一种识别Tau蛋白N端区域的单克隆抗体及其应用制造技术

本申请涉及免疫学的技术领域，具体公开了一种识别Tau蛋白N端区域的单克隆抗体及其应用，所述识别Tau蛋白N端区域的单克隆抗体包括重链可变区和轻链可变区；所述重链可变区包括SEQ ID No.1所示的CDR1、SEQ ID No.2所示的CDR2和SEQ ID No.3所示的CDR3；所述轻链可变区包括SEQ ID No.4所示的CDR1、SEQ ID No.5所示的CDR2和SEQ ID No.6所示的CDR3。上述识别Tau蛋白N端区域的单克隆抗体具有良好的特异性以及极高的灵敏度，检测限低至50 pg/mL，在相关的研究及检测中具有重要的应用价值。相关的研究及检测中具有重要的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种识别Tau蛋白N端区域的单克隆抗体及其应用


[0001]本申请涉及免疫学的
，更具体地说，涉及一种识别Tau蛋白N端区域的单克隆抗体及其应用。

技术介绍

[0002]微管相关蛋白Tau(microtubule
‑
associated protein
‑
tau，MAPT)又称为Tau蛋白，是神经系统内神经元表达水平最高的蛋白质，对稳定神经元微管系统、调控神经细胞生长发育以及神经传导等功能具有重要作用，是维持神经元生存和功能的必需物质。
[0003]Tau蛋白由位于常染色体12q21.31位点(表示12号染色体长臂2区4带3亚带1次亚带)上的MAPT基因编码生成，该基因含有16个外显子，基因组DNA跨度约159kb。在人脑内，外显子2和3的选择性剪切产生3种异构体，分别引入0、1或2个29氨基酸片段的插入(0N、1N和2N)；3种异构体的每一种均含有外显子10编码的3次重复(3R)或4次重复(4R)的微管结合域，由此构成6种异构体。在0N、1N和2 N Tau中，3 R和4 R Tau异构体的数量大致相等。
[0004]另外，Tau蛋白主要存在2种结构性单倍型(hapo
‑
types)，分别为H1单倍型和H2单倍型，是由编码基因位点内900kb的转换(H1)多态性或非转换(H2)多态性形成；而H1单倍型及其基因型(H1/H1)是4R
‑
Tau蛋白异常沉积的遗传性危险因素。
[0005]阿尔茨海默症是一种进行性发展的神经系统退行性疾病，以出现淀粉样斑块、神经元纤维缠结(neurofibrillary tangles，NFTs)和脑神经元丧失为特征。过度磷酸化、异常糖基化和泛素化的Tau蛋白丧失了其正常的生理功能，从而缠结形成NFTs。因此，可以通过对Tau蛋白进行检测及定位，进而实现对NFTs的监测。
[0006]目前，市面上的大部分抗Tau蛋白抗体均是通过完整Tau蛋白作为免疫原制备得到的，抗Tau蛋白抗体结合完整Tau蛋白的抗原决定簇较难确定。并且，由于Tau蛋白具有6种异构体，针对某一种Tau蛋白异构体制备得到的抗Tau蛋白抗体的适用性较差，检测结果的准确性也较差。若要实现对样本的准确检测，往往需要多种Tau蛋白异构体的抗Tau蛋白抗体的结合使用，提升了检测的成本。

