用于提高灵敏度的诱导聚集测定制造技术

本文提供了用于快速和准确地测量分析物颗粒结合诱导的报告颗粒聚集的系统、设备和方法。在存在感兴趣的分析物颗粒的情况下，报告颗粒形成聚集体，其平均颗粒大小随着分析物浓度的增加而增加。根据对从样品帧中确定的平均颗粒大小的分析，可以确定分析物的存在和/或浓度。浓度。浓度。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于提高灵敏度的诱导聚集测定
[0001]本申请要求2020年4月9日提交的美国临时申请号63/007,701的优先权权益，其披露内容特此通过引用并入，就像完整地写在本文中一样。
[0002]定点照护诊断和可在实地执行的其他测定是一项迫切的需要。如果可以消除将测定(如诊断测试、特别是血液测试)送到专用实验室以进行分析所带来的延迟和费用，则可以更高效且有效地做出响应。临床实验室通过在精密台式仪器上执行生化测定来提供诊断测试。用于使这些仪器小型化或在移动电子设备上复现其功能的工作是充满困难的。在许多情况下，结果是无法使用的。
[0003]例如，需要的是为医生及其患者提供迅速且准确的结果的廉价但准确的定点照护测定，如诊断测试。

技术实现思路

[0004]本文提供了用于通过测定结合事件来快速和准确地测量分析物颗粒的系统、设备和方法。传感器设备包含一种或多种报告颗粒，这些颗粒包括大分子或纳米级成分，如纳米颗粒。报告颗粒(或可替代地“报告基因”)产生足够大的光学信号，因此可以对单个报告颗粒进行成像，并作为可单独检测的对象出现在样品帧中。在存在感兴趣的分析物(本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于确定样品中分析物颗粒的存在或浓度的方法，该方法包括以下步骤：将该样品与一定数量的一种或多种类型的报告颗粒组合在检测器体积中；记录该检测器体积的一个或多个帧；在该一个或多个帧中，识别与报告颗粒的聚集体相对应、以及可选地与单个未聚集的报告颗粒相对应的颗粒的图像；确定一个或多个对象特性；以及根据该对象特性，确定该分析物颗粒的存在和/或浓度；其中：该分析物颗粒的存在诱导聚集体的形成，每个聚集体包含至少两个报告颗粒和至少一个分析物颗粒。2.如权利要求1所述的方法，其中这些颗粒图像对应于报告颗粒的聚集体和单个未聚集的报告颗粒。3.如权利要求1所述的方法，其中这些颗粒图像对应于报告颗粒的聚集体。4.如权利要求1和2中任一项所述的方法，其中该一个或多个帧中的每一个都由像素阵列组成。5.如权利要求1
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4中任一项所述的方法，其中聚集体的形成是由该报告颗粒上的结合位点与该分析物颗粒上的结合位点之间的结合引起的。6.如权利要求5所述的方法，其中该报告颗粒包含两个或更多个结合位点。7.如权利要求6所述的方法，其中该报告颗粒包含两个或更多个相同的结合位点。8.如权利要求6所述的方法，其中该报告颗粒包含两个或更多个不同的结合位点。9.如权利要求6
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8中任一项所述的方法，其中该分析物颗粒包含两个或更多个结合位点。10.如权利要求6
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8中任一项所述的方法，其中该分析物颗粒包含两个或更多个相同的结合位点。11.如权利要求6
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8中任一项所述的方法，其中该分析物颗粒包含两个或更多个不同的结合位点。12.如权利要求1
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11中任一项所述的方法，其中该对象特性随平均聚集体大小而单调增加。13.如权利要求12所述的方法，其中该对象特性与平均聚集体大小成比例地增加。14.如权利要求1
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11中任一项所述的方法，其中该平均聚集体大小可以通过校准曲线根据该对象特性来确定。15.如权利要求14所述的方法，进一步包括获得校准曲线的步骤。16.如权利要求1
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15中任一项所述的方法，其中该报告颗粒提供光学信号。17.如权利要求16所述的方法，其中该光学信号选自UV/Vis吸光度、荧光发射和磷光发射。18.如权利要求16和17中任一项所述的方法，其中该光学信号在报告颗粒与分析物颗粒结合后基本上没有变化。19.如权利要求1
