用于治疗骨髓纤维化的抗血幼素（HJV）抗体制造技术

本申请的多个方面提供了抗血幼素抗体和使用其治疗骨髓纤维化和/或与骨髓纤维化相关的病症的方法。的病症的方法。的病症的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于治疗骨髓纤维化的抗血幼素(HJV)抗体
[0001]相关申请
[0002]本申请在35 U.S.C.
§
119(e)下要求以下的权益：2020年5月13日提交的美国临时申请序列号63/024,416，题为“ANTI
‑
HEMOJUVELIN(HJV)ANTIBODIES FOR TREATING MYELOFIBROSIS”，2020年6月5日提交的63/035,649，题为“ANTI
‑
HEMOJUVELIN(HJV)ANTIBODIES FOR TREATING MYELOFIBROSIS”，2020年7月2日提交的63/047,828，题为“ANTI
‑
HEMOJUVELIN(HJV)ANTIBODIES FOR TREATING MYELOFIBROSIS”和2021年3月22日提交的63/164,294，题为“ANTI
‑
HEMOJUVELIN(HJV)ANTIBODIES FOR TREATING MYELOFIBROSIS”，其每一篇的全部内容均通过引用并入本文。

技术介绍

[0003]铁是氧转运储存分子(例如血红蛋白和肌红蛋白)的关键组分之一。铁缺乏导致贫血，而铁过载导致组织损伤和纤维化。铁调素是全身铁稳态的一种关键肽激素调节物。它通过与细胞铁输出蛋白膜铁转运蛋白(ferroportin)(存在于肝细胞、十二指肠中的肠上皮细胞、巨噬细胞和脂肪细胞上的跨膜蛋白)结合而发挥其调节功能。铁调素的结合促进膜铁转运蛋白降解，阻止铁从细胞中输出以及铁释放到血浆中。

