【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物活性肽领域，具体涉及一种酸枣仁活性肽提取物(fzssp-l)的制备方法，以及fzssp-l在制备用于预防和/或治疗炎症性肠病的相关医药产品中的应用。
技术介绍
1、炎症性肠病(inflammatory bowel disease，ibd)指的是一系列发生于胃肠道的慢性炎症性疾病。近年来由于快速的城市化、工业化以及生活方式的改变，ibd在亚洲等低发病率地区的发病率逐步上升，目前已成为我国的常见消化系统疾病，由于病程长、难治愈、费用高，难以控制易恶化甚至致残等一系列问题，给人类生存及生活带来巨大负担。目前临床上治疗ibd主要依赖于手术、生活方式干预或药物治疗，临床应用的ibd的治疗药物种类繁多，如：氨基水杨酸类，糖皮质激素，免疫抑制剂及生物制剂等，但这些药物或作用有限、或有严重不良反应，无法满足患者治疗需求。因此，筛选疗效显著、价格实惠、副作用小的新型治疗药物仍然是医学界的研究热点。
2、植物多肽是从植物中分离得到的具有生理功能的生物活性肽，其来源广泛、获取成本低、营养价值高，且具有诸多生物学功能，如促进免疫、抗菌、抗病毒、降血脂、降血压、激素调节等作用，而且易消化吸收，已成为一类有益于人类健康的活性因子，可以作为药物筛选的重要宝库。酸枣仁(学名：ziziphus jujuba mill.var.spinosa)，为鼠李科植物酸枣的干燥成熟种子，主产于我国西北地区、黄河流域。酸枣仁作为我国药食同源的道地中药资源，药用价值和经济价值极高。现代药理学研究表明，酸枣仁含有多种有效成分，具有抗氧化、抗炎和抗肿瘤
3、本专利技术通过益生菌发酵制备了一种具有显著改善ibd功效的酸枣仁活性肽提取物，有望进一步研发为防控ibd的新型医药产品，对于酸枣仁蛋白资源药用价值的提升和充分利用具有重要指导意义。
技术实现思路
1、基于上述问题，本专利技术的目的在于提供一种酸枣仁活性肽提取物(fzssp-l)及其制备方法，以及将fzssp-l用于制备预防和/或治疗炎症性肠病的相关医药产品中。
2、为了达到上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
3、一种酸枣仁活性肽提取物的制备方法，包括以下步骤：
4、步骤1，用丙酮-硫酸铵沉淀法制备酸枣仁蛋白提取物；
5、步骤2，酸枣仁蛋白提取物经罗伊氏乳杆菌lrsy523发酵及超滤管截留小于3kda的组分，除盐后获得fzssp-l。
6、所述的罗伊氏乳杆菌lrsy523可见专利zl202111221173.2中(菌种保藏号为cgmccno.22953)。
7、进一步地，所述步骤1的具体步骤如下：
8、(1)取酸枣仁药材，粉碎机粉碎后过60目筛，按照w/v＝1:4-6的比例加入石油醚，搅拌24-36h脱脂处理，离心，待沉淀挥发残存石油醚后，再次粉碎过筛，得酸枣仁脱脂粉，于4℃冰箱中贮藏备用；
9、(2)称取酸枣仁脱脂粉适量，按照w/v＝1:4-6的比例加入蛋白提取液即含0.85％nacl的ph＝8.0的20mm tris-hcl溶液，在4℃搅拌浸提24-36h，离心取上清；
10、(3)加入2-3倍体积的-20℃预冷的80％的丙酮，沉淀1-2h后离心，弃上清，留沉淀，将沉淀置于-20℃，使丙酮完全挥发；将沉淀用ph＝8.0的20mm tris-hcl溶液溶解，离心取上清；
11、(4)根据上清液体积，逐渐加入硫酸铵固体使其饱和度达90％，在4℃静置30-45min后离心，弃上清，留沉淀；
12、(5)将沉淀用ph＝8.0的20mm tris-hcl溶液溶解，离心留上清，100da透析袋透析除盐后，所得溶液即为酸枣仁蛋白提取物，冻干保存备用。
13、进一步地，所述步骤2的具体步骤为：
14、(1)种子液制备
15、将罗伊氏乳杆菌lrsy523按2％体积比接种于mrs种子培养基中，于37℃120 r/min下培养22-26h左右，活化2-3次，使菌体浓度达到1×108cfu/ml以上；
16、所述的种子培养基配方为：mrs肉汤48.3g，蒸馏水1000ml，ph值6.2±0.2；
17、(2)液态发酵
18、接种10％发酵菌株种子液于发酵培养基中，于37℃120 r/min下，发酵46-50h；发酵结束后，用100℃沸水加热5-10min，并将发酵液离心，留上清；
19、所述的发酵培养基配方为：酸枣仁蛋白10-20g，葡萄糖10-25g，磷酸氢二钾2g，硫酸镁0.2g，硫酸锰0.05g，乙酸钠5g，蒸馏水1000ml，ph值6.2±0.2；
20、(3)用3kda的超滤装置截留分子量小于3kda的多肽组分，用200da透析除盐后，得到fzssp-l，冻干保存备用。
21、本专利技术制备的酸枣仁活性肽提取物fzssp-l，通过干预dss诱导的溃疡性结肠炎小鼠模型，结果显示，fzssp-l能够显著改善小鼠的溃疡性结肠炎症状，如：小鼠体重及结肠长度显著恢复，dai评分显著降低，肠道紧密连接蛋白表达显著增加等；同时fzssp-l处理显著抑制了小鼠结肠巨噬细胞m1炎性表型，促进m2抗炎表型。实验表明：fzssp-l有潜力研发为预防和/或治疗炎症性肠病的相关医药产品。
22、与现有技术相比，本专利技术的有益效果如下：
23、本专利技术通过罗伊氏乳杆菌lrsy523发酵获得的酸枣仁活性肽提取物fzssp-l，得率高、抗炎活性好，分子量小、易于被人体吸收利用，生物利用度高，易于研发相关医药产品。微生物拥有高效的蛋白质水解体系，有助于生物活性肽的释放。利用微生物发酵获得的活性肽，具有成本低廉、制备工艺简单、安全无毒性和口感好等优点，适用于大规模、低成本和多样化的蛋白肽生产。
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1.一种具有预防和/或治疗炎症性肠病功效的酸枣仁活性肽提取物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤:
2.根据权利要求1所述的酸枣仁活性肽提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤1的具体步骤为：
3.根据权利要求1所述的酸枣仁活性肽提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤2的具体步骤为：
4.根据权利要求1—3任一所述方法制备的酸枣仁活性肽提取物。
5.根据权利要求4所述的酸枣仁活性肽提取物在制备用于预防炎症性肠病的功能食品或保健品中的应用。
6.根据权利要求4所述的酸枣仁活性肽提取物在制备用于预防和/或治疗炎症性肠病的药物中的应用。
【技术特征摘要】
1.一种具有预防和/或治疗炎症性肠病功效的酸枣仁活性肽提取物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤:
2.根据权利要求1所述的酸枣仁活性肽提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤1的具体步骤为：
3.根据权利要求1所述的酸枣仁活性肽提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤2的具体...
【专利技术属性】
技术研发人员：单树花，刘慧芝，韩佳佳，李卓玉，张艺峰，史江颖，
申请(专利权)人：山西大学，
类型：发明
国别省市：
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