【技术实现步骤摘要】
一种猪流行性腹泻病毒和致病大肠杆菌的培养方法
[0001]本专利技术涉及一种猪流行性腹泻病毒和致病大肠杆菌的培养方法，属于病毒和细菌培养
技术介绍
[0002]猪流行性腹泻病毒严重影响了我国的养猪业，其感染性强、危害性大，是影响全球养猪业的最重要病毒之一，哺乳仔猪感染后死亡率高，母猪常以带毒而不表现症状形式出现，猪流行性腹泻病毒属于冠状病毒科冠状病毒属的一群，传染性胃肠炎，猫冠状病毒、犬冠状病毒与其属于同一冠状病毒属；
[0003]猪大肠杆菌病是由病原性大肠杆菌引起的仔猪肠道传染性疾病，以发生肠炎、肠毒血症为特征；
[0004]猪流行性腹泻病毒和猪大肠杆菌病都是引起猪类腹泻的重要原因，因此也常将猪流行性腹泻病毒和猪大肠杆菌病一起研究，研究过程中需要对猪流行性腹泻病毒和猪大肠杆菌病进行培养，传统培养方法虽然可以达到标准，但病毒失活量大，病毒毒价较低，不利于研究；
[0005]例如：中国专利技术专利：CN201911132105.1所公开的“一种提高猪流行性腹泻病毒毒价的培养方法”，其说明书公开...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种猪流行性腹泻病毒和致病大肠杆菌的培养方法，其特征在于，包括：致病大肠杆菌的培养：S1、首先向烧杯中加入一部分水，然后将猪肉膏、蛋白胨以及琼脂加入烧杯中，然后搅拌，搅拌完成之后再用水将杯壁上的物料冲掉，以防蛋白胨等粘附于瓶底，然后再以剩余的水冲洗瓶壁；S2、对烧杯中的物料进行加热，直至物料融化；S3、先对物料进行PH值的检测，检测完成之后将物料分别加入多个培养皿中，然后将多个培养皿中的PH值调整至6.5
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7.5；S4、待培养皿中的物料凝固之后对培养皿进行灭菌处理，然后将培养皿置于保温箱中培养，培养完成之后检查培养皿是否生长繁殖细菌，符合要求即可使用；S5、先向过滤器中加入无菌水清洗过滤器内壁，然后过滤，将滤膜置于培养皿中，然后38℃
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39.5℃密封培养，直至大肠杆菌菌群呈蓝色或蓝绿色；腹泻病毒的培养：S6、用小剪在培养皿内将猪胚胎剪成小块，加Hank氏溶液冲洗，静置后用毛细吸管吸取液体，依同法再洗涤2次，将血球充分洗去；S7、用镊子将组织块放入无菌瓶内，加入胰酶溶液并进行水浴，水浴过程中摇动无菌瓶，由于胰酶的作用可使大量细胞游离，过滤细胞悬液，细胞悬浮液进行低速离心沉淀，吸取上清液，沉淀物加入营养液进行细胞培养；S8、准备多个细胞培养管，每一细胞培养管注入细胞悬液1ml，盖好瓶塞，并将瓶进行摇动，然后将细胞培养管横卧，使细胞均匀平铺于管壁，置38℃
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39.5℃温箱孵育，细胞附着于管壁48小时长成单层，然后接种腹泻病毒。2.根据权利要求1的一种猪流行性腹泻病毒和致病大肠杆菌的培养方法，其特征在于，S1中水为...
【专利技术属性】
技术研发人员：邢刚，谢楠，谢建勇，郝伟伟，汪媛，申建青，胥燕芳，
申请(专利权)人：华派生物工程集团有限公司，
类型：发明
国别省市：
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