用于预防和治疗病毒感染的多肽制造技术

一种用于治疗涉及丝氨酸蛋白酶的病毒引起的病毒感染，并减缓所述病毒的感染扩散的多肽，所述多肽具有选自与LEKTI、SPINK6或SPINK9

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于预防和治疗病毒感染的多肽
[0001]本专利技术的主题是一种用于预防和治疗涉及丝氨酸蛋白质酶(proteinase)的病毒引起的病毒感染的多肽，特别是冠状病毒，如CoV
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2或流感病毒。
[0002]冠状病毒病(COVID
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19)是首次在人类中鉴定的一种由新型病毒SARS
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CoV
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2引起的传染病。这种病毒还会导致呼吸道疾病，症状包括咳嗽和发热。在更严重的情况下可能会出现肺炎。由冠状病毒引起的流行已经在世界范围内导致了极其严重的健康问题，并且因此导致了相当大的经济和社会破坏。
[0003]流感病毒属于正粘病毒(Orthomyxoviridae)科(RNA病毒)，并引起流感(“真正的”流感)。
[0004]WO 02/066513 A2和WO 03/070953 A1公开了丝氨酸蛋白质酶抑制剂LEKTI的人类循环片段及其用于治疗急性或慢性皮肤疾病、宫颈炎症、巴氏腺和其它阴道区域的炎症、扁桃体炎、咽炎和喉炎、与过量粘液形成有关的急性或慢性炎症过程以及由此引起的急性紧急情况、纤溶亢进(hypefibrinolysis)引起的术后出血、用于预防α1
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蛋白质酶抑制剂缺乏引起的肺气肿、以及用于治疗哮喘、艾滋病、肺炎、肿瘤疾病和白血病。LEKTI是淋巴上皮Kazal型相关抑制剂(Lympho
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epithelial Kazal
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type
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related inhibitor，LEKTI)的首字母缩写，也称为丝氨酸蛋白酶抑制剂Kazal型5(SPINK5)，在人类中由基因SPINK5编码。多肽SPINK6和SPINK9也是已知的。
[0005]提供减缓或阻止病毒传播的方法，一方面作为预防措施，另一方面为能够对受感染的患者进行治疗，是迫切需要的。
[0006]令人惊讶是，LEKTI的结构域1
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14，特别是3
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14，以及多肽SPINK6和SPINK9被发现充当TMPRSS2和KLK5的肽抑制剂，并且可以预防性地和治疗性地用于治疗病毒感染或由此引起的疾病，例如COVID
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19或流感。多肽具有至少70％的序列一致性。
[0007]TMPRSS2(上皮素)是一种内源性胰蛋白酶样丝氨酸蛋白质酶(蛋白水解酶)，对于冠状病毒
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2或流感病毒的感染是必需的。在不联系理论的情况下，机制原理可以想象如下：TMPRSS2水解切割病毒“刺突”蛋白的一部分，使其激活并使其与宿主细胞的特定表面蛋白对接(dock)。这是感染的必要前提。因此，这种蛋白质酶的抑制剂可作为治疗COVID
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19或流感的药物(LiWenShen，Hui JuanMao，YanLingWu，YoshimasaTanaka，Wen Zhang，TMPRSS2：A potential target for treatment of influenza virus and coronavirus in
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fections，Biochimie 142(2017)1
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10；Brian S.Hamilton and Gary R.Whit
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taker，Cleavage Ac
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tivation of Human
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adapted Influenza Virus Subtypes by Kal
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likrein
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related Peptidases 5and 12*，The Journal Of Biological Chemistry Vol.288，No.24，pp.17399
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17407，June 14，2013)。胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶KLK5(kallikrein
