一种重组酪氨酸酶突变体及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种重组酪氨酸酶突变体及其应用，属于生物工程领域。本发明专利技术通过分子生物学手段从巨大芽孢杆菌基因组中获得酪氨酸酶BM Tyr，将重组酪氨酸酶BM Tyr的第218位、第215位、第209位的氨基酸中的一个或多个进行突变得到重组酪氨酸酶突变体。本发明专利技术重组酪氨酸酶BM Tyr突变体氧化表儿茶素没食子酸酯活性，相对于重组酪氨酸酶BM Tyr提高了1.14～6.26倍，且重组酪氨酸酶BM Tyr突变体表现出较高的表儿茶素没食子酸酯活性。采用本发明专利技术的方法，提高了单位催化剂的生产能力和催化剂的反应效率，降低了反应的成本，加快了酶转化法生产茶黄素

【技术实现步骤摘要】
一种重组酪氨酸酶突变体及其应用


[0001]本专利技术涉及一种重组酪氨酸酶突变体及其应用，属于生物工程


技术介绍

[0002]茶黄素(Theaflavins，TFs)最早是在1957年由Roberts E.A.H从红茶中分离发现，是一类由多酚类物质氧化缩合而成的、能溶于乙酸乙酯呈橙黄色、并具有苯并卓酚酮结构的化合物的总称。目前已发现并进行结构鉴定的TFs有近30种，其中的主要成分有:茶黄素(theaflavin,TF)、茶黄素
‑3‑
单没食子酸酯(theaflavin
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gallate,TF
‑3‑
G)、茶黄素
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3'
‑
单没食子酸酯(theaflavin
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3'
‑
gallate,TF
‑
3'
‑
G)和茶黄素
‑
3,3
’‑
双没食子酸酯(theaflavin
‑
3,3'
‑
gallate,TF...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种重组酪氨酸酶BM Tyr突变体，其特征在于，所述突变体是将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的酪氨酸酶BM Tyr的第218位、第215位、第209位的氨基酸中的一个或多个进行突变得到。2.如权利要求1所述的重组酪氨酸酶BM Tyr突变体，其特征在于，所述突变体为以下(a)～(f)任一：(a)所述突变体是将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的酪氨酸酶BM Tyr的第218位的缬氨酸突变为天冬酰胺得到的，突变体命名为V218N；(b)所述突变体是将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的酪氨酸酶BM Tyr的第215位的甲硫氨酸突变为谷氨酸得到的，突变体命名为M215E；(c)所述突变体是将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的酪氨酸酶BM Tyr的第209位的精氨酸突变为丝氨酸得到的，突变体命名为R209S；(d)所述突变体是将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的酪氨酸酶BM Tyr的第218位的缬氨酸突变为天冬酰胺，同时将215位的甲硫氨酸突变为谷氨酸得到的，突变体命名为V218N/M215E；(e)所述突变体是将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的酪氨酸酶BM Tyr的第218位的缬氨酸突变为天冬酰胺，同时将209位的精氨酸突变为丝氨酸得到的，突变体命名为V218N/R209S；(f)所述突变体是将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的酪氨酸酶BM Tyr的第218位的缬氨酸突变为天冬酰胺，第215位的甲硫氨酸突变为谷氨酸，同时将209位的精氨酸突变为丝氨酸得到的，突变体命名为V218N/M215E/R209S。3.编码权利要求1或2...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘立明，黄盈，宋伟，刘佳，
申请(专利权)人：安徽科技学院，
类型：发明
国别省市：