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18中任一项所述的方法，进一步包括去除背景特征的步骤。20.如权利要求19所述的方法，进一步包括去除大于给定大小最大值的背景特征的步
骤。21.如权利要求19和20中任一项所述的方法，进一步包括去除小于给定大小最小值的背景特征的步骤。22.如权利要求19
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21中任一项所述的方法，进一步包括以下步骤：腐蚀图像；重建图像；以及膨胀图像。23.如权利要求19
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22中任一项所述的方法，进一步包括在该检测器体积的一个或多个帧中形成边界的一个或多个步骤。24.如权利要求1
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23中任一项所述的方法，其中该报告颗粒包括纳米颗粒或量子点。25.如权利要求24所述的方法，其中该报告颗粒包括纳米颗粒。26.如权利要求25所述的方法，其中该纳米颗粒是用一个或多个结合位点官能化的金纳米颗粒(“GNP”)。27.如权利要求24
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26中任一项所述的方法，其中该光学信号是由表面等离激元共振(“SPR”)引起的。28.如权利要求27所述的方法，其中该表面等离激元共振是局域表面等离激元共振。29.如权利要求1
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28中任一项所述的方法，其中该一定数量的报告颗粒中存在的一种或多种类型的报告颗粒中的每一种都包含一种或多种相同类型的结合位点。30.如权利要求29所述的方法，其中该一种或多种类型的报告颗粒是单一类型的报告颗粒。31.如权利要求30所述的方法，其中：该单一类型的报告颗粒可以同时与两个或更多个分析物颗粒结合；并且该分析物颗粒可以同时与两个或更多个报告颗粒结合。32.如权利要求29所述的方法，其中该一种或多种类型的报告颗粒是两种类型的报告颗粒。33.如权利要求32所述的方法，其中该两种类型的报告颗粒中的每一种包含与另一种类型的报告颗粒不同类型的结合位点。34.如权利要求33所述的方法，其中该两种类型的报告颗粒上的这两种类型的不同结合位点中的每一种与该分析物颗粒上的不同结合位点结合。35.如权利要求34所述的方法，其中：该两种类型的报告颗粒中的每一种可以同时与两个或更多个分析物颗粒结合；并且该分析物颗粒可以同时与该两种类型的报告颗粒中的每一种的一个或多个结合。36.如权利要求35所述的方法，其中该两种类型的不同结合位点中的每一种都位于该两种类型的报告颗粒中的每一种所包含的抗体或纳米抗体上。37.如权利要求35所述的方法，其中该两种类型的不同结合位点中的每一种都位于该两种类型的报告颗粒中的每一种所包含的抗体上。38.如权利要求37所述的方法，其中该两种类型的结合颗粒中的每一种上的抗体与另一种类型的结合颗粒上的抗体不同。39.如权利要求1
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38中任一项所述的方法，其中该分析物是抗体。
40.如权利要求39所述的方法，其中该抗体是人类抗体。41.如权利要求40所述的方法，其中该两种类型的不同结合位点中的一种包括抗人抗体。42.如权利要求39
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41中任一项所述的方法，其中该分析物是针对病毒的病毒包膜中生物分子的抗体。43.如权利要求42所述的方法，其中该病毒是冠状病毒。44.如权利要求43所述的方法，其中该冠状病毒是SARS
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CoV
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2。45.如权利要求42
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44中任一项所述的方法，其中该生物分子是该病毒包膜中的蛋白质。46.如权利要求45所述的方法，其中该病毒包膜中的蛋白质选自膜蛋白、包膜蛋白和刺突蛋白。47.如权利要求46所述的方法，其中该病毒包膜中的蛋白质是刺突蛋白。48.如权利要求47所述的方法，其中该两种类型的不同结合位点中的至少一种包括刺突蛋白受体结合结构域(刺突RBD)。49.如权利要求1
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35中任一项所述的方法，其中该分析物是血液...

【专利技术属性】
技术研发人员：J，
申请(专利权)人：伊利蒂卡有限公司，
类型：发明
国别省市：