一种旱田土中完全氨氧化反应及其N2O产生速率的测定方法技术

本发明专利技术涉及了一种旱田土中完全氨氧化反应及其N2O产生速率的测定方法。本方法通过抑制剂的选择性抑制能力，即3,4

【技术实现步骤摘要】
一种旱田土中完全氨氧化反应及其N2O产生速率的测定方法


[0001]本专利技术涉及环境微生物检测领域，硝化过程作为重要的氮流失途径不仅促使氮肥转化为硝酸盐以径流和冲洗的方式流失，同时也产生氧化亚氮等温室气体造成全球气候变暖等一系列的环境问题。完全氨氧化细菌作为新型氮循环微生物具有独立完成全程硝化过程和可以利用多种底物来维持自身生长等特性。因此，了解完全氨氧化细菌在氮肥损失中的贡献对优化氮肥管理，提高氮肥利用率和发展环境友好型农业生产具有重要意义。

技术介绍

[0002]氮(N)元素是维持生命活动的基础物质，微生物驱动土壤氮循环过程是影响地球生物化学循环的重要步骤。氮肥是农业生产中不可或缺的外部投入，中国作为人口超级大国，氮肥施用量占全球的32％左右，而氮肥流失过程导致其作物利用率不高和温室气体(氧化亚氮，氨气等)的排放等问题一直困扰着田间管理和环境管控。硝化过程，作为不可忽视的重要氮流失途径得到了广泛的关注。自被发现以来一个多世纪，人们一直认为硝化过程是由氨氧化作用和亚硝化作用两个过程顺次进行的，分别由氨氧化微生物和亚硝酸盐氧化微生物催化反应，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种旱田土中完全氨氧化反应及其N2O产生速率的测定方法，其特征如下：(1)组合抑制剂培养：组合使用三种具有选择抑制性的生物抑制剂对旱地农田土壤进行批次培养实验，其结果同时得到完全氨氧化细菌、专性的氨氧化细菌和古菌的氨氧化反应和N2O产生速率及其贡献率，抑制剂及其对应过程为：3,4
‑
二甲基吡唑磷酸盐(DMPP)选择性抑制完全氨氧化细菌和专性的氨氧化细菌，辛炔(C8H
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)选择性抑制专性的氨氧化细菌，乙炔(C2H2)抑制所有氨氧化微生物；(2)氨氧化反应速率及其贡献率：通过不同抑制剂处理组之间的铵态氮(NH
4+
‑
N)消耗速率变化，计算得到旱地农田土壤样品中完全氨氧化细菌的氨氧化反应速率，同时得到专性的氨氧化细菌和古菌的氨氧化反应速率，并进一步处理数据得到完全氨氧化细菌、专性的氨氧化细菌和古菌对氨氧化过程的贡献率；(3)N2O产生及其贡献率：通过不同抑制剂处理组之间的氧化亚氮(N2O)累积速率变化，计算得到旱地农田土壤样品中完全氨氧化细菌的N2O生成速率，同时得到专性的氨氧化细菌和古菌的N2O生成速率，并进一步处理数据得到完全氨氧化细菌、专性的氨氧化细菌和古菌对N2O产生的贡献率。2.根据权利要求1所述，本方法优选将2克新鲜旱地农田土壤样品放置于20毫升血清瓶中，使用胶塞与铝盖密封后避光保存，对血清瓶进行不同抑制剂处理后于原位土壤温度和溶解氧条件下培养，要求每个处理设置三组平行。3.根据权利要求1所述，本方法优选添加1毫升硫酸铵((NH4)2SO4，终浓度50mg N/kg)到血清瓶中，作为处理
Ⅰ‑
对照组。4.根据权利要求1所述，本方法优选添加1毫升硫酸铵((NH4)2SO4,终浓度50mg N/kg)和4毫升抑制剂辛炔(C8H
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，终浓度0.03v/v％)到血清瓶中，作为处理
Ⅱ‑
C8H
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抑制组。5.根据权利要求1所述，本方法优选添加0.5毫升硫酸铵((NH4)2SO4,终浓度50mg N/kg)和0.5毫升抑制剂3,4
‑
二甲基吡唑磷酸盐(DMPP，终浓度0.5mg...

【专利技术属性】
技术研发人员：祝贵兵，姜丽萍，王衫允，
申请(专利权)人：中国科学院生态环境研究中心，
类型：发明
国别省市：