技术实现思路

[0007]为了对Tau蛋白进行高特异性、高灵敏度、高准确性检测，本申请提供一种识别Tau蛋白N端区域的单克隆抗体及其应用。
[0008]本申请提供的识别Tau蛋白N端区域的单克隆抗体能够准确识别Tau蛋白的N端区域，对6种Tau蛋白异构体均可有效检出。在具有与商品化Tau蛋白抗体相近的准确性与特异性的基础上，本申请提供的识别Tau蛋白N端区域的单克隆抗体还具有更高的灵敏度和更低的检测限，且无明显的翻译后修饰，在Tau蛋白的研究及检测中具有重要的应用价值。
[0009]第一方面，本申请提供一种识别Tau蛋白N端区域的单克隆抗体，采用如下技术方案：
[0010]一种识别Tau蛋白N端区域的单克隆抗体，所述识别Tau蛋白N端区域的单克隆抗体
包括重链可变区和轻链可变区；
[0011]所述重链可变区包括SEQ ID No.1所示的CDR1、SEQ ID No.2所示的CDR2和SEQ ID No.3所示的CDR3；
[0012]所述轻链可变区包括SEQ ID No.4所示的CDR1、SEQ ID No.5所示的CDR2和SEQ ID No.6所示的CDR3。
[0013]本申请中，上述的CDR为互补决定区(complementarity
‑
determining regions，CDR)，位于抗体的可变区内，可以与抗原决定簇互补结合。CDR均为环状结构，重链CDR与轻链CDR相互配合，共同形成与抗原决定簇的三维结构互补的表面。抗体CDR的氨基酸序列决定了抗体与抗原结合的特异性以及亲和性。具备本申请上述CDR序列的抗体可以与Tau蛋白的N端区域特异性结合，对Tau蛋白的异构体均可以进行有效检测，灵敏度高，结合能力强。
[0014]优选地，所述重链可变区包括SEQ ID No.7所示的氨基酸序列。
[0015]优选地，所述轻链可变区包括SEQ ID No.8所示的氨基酸序列。
[0016]优选地，所述识别Tau蛋白N端区域的单克隆抗体还包括重链恒定区和轻链恒定区。
[0017]优选地，所述重链恒定区包括SEQ ID No.9所示的氨基酸序列。
[0018]优选地，所述轻链恒定区包括SEQ ID No.10所示的氨基酸序列。
[0019]优选地，所述识别Tau蛋白N端区域的单克隆抗体的重链包括SEQ ID No.11所示的氨基酸序列。
[0020]优选地，所述识别Tau蛋白N端区域的单克隆抗体的轻链包括SEQ ID No.12所示的氨基酸序列。
[0021]第二方面，本申请提供一种核酸分子，采用如下技术方案：
[0022]一种核酸分子，所述核酸分子编码第一方面所述的识别Tau蛋白N端区域的单克隆抗体。
[0023]第三方面，本申请提供一种重组载体，采用如下技术方案：
[0024]一种重组载体，所述重组载体表达第一方面所述的识别Tau蛋白N端区域的单克隆抗体。
[0025]优选地，所述重组载体中含有至少一个拷贝的第二方面所述的核酸分子。
[0026]第四方面，本申请提供一种重组细胞，采用如下技术方案：
[0027]一种重组细胞，所述重组细胞表达第一方面所述的识别Tau蛋白N端区域的单克隆抗体。
[0028]优选地，所述重组细胞中含有至少一个拷贝的第三方面所述的重组载体。
[0029]第五方面，本申请提供一种上述的识别Tau蛋白N端区域的单克隆抗体的制备方法，采用如下技术方案：
[0030]一种识别Tau蛋白N端区域的单克隆抗体的制备方法，所述识别Tau蛋白N端区域的单克隆抗体的制备方法包括：
[0031]构建重组载体，将所述重组载体导入细胞中，蛋白表达后进行纯化，得到所述识别Tau蛋白N端区域的单克隆抗体。
[0032]第六方面，本申请提供第一方面所述的识别Tau蛋白N端区域的单克隆抗体和/或第四方面所述的重组细胞在制备Tau蛋白检测产品中的应用。
[0033]第七方面，本申请提供一种Tau蛋白检测试剂盒，采用如下技术方案：
[0034]一种Tau蛋白检测试剂盒，所述Tau蛋白检测试剂盒包括第一方面所述的识别Tau蛋白N端区域的单克隆抗体。
[0035]本申请中，使用上述Tau蛋白检测试剂盒可以对Tau蛋白进行高灵敏度、高特异性检测，具有更为广泛的应用场景。
[0036]综上所述，本申请具有以下有益效果：
[0037]1.本申请中的识别Tau蛋白N端区域的单克隆抗体能够特异性识别Tau蛋白的N端区本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种识别Tau蛋白N端区域的单克隆抗体，其特征在于，所述识别Tau蛋白N端区域的单克隆抗体包括重链可变区和轻链可变区；所述重链可变区包括SEQ ID No.1所示的CDR1、SEQ ID No.2所示的CDR2和SEQ ID No.3所示的CDR3；所述轻链可变区包括SEQ ID No.4所示的CDR1、SEQ ID No.5所示的CDR2和SEQ ID No.6所示的CDR3。2.根据权利要求1所述的识别Tau蛋白N端区域的单克隆抗体，其特征在于，所述重链可变区包括SEQ ID No.7所示的氨基酸序列；优选地，所述轻链可变区包括SEQ ID No.8所示的氨基酸序列。3.根据权利要求1所述的识别Tau蛋白N端区域的单克隆抗体，其特征在于，所述识别Tau蛋白N端区域的单克隆抗体还包括重链恒定区和轻链恒定区；优选地，所述重链恒定区包括SEQ ID No.9所示的氨基酸序列；优选地，所述轻链恒定区包括SEQ ID No.10所示的氨基酸序列。4.根据权利要求1~3任一项所述的识别Tau蛋白N端区域的单克隆抗体，其特征在于，所述识别Tau蛋白N端区域的单克隆抗体的重链包括SEQ ID No.11所示的氨基酸序列；优选地，所述识别Tau蛋白...

【专利技术属性】
技术研发人员：董晓宁，周志伟，伍波，尹美移，沈晨光，蒋宇珊，吴智广，李超辉，朱瀛，
申请(专利权)人：天津鸿宇泰生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：