技术实现思路

[0004]本公开内容的多个方面提供了用于治疗高铁调素病症的方法，高铁调素病症例如骨髓纤维化、骨髓瘤、瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症(Waldenstrom macroglobulinemia)、慢性肾病、慢性病性贫血或导致功能性铁缺乏的铁限制性贫血。在某些实施方案中，提供了用于治疗骨髓纤维化的方法，骨髓纤维化通常表征为与慢性炎症和进展性骨髓纤维化相关的骨髓增生性疾病。贫血是骨髓纤维化的主要临床问题之一，并与不良结局相关。这样的贫血通常由骨髓衰竭、脾肿大和/或功能性铁缺乏引起或与之相关，这可能导致炎症。此外，在骨髓纤维化中，诱导铁调素合成的促炎性细胞因子(例如IL
‑
6和抑瘤素
‑
M)通常会提高，并与铁螯合(iron sequestration)、巨噬细胞铁负荷以及髓系增生和巨噬细胞活化相关(参见，例如图11)。由此产生的铁调素水平提高与贫血和阴性结局相关。
[0005]本公开内容的一些方面涉及通过向患有骨髓纤维化的对象皮下施用与血幼素(HJV)结合的分离的抗体连同有益地低的最大血清浓度(C
最大
)来实现有效的生物可利用度。在一些实施方案中，皮下施用抗HJV抗体与静脉内施用相同的抗体相比，在更低的抗HJV抗体最大浓度(C
最大
)下产生了相当的药效学作用(例如，循环铁调素
‑
25水平降低，TSAT％提高，和/或血清铁水平提高)。C
最大
是在施用药剂/抗体之后至施用第二剂量之前药物(例如，抗HJV抗体)的最大(或峰值)血清浓度。在一些实施方案中，在施用抗HJV抗体之后的短时间内(例如，12小时内、24小时内等)实现低C
最大
使血清铁响应的不期望的提高最小化，和/或使抗体的脱靶效应(例如，与RGMa结合)的机会最小化。在一些实施方案中，通过皮下施用抗HJV抗体来减弱(blunt)C
最大
避免了血清铁响应的不期望的急剧提高。在一些实施方案中，通过皮下施用抗HJV抗体来减弱C
最大
降低了抗体的脱靶效应。
[0006]本公开内容的一些方面还涉及与人血幼素(HJV)结合的分离的抗体，其用于治疗患有骨髓纤维化的对象的方法中，其中通过皮下施用向所述对象施用所述分离的抗体，并且其中所述抗体包含含有SEQ ID NO:38的氨基酸序列的重链可变区(VH)，并且包含含有SEQ ID NO:39的氨基酸序列的轻链可变区(VL)。
[0007]本公开内容的一些方面还涉及与人血幼素(HJV)结合的分离的抗体，其用于在患有骨髓纤维化的对象中抑制HJV活性的方法中，其中通过皮下施用向所述对象施用所述分离的抗体，并且其中所述抗体包含含有SEQ ID NO:38的氨基酸序列的重链可变区(VH)，并且包含含有SEQ ID NO:39的氨基酸序列的轻链可变区(VL)。
[0008]在一些实施方案中，施用(例如，静脉内注射或皮下注射)抗HJV抗体降低了循环铁调素
‑
25(例如，血清铁调素
‑
25或血浆铁调素
‑
25)，其为铁调素的活性形式。
[0009]在一些方面中，本公开内容提供了用于在患有骨髓纤维化的对象中降低铁调素
‑
25的方法，所述方法包括：向对象施用有效量的与人血幼素(HJV)结合的分离的抗体，其中所述抗体包含：含有SEQ ID NO:38的氨基酸序列的重链可变区(VH)，和含有SEQ ID NO:39的氨基酸序列的轻链可变区(VL)。在一些方面中，本公开内容提供了与血幼素(HJV)结合的分离的抗体，其用于在患有骨髓纤维化的对象中降低铁调素
‑
25的方法中，其中所述抗体包含：含有SEQ ID NO:38的氨基酸序列的重链可变区(VH)，和含有SEQ ID NO:39的氨基酸序列的轻链可变区(VL)。在一些实施方案中，对象通过皮下注射进行施用。在一些实施方案中，所述施用在施用之后4小时、6小时、8小时、12小时、28小时、24小时、2天、3天、4天、5天、6天、1周或2周降低铁调素
‑
25。在一些实施方案中，与施用之前所述对象中的铁调素水平相比，所述施用将铁调素
‑
25降低了至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％或至少95％的铁调素。
[0010]本公开内容的某些方面涉及这样的观察结果：血幼素(HJV)是铁调素合成的调节物并且血幼素功能的丧失可能与铁过载相关。例如，在一些实施方案中，纯合HJV敲低动物不能响应于IL
‑
6而放大铁调素合成，并且不能对急性炎症产生有效的低铁血应答。因此，在一些实施方案中，本文中提供的方法涉及向有此需要的对象以有效治疗高铁调素病症的量施用铁调素拮抗剂，其可以是血幼素拮抗剂。在一些实施方案中，血幼素拮抗剂是抗血幼素抗体。在一些实施方案中，抗血幼素抗体结合RGMc作为其主要作用模式(与RGMa和RGMb相比)。因此，在一些实施方案中，抗血幼素抗体相对于RGMa和/或RGMb优先结合RGMc。在一些实施方案中，抗血幼素抗体以小于一百纳摩尔(nM)的平衡解离常数(K
D
)(K
D
<100nM)结合RGMc。然而，在一些实施方案中，抗血幼素抗体以与RGMa本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.治疗患有骨髓纤维化的对象的方法，所述方法包括：向所述对象施用有效量的与人血幼素(HJV)结合的分离的抗体，其中所述抗体包含：X1YGMN(SEQ ID NO:105)所示的重链互补决定区1(HC CDR1)，其中X1可以是N或Y；MIYYDSSX2KHYADSVKG(SEQ ID NO:106)所示的重链互补决定区2(HC CDR2)，其中X2可以是E或D；GX3TPDX4(SEQ ID NO:107)所示的重链互补决定区3(HC CDR3)，其中X3可以是T或S，并且X4可以是Y、V或K；和/或者RSSQSLX5X6SDGX7TFLX8(SEQ ID NO:108)所示的轻链互补决定区1(LC CDR1)，其中X5可以是A或E，X6可以是T、S、E或D，X7可以是D、Y或G，并且X8可以是E或H；X9VSX
