本发明专利技术公开了一株副干酪乳杆菌，命名为副干酪乳杆菌菌株Lacticaseibacillus paracasei TYM202，保藏号为GDMCC NO:62627。本发明专利技术将筛选所得的Lacticaseibacillus paracase TYM202能有效的抑制致病菌大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的生长，TYM202直接原位敷于伤口表面，其生长过程中产生的代谢物如乳酸、细菌素等可促进皮肤伤口愈合，此外，该菌还可能通过调节伤口微环境的菌群结构来促进伤口愈合；进一步的本发明专利技术副干酪乳杆菌TYM202的发酵培养基为MRS，该培养基成分便宜易得，生产成本低，可大规模应用于皮肤伤口愈合。合。合。
【技术实现步骤摘要】
一株副干酪乳杆菌及其应用
[0001]本专利技术涉及微生物
，特别涉及一株副干酪乳杆菌及其应用。
技术介绍
[0002]伤口愈合是人体最复杂的过程之一，益生菌广泛存在于皮肤中，在治疗细菌感染、缓和病原体引起的微生物失调和炎症、调节免疫系统和促进组织修复等方面都是有效的，并作为益生菌疗法在生物医学领域受到越来越多的关注。研究发现，鼠李糖乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、枯草芽孢杆菌等可以通过释放有机酸、细菌素、酶等抗菌剂来有效地防止病原菌的黏附和生物膜的形成；此外，它们还可以通过减少促炎因子的产生来调节炎症反应。可见，益生菌疗法在伤口治疗中的应用前景十分广泛。
[0003]副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)属于乳杆菌属中的干酪乳杆菌群，广泛存在于奶酪、泡菜等发酵食品。副干酪乳杆菌能促进机体微生物菌群和酶的平衡以及刺激特异性和非特异性的免疫机制，同时其分泌的副干酪乳杆菌素是一种抗菌小分子热稳定肽，对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都有明显的抑制作用。
[0004]皮肤上除了常见的病原菌，还存在益生菌。益生菌在维持宿主机体稳态，激活免疫系统、维持机体免疫平衡等方面具有重要作用。副干酪乳杆菌具有干酪乳杆菌属调节肠道和增强免疫力等益生功能，代谢产生的细菌素具有优良的抑菌性能。因此，在食品、医疗保健等领域发挥重要作用。现有技术中，副干酪乳杆菌在皮肤疾病中的应用局限于抑制皮肤致病菌的生长，改善痤疮、皮藓等皮肤炎症反应，鲜有报道副干酪乳杆菌在皮肤伤口愈合中的应用。此外，现有技术中采用的多为副干酪乳杆菌发酵的无菌上清液，采用发酵无菌上清液增加具体使用的难度和成本，因此，目前亟需一种成本低、效果较好，实际更容易制备的方法。
技术实现思路
[0005]本专利技术针对上述技术问题，提供一株从陕西西安自然发酵太阳菌菌种中筛选到的副干酪乳杆菌菌株Lacticaseibacillus paracasei TYM202，对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等常见致病菌的生长有一定抑制作用，且对皮肤伤口愈合有良好的促进作用。
[0006]为实现上述目的，本专利技术提供的技术方案如下：
[0007]一株副干酪乳杆菌，命名为副干酪乳杆菌菌株Lacticaseibacillus paracasei TYM202，于2022年7月18日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏地址为广州市先烈中路100号大院9号楼5楼，保藏号为GDMCC NO:62627，所述副干酪乳杆菌16SrDNA基因序列如SEQ ID NO.1所示。
[0008]如上所述副干酪乳杆菌在制备抑制常见皮肤病原菌的药物中的应用，所述的皮肤病原菌包括大肠杆菌、金黄色葡萄球菌或沙门氏菌。
[0009]如上所述副干酪乳杆菌在制备促进伤口愈合的药物中的应用。
[0010]如上所述副干酪乳杆菌发酵后的菌液在制备促进伤口愈合的药物中的应用。
[0011]作为优选，所述发酵后的菌液为将活化的副干酪乳杆菌TYM202菌液以5％(v/v)的接种量接种至MRS液体培养基，于37℃培养箱培养16h，离心，用无菌生理盐水调整菌液浓度为1
×
107CFU/mL，即得TYM202发酵后的菌液。
[0012]与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：
