一种间充质干细胞的冻存液及冻存方法技术

本发明专利技术公开了一种间充质干细胞的冻存液及冻存方法，所述冻存液的配方包括；成人血清、DMSO和1640培养液，所述成人血清的体积含量比为70％，所述DMSO的体积含量比为10％，所述1640培养液的体积含量比为20％，所述冻存液在与间充质干细胞进行冻存时需要加入体积含量比为20％的成人血清。本发明专利技术通过冻存液的配方是由成人血清、DMSO和1640培养液混合配置而成，且成人血清、DMSO和1640培养液的体积含量比分别为70％、10％和20％，同时通过冻存液在与充质干细胞进行冻存是加入体积含量比为20％的成人血清，可以避免细胞在冻存时，可以尽可能降低细胞内的晶体形成，减少细胞内水凝固所形成的高浓度溶质对细胞造成的低温损伤，从提高细胞复苏时的存活率。从提高细胞复苏时的存活率。从提高细胞复苏时的存活率。

【技术实现步骤摘要】
一种间充质干细胞的冻存液及冻存方法


[0001]本专利技术涉及间充质干细胞冻存
，具体为一种间充质干细胞的冻存液及冻存方法。

技术介绍

[0002]间充质干细胞(MSC，mesenchymalstemcells)是干细胞家族的重要成员，来源于发育早期的中胚层，属于多能干细胞，MSC最初在骨髓中发现，因其具有多向分化潜能、造血支持和促进干细胞植入、免疫调控和自我复制等特点而日益受到人们的关注，如间充质干细胞在体内或体外特定的诱导条件下，可分化为脂肪、骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、肝、心肌、内皮等多种组织细胞4点；
[0003]间充质干细胞在体外经过连续传代培养和冻存复苏后仍具有多向分化潜能，可作为理想的种子细胞用于衰老和病变引起的组织器官损伤修复。因此，研究一种有效的细胞冻存方法，使具有临床应用价值的MSC能在体外长期保存并维持原有的多向分化能力，显得尤为重要；
[0004]MSC的冻存需要将处于对数生长期的细胞收集起来，用含有特定成分的细胞冻存液制成单细胞悬液，分装于冻存管中后置于超低温冰箱或者液氮中进行长期冻存，在细本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种间充质干细胞的冻存液及冻存方法，其特征在于：所述冻存液的配方包括；成人血清、DMSO和1640培养液，所述成人血清的体积含量比为70％，所述DMSO的体积含量比为10％，所述1640培养液的体积含量比为20％。2.根据权利要求1所述的一种间充质干细胞的冻存液及冻存方法，其特征在于：所述冻存液在与间充质干细胞进行冻存时需要加入体积含量比为20％的成人血清。3.根据权利要求1所述的一种间充质干细胞的冻存液及冻存方法，其特征在于：包括如下步骤；S1、取出1瓶接种间充质干细胞100万左右，37℃、5％CO2培养3天左右，细胞长至80％融合度以上，即可以准备消化冻存。S2、所述间充质干细胞需要加入10
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20ml常温的PBS，轻柔晃动培养瓶，使PBS缓缓冲洗细胞层，并弃去培养液。S3、所述间充质干细胞加入6ml胰蛋白酶消化液，然后晃动培养瓶，使胰蛋白酶覆盖在干细胞层上。S4、所述间充质干细胞加入6ml胰蛋白酶终止液，混匀。S5、所述收集瓶中的细胞，用PBS清洗一次，并收到50ml离心管中，混匀取样计细胞数，300g并离心10min。S6、所述按照瓶中的细胞密度，加入冻存液混匀，并加入到专用细胞冻存管中。S7、所述用...

【专利技术属性】
技术研发人员：庄强，黄志健，
申请(专利权)人：广州亿维生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：