愈创木烷型倍半萜激活潜伏HIV的应用及其制备方法技术

本发明专利技术属于药物技术领域，具体涉及愈创木烷型倍半萜激活潜伏HIV的应用及其制备方法。本发明专利技术从河朔荛花根中分离得到两个愈创木烷型倍半萜类化合物daphneH和oleodaphnone，该类化合物具有较好的激活潜伏HIV病毒的活性，该化合物激活潜伏HIV病毒活性至今尚未见到相关报道，且化合物daphneH为新化合物。且化合物daphneH为新化合物。且化合物daphneH为新化合物。

【技术实现步骤摘要】
愈创木烷型倍半萜激活潜伏HIV的应用及其制备方法


[0001]本专利技术属于药物
，具体涉及愈创木烷型倍半萜激活潜伏HIV的应用及其制备方法。

技术介绍

[0002]艾滋病是由人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiencyvirus，HIV)引起的感染性疾病，迄今全球仍有近3700万HIV感染者，占全球人口的0.52％，是现代历史上最严重的传染性疾病之一。目前针对艾滋病的治疗手段主要是高效抗逆转录病毒疗法(highly active antiretroviral therapy，HAART)，即采用2种或3种逆转录酶抑制剂和至少1种蛋白酶抑制剂进行联合作用。该疗法可以最大限度地抑制HIV复制，有效降低血浆病毒载量，延长感染者的无症状期，从而延长感染者寿命。然而，HAART疗法不能彻底根除机体内的HIV
‑
1病毒，更不能使感染者的免疫功能恢复正常，临床中也逐渐出现了许多药物毒副作用和耐药毒株。重要的是，停止HAART治疗后，病毒载量将会迅速反弹。这主要是由于有一部分HIV
‑
1感染人体后会稳定持续地存在于一些静息型的CD4
+
T细胞内，形成潜伏病毒储存库。在这些静息型CD4
+
T细胞中，病毒基因组处于低水平转录状态，几乎没有病毒的产生或仅有极少量病毒产生。而这样的潜伏细胞由于缺乏病毒蛋白，与正常细胞并无区别，所以不会被宿主免疫系统觉察，从而避免了免疫系统以及药物对它的攻击。一旦HAART停止后，这些静息细胞就会被一些抗原或细胞因子活化，重新参与到病毒的复制周期中。因此，HIV潜伏感染是艾滋病无法治愈的根本原因。
[0003]随着人们对HIV
‑
1潜伏感染的建立及维持机制的深入研究，研究人员提出了“shock and kill”的治疗策略，即通过潜伏感染激活剂(latency reactivation agent，LRA)激活潜伏的HIV使之发生转录，然后与HAART联合使用，并结合细胞的自身免疫监视系统，从而实现清除HIV
‑
1病毒潜伏库的目的。因此，基于“shock and kill”这种治疗策略，筛选安全高效的LRA、发现新的激活机制和作用靶点，是目前艾滋病新药研发的基础和关键问题。目前已发现报道的LRA主要有二萜类、黄酮类、生物碱类等。
[0004]本专利技术从河朔荛花根中分离得到两个愈创木烷型倍半萜类化合物daphne H和oleodaphnone，该类化合物具有较好的激活潜伏HIV病毒的活性，该化合物激活潜伏HIV病毒活性至今尚未见到相关报道，且化合物daphne H为新化合物。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供两种愈创木烷型倍半萜类化合物daphne H和oleodaphnone及其药学上可接受的盐(有机酸、或无机酸)，该类化合物为激活潜伏HIV病毒药物活性成分组成的药物组合物，其制备方法与其在制备激活潜伏HIV病毒中的应用。
[0006]为了达到上述目的，本专利技术采用了下列技术方案：
[0007]愈创木烷型倍半萜类化合物daphne H和oleodaphnone，其结构式如下：
[0008][0009]式(1)和式(2)所示的化合物daphne H和oleodaphnone的制备方法，包括以下步骤：
[0010]步骤1，取河朔荛花根，干燥；用十倍量体积分数为95％乙醇回流提取2次，每次3h，离心，滤过，合并提取液，减压浓缩得到浸膏；
[0011]步骤2，反相硅胶色谱梯度洗脱，得到6个组分A1
‑
A6，组分A3经ODS柱层析梯度洗脱，得到7个组分A31
‑
A37；
[0012]步骤3，组分A35经正向硅胶柱层析梯度洗脱得到3个组分A351
‑
A353；
[0013]步骤4，组分A351经两次Sephadex LH
‑
20柱色谱分离，再经半制备高效液相色谱纯化得到化合物(1)，组分A36经两次Sephadex LH
‑