[0013]本专利技术将筛选所得的Lacticaseibacillus paracase TYM202能有效的抑制致病菌大肠杆菌(E.coli)、金黄色葡萄球菌(S.aureus)和沙门氏菌(Salmonella)的生长，Lacticaseibacillus paracase TYM202直接原位敷于伤口表面，其生长过程中产生的代谢物如乳酸、细菌素等可促进皮肤伤口愈合，此外，该菌还可能通过调节伤口微环境的菌群结构来促进伤口愈合；进一步的本专利技术副干酪乳杆菌Lacticaseibacillus paracase TYM202的发酵培养基为MRS，该培养基成分便宜易得，因此Lacticaseibacillus paracase TYM202生产成本低，可大规模应用于皮肤伤口愈合。
[0014]保藏信息
[0015]副干酪乳杆菌菌株Lacticaseibacillus paracasei TYM202于2022年7月18日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏号为GDMCC NO:62627。
附图说明
[0016]图1是本专利技术副干酪乳杆菌形态学特征；其中图1左图为Lacticaseibacillus paracasei TYM202在MRS固体培养基上的菌落形态，图1右图为革兰氏染色。
[0017]图2是本专利技术副干酪乳杆菌TYM202的发酵菌液(S22)和发酵无菌上清液(SW22)对三种常见致病菌的抑菌圈。
[0018]图3(a)是不同处理在不同时间大鼠伤口情况图，图3(b)为不同处理在不同时间的愈合率。
[0019]图4为处理11天后各组伤口HE染色图；其中，a为对照组；b为J22组；c为SW22组；d为S22组。
具体实施方式
[0020]下面结合各附图以及具体实施方式进行详细描述，但应当理解本专利技术的保护范围并不受具体实施方式的限制。实施例中采用的原料、试剂若无特殊说明，皆为市售所得。
[0021]实施例中使用的各培养基组成：
[0022]1L MRS固体培养基的组成是：蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母粉10g，吐温80 1mL，磷酸氢二钾2g，乙酸钠5g，柠檬酸三铵2g，硫酸镁0.2g，硫酸锰0.05g，葡萄糖10g，琼脂15g。
[0023]1L MRS液体培养基的组成是：蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母粉10g，吐温80 1mL，磷酸氢二钾2g，乙酸钠5g，柠檬酸三铵2g，硫酸镁0.2g，硫酸锰0.05g，葡萄糖10g。
[0024]1L BIH液体培养基的组成是：蛋白胨10g，脱水小牛脑浸粉12.5mg，脱水牛新浸粉5g，氯化钠5g，葡萄糖2g，磷酸氢二钠2.5g。
[0025]LB培养基市售所得。
[0026]实施例1
[0027]菌株的分离与鉴定
[0028](1)样品采集：样品为陕西西安自然发酵太阳菌菌种，以无菌密封袋密封置于
‑
20
℃冰箱保存；
[0029](2)稀释涂布：采用无菌磷酸盐缓冲溶液溶解并稀释成1
×
10
‑6、1
×
10
‑7、1
×
10
‑8、1
×
10
‑9梯度浓度，将稀释液分别涂布于MRS固体培养基上，于37℃下培养48h；
[0030](3)分离单菌落：分别挑取步骤(2)固体培养基上形态不同的菌落在MRS固体培养基上进行划线，于37℃下培养48h，此过程重复三次以上直至培养出纯菌落；
[0031](4)菌落形态观察与革兰氏染色：挑取纯菌落于MRS液体培养基中，在37℃下培养15h；在MRS本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一株副干酪乳杆菌，其特征在于：所述副干酪乳杆菌命名为副干酪乳杆菌菌株Lacticaseibacillus paracasei TYM202，保藏号为GDMCC NO:62627。2.如权利要求1所述副干酪乳杆菌在制备抑制常见皮肤病原菌的药物中的应用，其特征在于：所述的皮肤病原菌包括大肠杆菌、金黄色葡萄球菌或沙门氏菌。3.一株如权利要求1所述副干酪乳杆菌在...
【专利技术属性】
技术研发人员：高洁，徐鸿涛，方芳，施华，
申请(专利权)人：广西大学，
类型：发明
国别省市：
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