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related peptidase 5，激肽释放酶相关肽酶5)可以在赖氨酸残基后切割，优选地在精氨酸后切割(MEROPS数据库http：//www.ebi.ac.uk/merops/cgi
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bin/pepsum？id＝S01.017；type＝P)。由于KLK5和TMPRSS2在流感刺突蛋白的激活中具有相当的特性，因此假设两者都具有相似的切割特异性，并且TMPRSS2也倾向于在精氨酸之后切割。
[0008]LEKTI的结构域3
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14位于抑制中心，“模拟(imitate)”天然底物，并在相应的位点
(“P1位点”)具有精氨酸残基。因此，特别是LEKTI的结构域3
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14有望作为丝氨酸蛋白质酶KLK5和TMPRSS2的抑制剂，并由此抑制流感和冠状病毒感染。
[0009]因此，本专利技术的主题是，第一，具有选自LEKTI多肽结构域1
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14中的至少一个的氨基酸序列的多肽，特别是具有SEQ ID NO：1至35的氨基酸序列的多肽；第二，多肽SPINK6或SPINK9，特别是具有SEQ ID NO：37和39或40和42的多肽，用于治疗涉及丝氨酸蛋白质酶的病毒引起的病毒感染，以及减缓所述病毒(特别是冠状病毒或流感病毒)感染的扩散。
[0010]在另一个实施方案中，本专利技术涉及具有与LEKTI、SPINK6或SPINK9多肽的结构域1
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14中任一至少70％序列一致性的氨基酸序列的多肽在制备药物中的用途，所述药物用于治疗涉及丝氨酸蛋白质酶的病毒感染和减缓病毒感染的扩散。
[0011]在另一个实施方案中，本专利技术涉及一种治疗涉及丝氨酸蛋白质酶的病毒引起的病毒感染导致的疾病的方法，并通过施用具有与LEKTI、SPINK6或SPINK9
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多肽的结构域1
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14中任一至少70％序列一致性的氨基酸序列的多肽来减缓所述病毒感染的扩散。
[0012]下面将进一步解释这些实施方案。所有优选特征可以以任何组合应用于任何上述实施方案。
[0013]图1显示了LEKTI多肽的15个结构域的典型代表的比对。典型的是在氨基酸序列中分别存在四个半胱氨酸(Cys)残基，而六个半胱氨酸的存在显示了抑制作用的增强。除了肽15外，其他结构域中Cys残基的间距是相同的。在肽15中，需要在比对中第二个Cys之前缺失来匹配，这意味着那里存在相同数量的氨基酸。第二个和第三个Cys之间的区域明显是
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TREN/SD
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基序，其在大多数结构域中是保守的。
[0014]图2显示了当氨基酸序列中分别存在四个和六个半胱氨酸时，结构域中半胱氨酸的典型桥接。如果存在四个半胱氨酸，第一个半胱氨酸与第四个桥接，第二个半胱氨酸与第三个桥接。如果存在六个半胱氨酸，S
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S键的形成通常发生在第一个和第五个之间，第二个和第四个之间，以及第三个和第六个半胱氨酸之间。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于治疗涉及丝氨酸蛋白酶的病毒引起的病毒感染，并减缓所述病毒的感染扩散的多肽，所述多肽的氨基酸序列与选自LEKTI、SPINK6或SPINK9
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多肽的结构域1
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14中任一具有至少70％序列一致性。2.如权利要求1中所述的多肽，其具有选自SEQ ID NO:1至35、37、39、40和42中的至少一个氨基酸序列。3.如权利要求1或2所述的多肽，其中所述多肽为来自LEKTI多肽或SPINK6或SPINK9的结构域的同源或异源二聚体。4.如权利要求1至3中任一项所述的多肽，其中所述多肽包含猪的(procine)、牛的(bovine)LEKTI、SPINK6或SPINK9序列，或者灵长类(primate)，例如人类的LEKTI、SPINK6或SPINK9序列形式。5.如权利要求1至4中任一项所述的多肽，其中所述多肽为LEKTI、SPINK6或SPINK9片段，人类LEKTI、SPINK6或SPINK9结构域的突变体和/或衍生物，且具有治疗效果。6.如权利要求1至5中任一项所述的多肽，其中所述多肽与LEKTI、SPINK6或SPINK9多肽的结构域1
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14中任一具有至少80％、特别地至少90％、特别地至少95％的序列一致性；特别地，所述多肽选自由SEQ ID NO:1至20、21、23、24和26组成的组。7.如权利要求1到6中任一项所述的多肽，其中所述病毒为流感病毒或冠状病毒，特别地为CoV
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2。8.如权利要求1至7中任一项所述的多肽，其基本上存在于水溶液中，特别地在含有药物辅料(pharmaceutical excipient)的水溶液中。9.如权利要求1到8中任一项...

【专利技术属性】
技术研发人员：W，
申请(专利权)人：法里斯生物技术有限责任公司，
类型：发明
国别省市：