20柱色谱分离，再经半制备高效液相色谱纯化得到化合物(2)。
[0014]进一步，所述步骤2中反相硅胶色谱梯度洗脱为：体积百分数为10
‑
100％的乙醇水溶液梯度洗脱，所述ODS柱层析梯度洗脱为：体积百分数为40％
‑
90％的乙醇水溶液梯度洗脱；
[0015]所述步骤3中正向硅胶柱层析梯度洗脱为：氯仿:甲醇的体积比＝40:1
‑
0:1梯度洗脱；
[0016]所述步骤4中半制备高效液相色谱纯化得到化合物(1)为：40％甲醇
‑
60％水，所述半制备高效液相色谱纯化得到化合物(2)为：45％甲醇
‑
55％水，％是指体积百分数。
[0017]式(1)和式(2)所述的愈创木烷型倍半萜类化合物在制备激活潜伏HIV病毒药物中的应用。
[0018]进一步，所述激活潜伏HIV病毒药物为含有式(1)和式(2)所述两种愈创木烷型倍半萜类化合物或其药学上可接受的盐，及可药用载体或赋形剂。
[0019]一种药物组合物的活性成分为式(1)和式(2)所述愈创木烷型倍半萜类化合物的至少一种。
[0020]本专利技术化合物用作药物时，可以直接使用，或以药学上可接受的盐以及药物组合物的形式使用。该药物组合物含有0.1
‑
99％，优选为0.5
‑
90％的本专利技术化合物，其余为药物学上可接受的，对人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。
[0021]所述的药用载体或赋形剂是一种或多种固体、半固体和液体稀释剂、填料以及药物制品辅剂。将本专利技术的药物组合物以单位体重服用量的形式使用。苔黑酚
‑1‑
氧
‑
β
‑
D
‑
葡萄糖吡喃苷、苔黑酚及其衍生物的组合物采用制药和食品领域公认的方法制备成各种剂型、如液体制剂(注射剂、混悬剂、乳剂、溶液剂、糖浆剂等)、固体制剂(片剂、胶囊剂、颗粒剂，冲剂等)、喷剂、气雾剂等。本专利技术的药物可经注射(静脉注射、静脉滴注、肌肉注射、腹腔注射、皮下注射)和口服、舌下给药、粘膜透析等给药途径进行激活潜伏HIV病毒的治疗。
[0022]与现有技术相比本专利技术具有以下优点：
[0023]本专利技术从河朔荛花根中分离得到两个愈创木烷型倍半萜类化合物daphne H和oleodaphnone，该类化合物具有较好的激活潜伏HIV病毒的活性，该化合物激活潜伏HIV病毒活性至今尚未见到相关报道，且化合物daphne H为新化合物。
附图说明
[0024]图1为两个愈创木烷型倍半萜化合物对HeLa
‑
NH2细胞增值的影响结果图；
[0025]图2为两个愈创木烷型倍半萜体化合物外激活潜伏HIV活性测定结果图。
具体实施方式
[0026]为了更本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.愈创木烷型倍半萜类化合物，其特征在于，结构式如下：2.权利要求1所述愈创木烷型倍半萜类化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1，取河朔荛花根，干燥；用十倍量体积分数为95％乙醇回流提取2次，每次3h，离心，滤过，合并提取液，减压浓缩得到浸膏；步骤2，反相硅胶色谱梯度洗脱，得到6个组分A1
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A6，组分A3经ODS柱层析梯度洗脱，得到7个组分A31
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A37；步骤3，组分A35经正向硅胶柱层析梯度洗脱得到3个组分A351
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A353；步骤4，组分A351经两次Sephadex LH
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20柱色谱分离，再经半制备高效液相色谱纯化得到化合物(1)，组分A36经两次Sephadex LH
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20柱色谱分离，再经半制备高效液相色谱纯化得到化合物(2)。3.根据权利要求2所述的愈创木烷型倍半萜类化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤2中反相硅胶色谱梯度洗脱为：体积百分...

【专利技术属性】
技术研发人员：李石飞，王修艺，张立伟，
申请(专利权)人：山西大学，
类型：发明
国别省市：