阿替洛尔中阿替洛尔环氧化物的检测方法技术

本发明专利技术属于化学检测领域，具体涉及阿替洛尔中阿替洛尔环氧化物的检测方法。本发明专利技术利用三重四级杆液质联用仪测定阿替洛尔中阿替洛尔环氧化物的含量，通过筛选确定了最佳色谱条件和质谱条件（选用检测离子质荷比（m/z）为208.1/178.1），使得本发明专利技术测得的阿替洛尔环氧化物灵敏度高，峰型较好，且峰面积与线性浓度呈现良好的线性关系，定量限重复测定6次RSD为7.36%符合验证要求；空白溶剂和供试品溶液不干扰阿替洛尔环氧化物检测，且加标回收较好，回收率为99.26

【技术实现步骤摘要】
阿替洛尔中阿替洛尔环氧化物的检测方法


[0001]本专利技术属于化学检测领域，特别涉及阿替洛尔中阿替洛尔环氧化物的检测方法。

技术介绍

[0002]环氧化物具有警示结构，是已知的潜在基因毒性杂质，其结构种类繁多，是基因毒性杂质中较为常见的一类。目前对于含有环氧化合物类基因毒杂质药物常用的检测方法为(1)直接检测法，如，采用GC
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FID法直接测定阿莫卡兰中的环氧乙烷的残留量，其LOD为0.09μg/g，可达到较高的精密度和灵敏度。近年来，对环氧氯丙烷(ECH)杂质检测方法报道也比较多，常用气相色谱法、气相色谱
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质谱联用法直接进行检测；对于非挥发性环氧化物则采用液相色谱法进行检测；(2)衍生化法：环氧化合物化学性质不稳定，且有些环氧化物是中性分子，不容易在ESI离子源中质子化和去质子化，因此无法通过MS检测器来直接检测。当样品不能直接进样分析时，为了满足分析方法的要求，通常会选择柱前衍生的方法，将其转化为容易质子化的化合物或具有强紫外吸收的化合物，从而提高环氧化合物的检测灵敏度。
[0003]阿替洛尔环氧化物是具有警示结构的致突变杂质，在阿替洛尔中的限度仅为7.5ppm，如果用高效液相色谱法(HPLC)测定时难以达到其灵敏度，若用气相色谱法直接测定阿替洛尔环氧化物含量，会因为阿替洛尔沸点高，难以检测；故本专利技术采用三重四级杆液质联用仪对阿替洛尔环氧化物进行测定。

