自由基的能力；
[0034]图8为不同剂量的本专利技术提取的酒黄精总黄酮对A549细胞增殖活力的影响；
[0035]图9为小鼠尿液照片；
[0036]图10为小鼠肾脏照片；
[0037]图11为本专利技术提取的酒黄精总黄酮对顺铂诱导急性肾损伤的影响；
[0038]图12为各组实验后的小鼠血清中的MDA含量，其中，组别1为空白组；组别2为急性肾损伤模型组；组别3为酒黄精黄酮提取物低剂量组；组别4为酒黄精黄酮提取物中剂量组；组别5为酒黄精黄酮提取物高剂量组；##表示P<0.01,与空白组比较；**表示P<0.01，*表示P<0.05，与急性肾损伤模型组比较；
[0039]图13为各组实验后的小鼠肾组织中的MDA含量，其中，组别1为空白组；组别2为急性肾损伤模型组；组别3为酒黄精黄酮提取物低剂量组；组别4为酒黄精黄酮提取物中剂量组；组别5为酒黄精黄酮提取物高剂量组；##表示P<0.01，与空白组比较；**表示P<0.01，*表示P<0.05，与急性肾损伤模型本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种黄精总黄酮提取物的提取方法，其特征在于，包括以下步骤:步骤1，将生黄精清洗后浸于酒水混合物A中至完全泡发，过滤，获得泡发后的生黄精；用酒水混合物B将泡发后的生黄精蒸制7～9h，然后闷润8～12h，再次蒸制7～9h，获得酒黄精；步骤2，将酒黄精干燥后进行粉碎处理，获得酒黄精粉末；步骤3，将酒黄精粉末均匀分散于醇溶液中，并采用缓冲溶液调节pH为4.7～4.9后，加入纤维素酶，冰浴38～42℃下进行活化处理后于48～52℃下进行超声提取，随后灭活、过滤，滤液中即含有酒黄精总黄酮。2.如权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述酒水混合物A和所述酒水混合物B均为酒与水的混合物，且酒与水的质量比为1:9～11。3.如权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述生黄精与所述酒水混合物A的料液比为1g:1～3mL。4.如权利要求1所述的提取方法，其特征在于，采用柠檬酸
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柠檬酸钠缓...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱星枚，乔炜，郭凯丽，王斌，刘继平，薛妙，许俊卿，史永恒，杨嘉妮，
申请(专利权)人：陕西中医药大学，
类型：发明
国别省市：