RabGGTase在肌萎缩侧索硬化诊断和治疗中的应用制造技术

本发明专利技术属于生物医学领域，具体涉及RabGGTase在肌萎缩侧索硬化诊断和治疗中的应用。本发明专利技术发现，与健康者比较，ALS患者的外周血单核

【技术实现步骤摘要】
RabGGTase在肌萎缩侧索硬化诊断和治疗中的应用


[0001]本专利技术属于生物医药领域，涉及RabGGTase在肌萎缩侧索硬化诊断和治疗中的应用。

技术介绍

[0002]肌萎缩侧索硬化(Amyotrophic lateral sclerosis，ALS)是一种慢性、进行性、致死性神经变性疾病，发病率约为5/10万
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7/10万。表现为脊髓前角细胞、脑干、大脑皮层的运动神经元发生退行性改变。平均生存期3
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5年，最终因肌肉萎缩无力、呼吸衰竭而死亡。甘油三酯、胆固醇、尿酸、肌酐、铁蛋白、白蛋白等多种生物标记物被提议作为ALS预后的因素，然而，仍未达成共识。自噬是一种高度保守的降解机制，有助于维持细胞稳态。在真核细胞中有三种自噬途径：巨自噬、伴侣介导的自噬和微自噬。越来越多的证据支持ALS存在自噬功能障碍，自噬在ALS发病中发挥重要作用。有研究发现抑制甲羟戊酸通路加重SOD1G93A小鼠自噬通量的损伤，导致SOD1蛋白的聚集增加，并且通过抑制Rab7活化而阻断自噬体与溶酶体融合。Rab7异戊二烯化修饰异常可能是加重ALS模型细胞自噬异常的重要原因之一。Rab7受到异戊二烯化转移酶(RabGGTase)的修饰而活化。
[0003]ALS仍是一种无法治愈的疾病，目前缺乏有效的治疗方法，美国FDA认证的力如太、依达拉奉对其治疗作用非常有限，因此迫切需要早期诊断，早期治疗，寻找有效的治疗靶点开发药物来延缓疾病的进程，延长生存期。

