lncRNADDIT4-AS1的应用及乳腺癌诊断和治疗制剂制造技术

本发明专利技术公开了lncRNA DDIT4

【技术实现步骤摘要】
No.4
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11所示。
[0014]本专利技术的第四个目的是提供一种乳腺癌预防和/或治疗制剂，包括lncRNA DDIT4
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AS1抑制剂；所述的lncRNA DDIT4
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AS1序列如SEQ ID NO.1所示。
[0015]进一步地，所述的lncRNA DDIT4
‑
AS1抑制剂，包括基于DDIT4
‑
AS1基因设计的shRNA、siRNA中的一种或多种。shRNA、siRNA的靶向序列如表1所示；也如SEQ ID No.4
‑
11所示。
[0016]本专利技术的第五个目的是提供抑制lncRNA DDIT4
‑
AS1表达的试剂在制备增强乳腺癌化疗药物敏感性制剂中的应用；所述的lncRNA DDIT4
‑
AS1序列如SEQ ID NO.1所示。
[0017]进一步地，所述的乳腺癌化疗药物包括紫杉醇、顺铂、环磷酰胺、5
‑
氟尿嘧啶、多柔比星、丝裂霉素中的一种或多种。
[0018]本专利技术的第六个目的是提供一种增强乳腺癌化疗药物敏感性制剂，包括lncRNA DDIT4
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AS1抑制剂；所述的lncRNA DDIT4
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AS1序列如SEQ ID NO.1所示；进一步所述的lncRNA DDIT4
‑
AS1抑制剂，包括基于DDIT4
‑
AS1基因设计的shRNA、siRNA中的一种或多种。shRNA、siRNA的靶向序列如表1所示；也如SEQ ID No.4
‑
11所示。
[0019]本专利技术的乳腺癌预防和/或治疗制剂、增强乳腺癌化疗药物敏感性制剂剂型选自片剂、胶囊剂、注射剂、喷雾剂、气雾剂、粉雾剂、凝胶剂、栓剂中的一种或多种。
[0020]上述制剂添加的药学上可接受的载体选自填充剂、崩解剂、润滑剂、粘合剂、着色剂、防腐剂、矫味剂、抗氧化剂、溶剂中的一种或多种。
[0021]lncRNA DDIT4
‑
AS1的cDNA序列信息：
[0022]TTGAACATCAAGTGTATTCATGAACAGTGAGTATCTTATCTTCATGTAAACAGTTCTAGATGGAAGACCCAGATGGCACTCCTCCCGGGGAGGGGTTCCAGCCCCCACCCTCTCAGCCCCTCCCCTGCCAGCTCAACTCTGCAGTACACGATGGGGGAAGGCTTAAACGCAGCTGCCAGGTGTAATTTTTCAAGTGTCAAAGATCCCAAGTGATCCCTGACACCCACCCCTTCCTACTCTTACATTCATGCGTCTGTAAGATAGCTGCCTACAACAGGTCATAACAAAAATAATAAGGTACATGCTACACACACATCCAGCTGGAAGCCTTGTTGGCCCCTAAGCCTTTGTTTCATGCTACAGTACTGAGGGGTATGTGTCCCCAATGCACAGCCACCCGCACACAACTCAATGAGCTTCCTGGGAAACACTATTCCCCCACCTCCACCTTAGGTGGCTGCCTCAGTTTTCCAACCACAGGAATCAGTCCCTCAGCTCCTGCCTCTAGTCTCCACCCCAAAAGTTCAGTCGTCTCTGTCTTGGAGGGCACTGTCGGCCCCCTCAGGTTGAAGTTCAACACTCCTCAATGAGCAGCTGTTCCGAGCTGTACAGCTTCTTCTTGATGACTCGGAAGCCAGTGCTCAGCGTCAGGGACTGGCTGAAGCCAGGGAGGAAGGGAGAGTTGGCGGAGCTAAACAGCCCCTGGATCTTGGGCCAGAGTCGTGAGTCCAGGCGCAGCACGAGGGTCAGCTGGAAGGTGGGCACCAGGCTGGGGTCGAGTGCCAGCTGGCCCACGCTGTGGCAGCTCTTGCCCTGCTCCACGCAGACGTCCAGCAGCGCCCCCCGC
[0023]表1shRNA、siRNA的靶向序列
[0024][0025][0026]本专利技术有益效果：
[0027]本专利技术发现lncRNA DDIT4
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AS1在乳腺癌癌组织及乳腺癌癌细胞中高表达，在乳腺癌旁组织及正常乳腺上皮细胞中表达较低(图1)，可作为乳腺癌诊断依据。干扰lncRNA DDIT4
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AS1的表达，可以抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移等(图2
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3)；干扰lncRNA DDIT4
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AS1的表达可以增强乳腺癌细胞对化疗药物紫杉醇、顺铂、多柔比星的敏感性，且具有剂量依赖性(图4)。同时单独沉默lncRNA DDIT4
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AS1可以抑制裸鼠皮下移植瘤的生长，沉默DDIT4
‑
AS1进一步增强了紫杉醇的体内抗肿瘤作用(图5)。因此，抑制DDIT4