技术实现思路

[0004]为了解决上述的技术问题，本专利技术提供了一种阿替洛尔中阿替洛尔环氧化物的检测方法，该方法灵敏度高，样品处理简单，能准确测定其含量。
[0005]本专利技术所提供的阿替洛尔中阿替洛尔环氧化物的检测方法，采用三重四级杆液质联用仪对阿替洛尔环氧化物进行测定；所述的阿替洛尔环氧化物在阿替洛尔中的限度为7.5ppm。
[0006]优选的，上述检测方法的质谱参数中，检测离子质荷比(m/z)为208.1/178.1。
[0007]优选的，上述联用仪采用的离子源为ESI源，正离子源模式；IS电压5500V、气帘气35psi、雾化气20psi、辅助气20psi、源温度500℃、碰撞气9psi。
[0008]优选的，该检测方法的色谱条件如下：
[0009](1)色谱柱为Waters Xbridge C18，柱长150mm，内径4.6mm，液膜厚度3.5μm；
[0010](2)流动相：A相：0.08～0.15％甲酸水溶液，B相：乙腈；
[0011](3)流速0.45～0.55ml/min，柱温39～45℃；
[0012](4)进样量20μl。
[0013]优选的，上述(2)中，A相为0.1％甲酸水溶液。
[0014]优选的，上述(3)中，流速0.5ml/min，柱温40℃。
[0015]优选的，上述检测方法的质谱参数中，DP为80～93、EP为10、CE为12～22、CXP为14。
[0016]优选的，质谱参数中，DP为84、EP为10、CE为14、CXP为14。
[0017]优选的，检测时所用溶液的配制方法如下：
[0018](1)对照品贮备液：取阿替洛尔环氧化物对照品，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中含阿替洛尔环氧化物100μg的溶液；精密量取1ml，置100ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，量取1ml，置100ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；
[0019](2)对照品溶液：量取对照品贮备液1ml，置10ml量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀，即得；
[0020](3)阿替洛尔原料药供试品溶液：取阿替洛尔原料药26mg，称定，置20ml量瓶中，加溶剂溶解并稀释至刻度，摇匀，量取1ml，置10ml量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀，即得；
[0021](4)阿替洛尔原料药加标供试品溶液：取阿替洛尔原料药26mg，称定，置20ml量瓶中，加溶剂溶解并稀释至刻度，摇匀，量取1ml，置10ml量瓶中，加入对照品贮备液1ml，用溶剂稀释至刻度，摇匀，即得；
[0022](5)线性系列溶液：量取对照品贮备液0.1ml、0.3ml、0.5ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml，分置10ml量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀，即得；
[0023](6)定量限、检定量限溶液：
[0024]定量限溶液：量取对照品贮备液0.1ml，置10ml量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀，即得；
[0025]检测量溶液：量取定量限溶液5ml，置10ml量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀，即得；
[0026]其中，上述所述溶剂为45～50％甲醇水，由水与甲醇按体积比45～50：50～65配制获得。
[0027]本专利技术的有益效果在于：
[0028](1)本专利技术色谱和质谱条件下的空白溶剂和供试品溶液不干扰阿替洛尔环氧化物检测，方法的灵敏度满足检测要求；
[0029](2)阿替洛尔环氧化物在0.09548ng/ml～1.910ng/ml范围内，相当于阿替洛尔环氧化物限度浓度百分比10％～200％范围，峰面积与浓度呈现良好的线性关系；
[0030](3)阿替洛尔环氧化物定量限为0.0019ng，相当于供试品浓度的0.000073％(0.73ppm)，相当于限度浓度的9.79％；最低检测限为0.0010ng，相当于供试品浓度的0.000037％(0.37ppm)，相当于限度浓度的4.90％；定量限重复测定6次RSD为7.36％，小于中国药典指导原则及GMP定的限度15％，符合验证要求；
[0031](4)本专利技术阿替洛尔环氧化物在室温条件下放置9h，对照品溶液与加标供试品溶液稳定；且阿替洛尔环氧化物回收率为99.26
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108.01％，符合中国药典及GMP标准，本方法测定准确度符合验证要求。
附图说明
[0032]为了更清楚地说明本专利技术实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍。
[0033]图1是优化6的空白溶剂图谱；
[0034]图2是优化6的阿替洛尔环氧化物对照品溶液图谱；
[0035]图3是优化6的供试品溶液图谱；
[0036]图4是优化6的加标供试品溶液图谱；
[0037]图5是优化6的阿替洛尔环氧化物线性图谱；
[0038]图6是不同质谱参数下阿替洛尔环氧化物的图谱，(a
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f依次对应优化1中6个质荷比(m/z)的图谱)；
[0039]图7是优化1下的对照品溶液图谱(左图)和优化1下的供试品溶液图谱(右图)；
[0040]图8是优化2下的对照品溶液图谱(左图)和优化2下的供试品溶液图谱(右图)。
具体实施方式
[0041]为了能使本领域技术人员更好的理解本专利技术，现结合具体实施方式对本专利技术进行更进一步的阐述。以下实施例仅用于说明本专利技术而非用于限制本专利技术的范围。
[0042]实施例1
[0043本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.阿替洛尔中阿替洛尔环氧化物的检测方法，其特征在于，采用三重四级杆液质联用仪对阿替洛尔环氧化物进行测定；其中，联用仪色谱梯度洗脱程序如下表所示：时间(min)流速(ml/min)A相(％)B相(％)00.5901030.5604070.51090110.5109011.10.59010170.59010。2.如权利要求1所述的一种检测方法，其特征在于，质谱参数中，检测离子质荷比为208.1/178.1。3.如权利要求1所述的一种检测方法，其特征在于，所述联用仪采用的离子源为ESI源，正离子源模式；IS电压5500V、气帘气35psi、雾化气20psi、辅助气20psi、源温度500℃、碰撞气9psi。4.如权利要求1所述的一种检测方法，其特征在于，色谱条件如下：(1)色谱柱为Waters Xbridge C18，柱长150mm，内径4.6mm，液膜厚度3.5μm；(2)流动相：A相：0.08～0.15％甲酸水溶液，B相：乙腈；(3)流速0.45～0.55ml/min，柱温39～45℃；(4)进样量20μl。5.如权利要求4所述的一种检测方法，其特征在于，(2)中，A相为0.1％甲酸水溶液。6.如权利要求4所述的一种检测方法，其特征在于，(3)中，流速0.5ml/min，柱温40℃。7.如权利要求1所述的一种检测方法，其特征在于，质谱参数中，DP为80～93、EP为10、CE为12～22、CXP为14。8.如权利要求1所述的一种检测方法，其特征在于，质谱参数中，DP为8...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘永红，秦京艳，贾右刚，齐冬，王敏敏，
申请(专利权)人：济南同路医药科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：