一种表柔比星复方制剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种表柔比星复方制剂，包括表柔比星或其可溶性盐，咪喹莫特或其可溶性盐，pH调节剂，以及冻干保护剂。本发明专利技术的复方制剂有助于保护表柔比星或其可溶性盐在混合物中的长期稳定性，同时，混合制剂在膀胱灌注肿瘤治疗中，具有较好的肿瘤抑制效果，能够引起更强烈的抗肿瘤免疫反应。更强烈的抗肿瘤免疫反应。更强烈的抗肿瘤免疫反应。

【技术实现步骤摘要】
一种表柔比星复方制剂及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及医药
，尤其涉及表柔比星复方制剂，以及制备方法和在膀胱疾病中的应用。

技术介绍

[0002]临床上常见的膀胱癌主要有两种，非肌层浸润膀胱癌(non
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muscle invasive bladder cancer,NMIBC)和肌层浸润膀胱癌(muscle invasive bladder cancer,MIBC)。其中，经尿道膀胱肿瘤切除术(TURBT)辅以灌注药物治疗是非肌层浸润膀胱癌的一线标准治疗方案。有研究表明，非肌层浸润膀胱癌患者在接受TURBT膀胱肿瘤切除手术后，5年内有50％～70％的复发概率。膀胱灌注是在TURBT手术切除肿瘤后通过将化疗药物等肿瘤治疗制剂注入膀胱内部，直接杀伤肿瘤细胞或诱导体内非特异性免疫反应，达到抑制膀胱癌转移复发的效果。但是目前临床上膀胱灌注治疗的绝对缓解率低、肿瘤复发率较高，并且毒副作用大，病人预后差。
[0003]蒽环类药物对多种移行上皮细胞癌具有较高的易感性，表柔比星是第三代蒽环类半合成化合物，能够直接嵌入DNA碱基对之间，干扰转录过程，阻止mRNA的形成而起到抗肿瘤作用。目前，以表柔比星、吡柔比星为代表的蒽环类化疗药物是膀胱癌灌注治疗的一线治疗药物。但是，对于高危非肌层浸润膀胱癌患者，在施用表柔比星或吡柔比星进行膀胱灌注治疗后，肿瘤依然具有很高的一年内复发率(超过50％)。