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AS1表达的物质或干扰DDIT4
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AS1的表达载体可在制备抑制乳腺癌增殖、侵袭和/或转移、或者增强化疗敏感性的药物中应用。
附图说明：
[0028]图1为lncRNA DDIT4
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AS1在乳腺癌及癌旁组织、乳腺癌细胞及正常乳腺上皮细胞MCF10A中的表达水平示意图。
[0029]图2为沉默lncRNA DDIT4
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AS对乳腺癌细胞增殖影响示意图。
[0030]图3为沉默lncRNA DDIT4
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AS对乳腺癌细胞迁移影响示意图。
[0031]图4为沉默lncRNA DDIT4
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AS影响乳腺癌细胞对化疗药物的敏感性示意图。
[0032]图5是本专利技术裸鼠成瘤实验结果图。
具体实施方式：
[0033]实施例1LncRNA DDIT4
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AS1在乳腺癌组织及乳腺癌细胞中的表达水平研究
[0034]本专利技术的BT549、MCF
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7、MDA
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MB
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453、4T1细胞系购自中国科学院上海细胞库，MDA
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MB
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231、MCF10A、T47D、SKBR3细胞系来源于中国科学院昆明动物研究所。
[0035]收集乳腺癌患者手术切除的乳腺癌组织及癌旁组织(湘雅二医院乳腺外科诊断为乳腺癌，进行乳腺切除手术时，临床医生取患者的癌组织及相应的癌旁组织，共69例)，并与
患者签署知情同意书；组织样本离体后迅速冻存于液氮中。将乳腺癌细胞及乳腺上皮细胞MCF10A接种于六孔板内，待细胞汇合度达90％
‑
100％，收集样本。TRIzol法提取组织或细胞总RNA，逆转录，通过qPCR法检测lnc本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.检测lncRNA DDIT4
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AS1表达量的试剂在制备乳腺癌诊断制剂中的应用；所述的lncRNA DDIT4
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AS1序列如SEQ ID NO.1所示。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的检测lncRNA DDIT4
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AS1表达量的试剂包括PCR检测试剂或者原位杂交检测试剂。3.一种乳腺癌诊断试剂盒，其特征在于，包括检测lncRNA DDIT4
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AS1表达量的试剂，优选PCR检测试剂或者原位杂交检测试剂，所述的lncRNA DDIT4
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AS1序列如SEQ ID NO.1所示。4.抑制lncRNA DDIT4
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AS1表达的试剂在制备乳腺癌预防和/或治疗制剂中的应用；所述的lncRNA DDIT4
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AS1序列如SEQ ID NO.1所示。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述的抑制lncRNA DDIT4
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AS1表达的试剂包括基于DDIT4
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AS1基因设计的shRNA、siRNA中的一种或多种；优选shRNA、siRNA的靶向序列如SEQ ID No.4
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11所示。6.一种乳腺癌预防和/或治疗制剂，其特征在于，包括lncRNA DDIT4
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AS1抑制剂；所述的lncRNA DDIT4
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AS1序列如SEQ ID NO.1所示。7.根据权利要求6所述的乳腺癌预防和/或治疗制剂，其特征在于，所述的l...

【专利技术属性】
技术研发人员：程岩，蒋婷，姜世龙，龚蓉，钟常歆，程月影，
申请(专利权)人：中南大学湘雅二医院，
类型：发明
国别省市：