技术实现思路

[0004]为了弥补现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种诊断肌萎缩侧索硬化的生物标志物RabGGTase(包括RabGGTA、RabGGTB)，使用该生物标志物RabGGTase，可以评估受试者是否患有肌萎缩侧索硬化或者存在发展肌萎缩侧索硬化的风险；同时本专利技术发现RabGGTB的抑制剂可用来治疗肌萎缩侧索硬化。
[0005]为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
[0006]本专利技术的第一方面提供了检测样本中RabGGTase的试剂在制备诊断肌萎缩侧索硬化、判断神经元细胞活性的产品中的应用。
[0007]进一步，所述检测样本中RabGGTase的试剂包括检测样本中RabGGTase的蛋白表达水平的试剂、检测样本中RabGGTase的mRNA表达水平的试剂。
[0008]进一步，所述检测样本中RabGGTase的试剂为检测样本中RabGGTase的蛋白表达水平的试剂。
[0009]进一步，所述检测样本中RabGGTase的蛋白水平表达的试剂为流式细胞术中所使用的试剂，或者是以下方法中所使用试剂：蛋白质印迹法、酶联免疫吸附测定、放射性免疫测定、夹心测定、免疫组织化学染色、质谱检测法、免疫沉淀分析法、补体结合分析法或蛋白质芯片法。
[0010]进一步，所述样本选自组织、血液、尿液、脑脊液、细胞系、细胞培养物或组织间液。
[0011]进一步，所述血液包括血液衍生的细胞、血小板、血清、血浆。
[0012]进一步，所述血液衍生的细胞包括有核细胞；所述有核细胞包括单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞、淋巴细胞、粒细胞。
[0013]进一步，所述样本为单核细胞、巨噬细胞。
[0014]进一步，所述RabGGTase包括RabGGTA、RabGGTB。
[0015]进一步，所述检测样本中RabGGTase的试剂包括检测单核细胞中RabGGTA或RabGGTB的试剂、检测巨噬细胞中RabGGTB的试剂。
[0016]进一步，所述神经元细胞活性包括以下特征：细胞活力、细胞凋亡程度。
[0017]本专利技术的第二方面提供了一种诊断肌萎缩侧索硬化、判断神经元细胞活性的产品，所述产品包括检测RabGGTase的表达水平所使用的试剂。
[0018]进一步，所述产品包括制剂、试剂盒、芯片或核酸膜条。
[0019]进一步，所述试剂盒包括通过RT
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PCR法、RT
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qPCR法、生物芯片检测法、DNA印迹法、原位杂交法、蛋白质印迹法、流式细胞术、免疫荧光法、免疫组化法、ELISA、电化学发光法等检测RabGGTase蛋白或mRNA表达水平的试剂。
[0020]进一步，所述产品还包括处理样本的试剂。
[0021]进一步，所述处理样本的试剂包括分离单核细胞的试剂或促进单核细胞分化为巨噬细胞的试剂。
[0022]进一步，所述分离单核细胞的试剂包括淋巴细胞分离液、单核细胞分离液。
[0023]进一步，所述分离单核细胞的试剂为淋巴细胞分离液。
[0024]进一步，所述促进单核细胞分化为巨噬细胞的试剂包括巨噬细胞集落刺激因子、粒细胞巨噬细胞刺激因子、佛波酯。
[0025]进一步，所述促进单核细胞分化为巨噬细胞的试剂为巨噬细胞集落刺激因子。
[0026]本专利技术的第三方面提供了RabGGTase在制备治疗肌萎缩侧索硬化、保护神经元的药物组合物中的应用。
[0027]进一步，所述药物组合物包括RabGGTase的抑制剂。
[0028]进一步，所述抑制剂特异性抑制RabGGTase的表达。
[0029]进一步，所述抑制剂包括核酸抑制物、蛋白抑制物、化合物抑制物；所述核酸抑制物包括shRNA、siRNA、dsRNA、微小RNA、反义核酸；所述蛋白抑制物包括蛋白水解酶、蛋白结合分子；所述化合物抑制物包括二磷酸利塞磷酸盐的磷酸酯类似物。
[0030]进一步，所述二磷酸利塞磷酸盐的磷酸酯类似物包括NE10790。
[0031]进一步，所述保护神经元包括提高细胞活力、抑制细胞凋亡。
[0032]进一步，所述RabGGTase包括RabGGTA、RabGGTB。
[0033]进一步，所述RabGGTase为RabGGTB。
[0034]本专利技术的第四方面提供了一种治疗肌萎缩侧索硬化、保护神经元的药物组合物，所述药物组合物包括RabGGTase的抑制剂。
[0035]进一步，所述抑制剂特异性抑制RabGGTase的表达。
