序列偏倚降低的热稳定连接酶制造技术

本发明专利技术涉及DNA和/或RNA连接酶、其氨基酸序列、其核酸序列和由这些核酸序列编码的DNA和/或RNA连接酶蛋白质，以及包含所述DNA和/或RNA连接酶的核酸或氨基酸序列的部分的核酸或氨基酸构建体。本发明专利技术还涉及将所述DNA和/或RNA连接酶用于分子生物学测定法和分子诊断应用的方法以及包含所述DNA和/或RNA连接酶的试剂盒。剂盒。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】序列偏倚降低的热稳定连接酶


[0001]本专利技术属于分子生物学领域，特别是酶领域，更特别是连接酶领域。本专利技术也属于单链核酸环化领域。

技术介绍

[0002]本专利技术涉及连接酶，特别是能够进行模板非依赖性分子间和/或分子内核酸分子连接的热稳定连接酶。本专利技术还包括使用热稳定连接酶的方法，特别是在单链核酸分子环化中。
[0003]例如聚合酶和连接酶的酶是现代分子生物学和分子诊断学的主力军。由于分子生物学和分子诊断学领域取得的巨大进步，例如通过下一代测序(NGS)、聚合酶链反应(PCR)、滚环扩增(RCA)和数字PCR(dPCR)的发展和改进，迫切需要高效的酶来进一步改进现有的方法和测定法，并为这些
开发新方法。
[0004]连接酶是可以催化两个分子(例如核酸分子)接合的酶。核糖核酸(RNA)和/或脱氧核糖核酸(DNA)连接酶在噬菌体T4感染细胞中很丰富并且催化5'
‑
磷酰基末端核酸供体(RNA或DNA)与3'
‑
羟基末端核酸受体的连接(Silber等人,1972.PNAS,第69卷本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种热稳定连接酶，所述热稳定连接酶由以下组成或包含以下：SEQ ID NO.2的氨基酸序列或与其具有至少60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或98％氨基酸序列同一性的多肽或其具有连接酶活性的衍生物或片段。2.根据权利要求1所述的热稳定连接酶，其中所述连接酶能够进行RNA或DNA分子的分子内连接。3.根据权利要求1所述的热稳定连接酶，其中所述连接酶能够进行两个或更多个RNA和/或DNA分子的分子间连接。4.根据权利要求1至3所述的热稳定连接酶，其中所述RNA和/或DNA分子是单链的。5.根据权利要求1至4所述的热稳定连接酶，其中所述连接酶不需要桥接或夹板核酸分子用于连接。6.根据权利要求1至5所述的热稳定连接酶，其中所述连接酶是模板非依赖性的。7.根据权利要求1至6所述的热稳定连接酶，其中所述连接酶是未腺苷酸化的并且需要ATP来发挥活性。8.根据权利要求1至7所述的热稳定连接酶，其中未腺苷酸化的连接酶能够在ATP存在下进行多轮的自腺苷酸化和催化。9.根据权利要求1至6所述的热稳定连接酶，其中所述连接酶是腺苷酸化的并...

【专利技术属性】
技术研发人员：瑞安，
申请(专利权)人：凯杰贝佛利有限公司，
类型：发明
国别省市：