一种增强胶体金免疫层析法检测灵敏度的方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种增强胶体金免疫层析法检测灵敏度的方法和应用。本发明专利技术在胶体金免疫层析法检测时，通过采用多种不同粒径的胶体金组合使用，具体为采用小粒径胶体金和大粒径胶体金分别与抗体结合后，再混合使用，能够增强胶体金免疫层析法检测灵敏度，以不同粒径胶体金的最佳混合比例能显著提高检测的灵敏度，避免拖带、假阳性、产生空间位阻等问题；同时，将不同粒径的胶体金浓缩后再混合使用，能进一步增进免疫层析法检测灵敏度，使胶体金能更加稳定地与抗体结合并进行检测。本发明专利技术提供的方法在维持原有检测特异性的前提下，有效提高了胶体金检测试纸条的检出限，且该方法简单易行，成本低，适于大批量生产。适于大批量生产。适于大批量生产。

【技术实现步骤摘要】
一种增强胶体金免疫层析法检测灵敏度的方法和应用


[0001]本专利技术属于胶体金检测
更具体地，涉及一种增强胶体金免疫层析法检测灵敏度的方法和应用。

技术介绍

[0002]胶体金免疫层析技术是一种以胶体金为显色媒介，将抗体标记在胶体金上，利用免疫学中抗原和抗体能够特异性结合的特点，在层析中对抗原进行检测的一种体外诊断技术。现阶段，胶体金免疫层析技术虽然不比免疫荧光、荧光PCR等检测方法的灵敏度高，但由于其具有快速简便、特异性强、稳定性强、不需要复杂的仪器设备、结果判断直观等优势，在医学、食品、农业等许多领域的检测中都有其适用的场景。
[0003]胶体金免疫层析的检测灵敏度是有限的，许多改进其检测灵敏度的方法也较为繁琐，不利于降低成本和大批量生产。如现有技术中采用增敏试剂或对检测体系条件参数优化，以及对抗体的质量浓度和反应速率进行优化改进，从而提高其灵敏度，但这些方法都存在稳定性差、标记效率不高、容易产生假阴性结果、易受背景影响等问题。在胶体金免疫检测应用中，其使用胶体金的浓度、颗粒大小、形状等都会影响检测的灵敏度，特异性和稳定性本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种增强胶体金免疫层析法检测灵敏度的方法，其特征在于，在胶体金免疫层析法检测时，采用多种不同粒径的胶体金组合使用。2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，具体是采用两种粒径的胶体金组合使用。3.根据权利要求2所述方法，其特征在于，具体是采用小粒径胶体金和大粒径胶体金分别与抗体结合后，再混合使用；所述小粒径胶体金的粒径为50～60nm，大粒径胶体金的粒径为70～150nm。4.根据权利要求3所述方法，其特征在于，所述小粒径胶体金为60nm胶体金，大粒径胶体金为90nm胶体金。5.根据权利要求3或4所述方法，其特征在于，小粒径胶体金与大粒径胶体金的体积比为6～12:1；所述小粒径胶体金浓度为0.5～3g/L，大粒径胶体金浓度为0.5～2g/L。6.根据权利要求1
‑
5任一所述方法，其特征在于，具体方法如下所示：S1.分别取不同粒径的胶体金，经过标记抗体、离心，制备抗体标记的胶体金沉淀；...

【专利技术属性】
技术研发人员：蒋析文，张月明，胡飞驰，裴瑞琴，
申请(专利权)人：广州达安基因股份有限公司，
类型：发明
国别省市：