[0036]进一步，所述抑制剂包括核酸抑制物、蛋白抑制物、化合物抑制物；所述核酸抑制物包括shRNA、siRNA、dsRNA、微小RNA、反义核酸；所述蛋白抑制物包括蛋白水解酶、蛋白结合分子；所述化合物抑制物包括二磷酸利塞磷酸盐的磷酸酯类似物。
[0037]进一步，所述二磷酸利塞磷酸盐的磷酸酯类似物包括NE10790。
[0038]进一步，所述RabGGTase包括RabGGTA、RabGGTB。
[0039]进一步，所述RabGGTase为RabGGTB。
[0040]进一步，所述药物组合物还包括药学上可接受的载体。
[0041]本专利技术的第五方面提供了如下任一种方法：
[0042]1)保护神经元的方法，所述方法包括抑制RabGGTase的表达。
[0043]2)判断神经元细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.检测样本中RabGGTase的试剂在制备诊断肌萎缩侧索硬化、判断神经元细胞活性的产品中的应用；优选地，所述检测样本中RabGGTase的试剂包括检测样本中RabGGTase的蛋白表达水平的试剂、检测样本中RabGGTase的mRNA表达水平的试剂；优选地，所述检测样本中RabGGTase的试剂为检测样本中RabGGTase的蛋白表达水平的试剂；优选地，所述检测样本中RabGGTase的蛋白水平表达的试剂为流式细胞术中所使用的试剂，或者是以下方法中所使用试剂：蛋白质印迹法、酶联免疫吸附测定、放射性免疫测定、夹心测定、免疫组织化学染色、质谱检测法、免疫沉淀分析法、补体结合分析法或蛋白质芯片法；优选地，所述样本选自组织、血液、尿液、脑脊液、细胞系、细胞培养物或组织间液；优选地，所述血液包括血液衍生的细胞、血小板、血清、血浆；优选地，所述血液衍生的细胞选自有核细胞；所述有核细胞包括单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞、淋巴细胞、粒细胞；优选地，所述样本为单核细胞、巨噬细胞；优选地，所述RabGGTase包括RabGGTA、RabGGTB；优选地，所述检测样本中RabGGTase的试剂包括检测单核细胞中RabGGTA或RabGGTB的试剂、检测巨噬细胞中RabGGTB的试剂；优选地，所述神经元细胞活性包括以下特征：细胞活力、细胞凋亡程度。2.一种诊断肌萎缩侧索硬化、判断神经元细胞活性的产品，其特征在于，所述产品包括检测RabGGTase的表达水平所使用的试剂；优选地，所述产品包括制剂、试剂盒、芯片或核酸膜条；优选地，所述试剂盒包括通过RT
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PCR法、RT
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qPCR法、生物芯片检测法、DNA印迹法、原位杂交法、蛋白质印迹法、流式细胞术、免疫荧光法、免疫组化法、ELISA、电化学发光法检测RabGGTase蛋白或mRNA表达水平的试剂。3.根据权利要求2所述的产品，其特征在于，所述产品还包括处理样本的试剂；优选地，所述处理样本的试剂包括分离单核细胞的试剂或促进单核细胞分化为巨噬细胞的试剂；优选地，所述分离单核细胞的试剂包括淋巴细胞分离液、单核细胞分离液；优选地，所述分离单核细胞的试剂为淋巴细胞分离液；优选地，所述促进单核细胞分化为巨噬细胞的试剂包括巨噬细胞集落刺激因子、粒细胞巨噬细胞刺激因子、佛波酯；优选地，所述促进单核细胞分化为巨噬细胞的试剂为巨噬细胞集落刺激因子。4.RabGGTase在制备治疗肌萎缩侧索硬化、保护神经元的药物组合物中的应用；优选地，所述药物组合物包括RabGGTase的抑制剂；优选地，所述抑制剂特异性抑制RabGGTase的表达；优选地，所述抑制剂包括核酸抑制物、蛋白抑制物、化合物抑制物；优选地，所述核酸抑制物包括shRNA、siRNA、dsRNA、微小RNA、反义核酸；优选地，所述蛋白抑制物包括蛋白水解酶、蛋白结合分子；
优选地，所述化合物抑制物包括二磷酸利塞磷酸盐的磷酸酯类似物；优选地，所述二磷酸利塞磷酸盐的磷酸酯类似物包括NE10790；优选地，所述保护神经元包括提高细胞活力、抑制细胞凋亡；优选地，所述RabGGTase包括RabGGTA、RabGGTB；优选地，所述RabGGTase为RabGGTB。5.一种治疗肌萎缩侧索硬化、保护神经元的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括RabGGTase的抑制剂；优选地，所述抑制剂特异性抑制RabGGTase的表达；优选地，所述抑制剂包括核酸抑制物、蛋白抑制剂、化合物抑制物；优选地，所述核酸抑制物包括shRNA、siRNA...

【专利技术属性】
技术研发人员：李睿，刘亚玲，杨静，
申请(专利权)人：河北医科大学第二医院，
类型：发明
国别省市：