10
RFS(SEQ ID NO:109)所示的轻链互补决定区2(LC CDR2)，其中X9可以是E、D或A，并且X
10
可以是N、S、T、E或H；X
11
QX
12
TX
13
DPX
14
X
15
(SEQ ID NO:110)所示的轻链互补决定区3(LC CDR3)，其中X
11
可以是F或M，X
12
可以是V或A，X
13
可以是H或Y，X
14
可以是M、L或V，并且X
15
可以是T或S。2.权利要求1所述的方法，其中所述对象通过皮下注射进行施用。3.权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述患有骨髓纤维化的对象患有由促炎性细胞因子诱导的铁调素表达导致的贫血，并且其中所述抗体的施用减轻了该贫血。4.权利要求3所述的方法，其中所述促炎性细胞因子包含白介素
‑
6(IL
‑
6)。5.权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述抗体包含SEQ ID NO:1的HC CDR1、SEQ ID NO:2的HC CDR2、SEQ ID NO:3的HC CDR3和SEQ ID NO:17的LC CDR1、SEQ ID NO:5的LC CDR2、SEQ ID NO:27的LC CDR3。6.权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述抗体包含含有SEQ ID NO:38的氨基酸序列的重链可变区(VH)，并且包含含有SEQ ID NO:39的氨基酸序列的轻链可变区(VL)。7.权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述抗体是包含人源化VH和/或人源化VL的人源化抗体。8.权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述抗体选自全长IgG、Fab片段、F(ab
’
)片段、F(ab
’
)2片段、scFv和Fv。9.权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述抗体是包含同种型IgG1、IgG2、IgG3或IgG4的重链恒定区的全长IgG。10.权利要求9所述的方法，其中所述抗体包含含有SEQ ID NO:61或117的氨基酸序列的重链，并且包含含有SEQ ID NO:62的氨基酸序列的轻链。11.权利要求9所述的方法，其中所述抗体包含含有SEQ ID NO:63或118的氨基酸序列的重链，并且包含含有SEQ ID NO:62的氨基酸序列的轻链。12.权利要求1至11中任一项所述的方法，其中所述对象在JAK2，MPL，ASXL1，TET2，NFE2，SH2B3，SF3B1，或CALR中具有引发骨髓纤维化的突变。13.权利要求1至12中任一项所述的方法，其中所述对象患有原发性骨髓纤维化。14.权利要求1至13中任一项所述的方法，其中所述对象的DIPSS评分大于1。15.权利要求1至14中任一项所述的方法，其中所述对象呈现出低于10g/dL的血清血红蛋白水平。
16.权利要求1至15中任一项所述的方法，其中所述对象呈现出低于8g/dL的血清血红蛋白水平。17.权利要求1至16中任一项所述的方法，其中所述对象是红细胞输注依赖性的。18.权利要求1至17中任一项所述的方法，其中所述对象先前已接受选自鲁索替尼、菲卓替尼、帕瑞替尼、INCB039110、AG490和PpYLKTK的选择性JAK
‑
STAT抑制剂。19.与人血幼素(HJV)结合的分离的抗体，其中所述抗体包含含有SEQ ID NO:38的氨基酸序列的VH，和/或包含含有SEQ ID NO:39的氨基酸序列的VL。20.权利要求19所述的分离的抗体，其中所述抗体是人源化抗体。21.权利要求19或20所述的分离的抗体，其中所述抗体选自全长IgG、Fab片段、F(ab
’
)片段、F(ab
’
)2片段、scFv和Fv。22.权利要求21所述的分离的抗体，其中所述抗体是包含同种型IgG1、IgG2、IgG3或IgG4的重链恒定区的全长IgG。23.权利要求22所述的分离的抗体，其中所述抗体包含含有SEQ ID NO:61或117的氨基酸序列的重链，并且包含含有SEQ ID NO:62的氨基酸序列的轻链。24.权利要求22所述的分离的抗体，其中所述抗体包含含有SEQ ID NO:63或118的氨基酸序列的重链，并且包含含有SEQ ID NO:62的氨基酸序列的轻链。25.治疗患有骨髓纤维化的对象的方法，所述方法包括：通过皮下施用向所述对象施用有效量的与人血幼素(HJV)结合的分离的抗体，其中所述抗体包含：含有SEQ ID NO:38的氨基酸序列的重链可变区(VH)，和含有SEQ ID NO:39的氨基酸序列的轻链可变区(VL)。26.在患有骨髓纤维化的对象中抑制HJV活性的方法，所述方法包括：通过皮下施用...

【专利技术属性】
技术研发人员：马里亚，
申请(专利权)人：艾伯维德国有限责任两合公司艾伯维公司，
类型：发明
国别省市：