技术实现思路

[0004]申请人尝试将化疗药物表柔比星与咪喹莫特直接混合后用于膀胱癌的灌注治疗。结果发现，当化疗药物表柔比星与咪喹莫特的浓度比例在一个合适的范围之间时，可以获得与单独化疗药物灌注相比显著提高的治疗效果，且不增加毒副作用，有望成为一种具有显著临床价值的膀胱灌注新型药物制剂。进一步研究表明，这一新型制剂抗肿瘤机理，主要是通过表柔比星等化疗药物诱导肿瘤细胞的免疫原性细胞死亡暴露肿瘤抗原，同时咪喹莫特作为TLR7激动剂可以激活免疫系统，招募抗原呈递细胞到肿瘤内来识别肿瘤抗原，进而激活针对肿瘤的T细胞免疫反应。
[0005]但是，我们在进一步地制剂研究中发现，化疗药物如表柔比星与免疫佐剂咪喹莫特的简单混合制剂中，咪喹莫特分子的存在会导致表柔比星等化疗药物分子结构的不稳定，不论是以注射液的溶液形态保存、还是以混合后冻干粉的形态保存，该制剂中杂质的含量都会明显增加，并在很短时间内突破药典规定的药物的杂质限度，无法成为可以稳定保存便于临床应用的药物制剂，二者的简单混合不利于药物分子的化学稳定性。因此，如何提高表柔比星与咪喹莫特复方制剂的化学稳定性，是设计制备二者联合用药的复方制剂的关键问题。
[0006]为了解决上述问题，我们对各种条件下表柔比星与咪喹莫特复方制剂的稳定性进行了系统研究。我们发现表柔比星与咪喹莫特在溶液中低pH值(如pH＝3.0)条件下更为稳
定(远远优于pH 4.0的条件)，但仍然会逐渐降解导致制剂无法长期储存，因此注射液剂型对于本制剂不可行。对于冻干粉制剂而言，我们发现乳糖对该制剂的稳定性具有显著的保护效果，同时乳糖的含量增加会有利于制剂稳定性的提升。尽管如此，在pH 3.0的条件下制得的冻干制剂依然无法长期保存，无法通过稳定性加速实验的考察。出乎意料的是，我们发现这一复方冻干制剂有一个稳定性的“pH黄金区间”，在这个pH范围内制备得到的表柔比星/咪喹莫特复方制剂具有非常好的稳定性。该现象与人们对表柔比星单一制剂溶液状态的稳定性趋势的常规理解以及我们对该复方制剂溶液状态稳定性考察结果相反。
[0007]通过进一步深入分析表柔比星的杂质谱图和化学结构，我们发现表柔比星与咪喹莫特的复方体系在水溶液和冻干制剂状态下的降解机理是不同的。首先，盐酸表柔比星不论在注射液还是冻干粉状态下都是稳定的，目前上市的表柔比星制剂存在注射液和冻干粉两种剂型。但对于复方制剂而言，在溶液相，咪喹莫特的存在会导致表柔比星一个未知单杂组分的快速上升，这个反应的速率随pH的升高而升高，在pH 3.0这一低pH值下，该反应依然会缓慢发生(注：更低的pH值的药液虽然对稳定性有利，但是会在使用时对膀胱造成很大的刺激和损害)。
[0008]在冻干的固态下，咪喹莫特的存在则会导致表柔比星杂质A(脱去糖环结构的降解产物)的快速上升，其原因猜测是咪喹莫特分子结构中芳香环上氮原子的孤对电子作为亲核基团进攻表柔比星的糖苷键，导致该化学键的断裂和降解杂质A的产生。通过加入乳糖作为冻干保护剂，可以一定程度上阻隔表柔比星分子和咪喹莫特分子的直接接触，从而减缓这一反应的发生。同时，这一反应从现象来看是酸催化加速的反应(低pH下糖苷键上氧原子的质子化是反应的中间步骤)，因此pH的升高会显著减缓杂质A的产生。另一方面，我们发现过高的pH则会导致咪喹莫特分子溶解性的下降(pH 5.0以上咪喹莫特从溶液中析出)，同时过高的pH还会导致表柔比星另外一个未知杂质(推断为表柔比星的氧化产物)的增加。综上，表柔比星与咪喹莫特的复方制剂在一个合适的pH区间、合适含量的辅料(乳糖)存在下，可以获得一个可以稳定保存的剂型。
[0009]此外，我们还发现加入在本制剂中加入粘膜促渗剂，可以增强药物溶液灌注治疗后在膀胱粘膜中的渗透和滞留，有助于进一步提升本制剂的疗效。
[0010]本专利技术提供一种表柔比星和咪喹莫特混合冻干粉制剂。在大量实验分析中发现，冻干粉剂型相较于传统的注射剂型，更有助于保护表柔比星在混合物中的长期化学稳定性，同时，混合制剂在膀胱灌注肿瘤治疗中，具有较好的肿瘤抑制效果，能够引起更强烈的抗肿瘤免疫反应。
[0011]本专利技术提出了一种表柔比星复方制剂，包括表柔比星或其可溶性盐，咪喹莫特或其可溶性盐，pH调节剂和冻干保护剂。
[0012]进一步地，所述表柔比星复方制剂为冻干粉剂型。
[0013]进一步地，表柔比星或其可溶性盐与咪喹莫特或其可溶性盐的质量比为1:1～1:10。
[0014]进一步可选地，表柔比星或其可溶性盐与咪喹莫特或其可溶性盐的质量比为1:2～1:4。
[0015]进一步地，所述pH调节剂可以是弱碱、氢氧化钠、盐酸。
[0016]进一步可选地，所述pH调节剂是碳酸氢钠、盐酸。
[0017]进一步地，所述冻干保护剂包括蔗糖、乳糖、甘露醇、环糊精。
[0018]进一步地，所述冻干保护剂为乳糖。
[0019]进一步地，所述冻干保护剂在冻干粉制剂中的质量分数为65％～96％。
[0020]进一步可选地，冻干保护剂的质量分数为80％～94％。
[0021]进一步地，所述表柔比星和咪喹莫特混合冻干粉制剂还包括粘膜促渗剂。
[0022]进一步地，所述粘膜促渗剂包括氮酮、透明质酸酶、月桂醇、油酸中的至少一种。
[0023]进一步地，所述粘膜促渗剂可以在制备过程中加入，也可以在使用前混合。
[0024]进一步地，所述表柔比星和咪喹莫特混合制剂冻干前的pH为3.8～5.5。需要说明的是，这里定义复溶浓度的目的是为了定义复本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种表柔比星复方制剂，其特征在于，包括表柔比星或其可溶性盐，咪喹莫特或其可溶性盐和pH调节剂。2.根据权利要求1所述的表柔比星复方制剂，其特征在于，所述表柔比星复方制剂为冻干粉剂型，还包括冻干保护剂。3.根据权利要求2所述的表柔比星复方制剂，其特征在于，所述冻干粉剂型的复溶后表柔比星浓度为1～5mg/mL时的pH为3.8～5.5。4.根据权利要求2所述的表柔比星复方制剂，其特征在于，所述冻干粉剂型的复溶后表柔比星的浓度为1～5mg/mL时的pH为4.0～5.0。5.根据权利要求2所述的表柔比星复方制剂，其特征在于，所述冻干粉剂型在复溶后表柔比星浓度为1～5mg/mL时的pH为4.0～4.2。6.根据权利要求2所述的表柔比星复方制剂，其特征在于，所述冻干粉剂型在复溶后表柔比星浓度为1～5mg/mL时的pH为4.2～4.5。7.根据权利要求2所述的表柔比星复方制剂，其特征在于，所述冻干粉剂型在复溶后表柔比星浓度为1～5mg/mL时的pH为4.5～5.0。8.根据权利要求1或2任意一项所述的表柔比星复方制剂，其特征在于，所述表柔比星或其盐酸盐与咪喹莫特或其可溶性盐的质量比为1:1～1:10。9.根据权利要求1或2任意一项所述的表柔比星复方制剂，其特征在于，所述冻干保护剂包括蔗糖、乳糖、甘露醇、环糊精。10.根据权利要求9所述的表柔比星复方制剂，其特征在于，所述冻干保护剂在冻干粉制剂中的质量分数为65％～96％。11.根据权利要求9所述的表柔比星复方制剂，其特征在于，所述冻干保护剂在冻干粉制剂中的质量分数为80％～94％。12.根据权利要求1或2所述的表柔比星复方制剂，其特征在于，所述表柔比星复方制剂中还包括粘膜促渗剂。13.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘庄，邓中清，陶惠泉，吴宇辰，周炫坊，
申请(专利权)人：苏州百迈生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：