治疗肌营养不良的组合物和方法技术

本文公开了多核酸分子、药物组合物和用于治疗肌营养不良(DM1)的方法。治疗肌营养不良(DM1)的方法。治疗肌营养不良(DM1)的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】治疗肌营养不良的组合物和方法
交叉引用
[0001]本申请要求2020年3月27日提交的第63/001,211号美国临时申请的权益，该申请以引用的方式全部并入本文。

技术介绍

[0002]通过RNA诱导的基因沉默进行的基因抑制提供了几种控制水平：转录失活、小干扰RNA(siRNA)诱导的mRNA降解和siRNA诱导的转录弱化。在一些情况下，RNA干扰(RNAi)对多细胞分裂提供持久的影响。因此，RNAi代表了可用于药物靶标验证、基因功能分析、途径分析和疾病治疗的可行方法。援引并入
[0003]本说明书中提到的所有出版物、专利和专利申请均通过引用并入本文，其程度就如同每个单独的出版物、专利或专利申请被明确地并单独地指出通过引用的方式并入一样。

技术实现思路

[0004]在某些实施方案中，本文公开了用于调节与肌营养不良相关的基因(例如，DM1)的多核酸分子和药物组合物。在一些实施方案中，本文还描述了用本文公开的多核酸分子或多核酸分子缀合物治疗肌萎缩的方法。
[0005]在某些实施方案中，本文公开了一种多核酸分子缀合物，包含与多核酸分子缀合的抗转铁蛋白受体抗体或其抗原结合片段，所述多核酸分子与DMPK的靶序列杂交。所述多核酸分子具有有义链与反义链，所述有义链具有与SEQ ID NO:1具有至少80％同一性的序列，所述反义链具有与SEQ ID NO:2具有至少80％同一性的序列。所述多核酸分子缀合物介导针对DMPK的RNA干扰。
[0006]在一些实施方案中，所述抗转铁蛋白受体抗体或其抗原结合片段包含可变重链(VH)区和可变轻链(VL)区，其中所述VH区包含包括SEQ ID NO:17的HCDR1序列；HCDR2序列EINPIX1GRSNYAX2KFQG，其中X1选自N或Q且X2选自Q或E；和包括SEQ ID NO:19的HCDR3序列。在一些实施方案中，所述VH区包含包括SEQ ID NO:17的HCDR1序列、包括SEQ ID NO:18、SEQ ID NO:20、SEQ ID NO:21中的一个的HCDR2序列和包括SEQ ID NO:19的HCDR3序列。在一些实施方案中，所述VL区包含LCDR1序列RTSENIYX3NLA、LCDR2序列AX4TNLAX5和LCDR3序列QHFWGTPLTX6，其中X3选自N或S，X4选自A或G，X5选自D或E且X6存在或不存在，如果存在，则为F。在一些实施方案中，所述VL区包含包括SEQ ID NO:22的LCDR1序列、LCDR2序列AATNLAX5和LCDR3序列QHFWGTPLTX6，其中X5选自D或E且X6存在或不存在，如果存在，则为F。在一些实施方案中，所述VL区包含包括SEQ ID NO:22或SEQ ID NO:27的LCDR1序列、包括SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:25或SEQ ID NO:28的LCDR2序列、和包括SEQ ID NO:24或SEQ ID NO:26的LCDR3序列。在一些实施方案中，所述VH区包含包括SEQ ID NO:17的HCDR1序列、包括SEQ ID NO:18的HCDR2序列和包括SEQ ID NO:19的HCDR3序列；并且所述VL区包含包括SEQ ID NO:
22的LCDR1序列、包括SEQ ID NO:23的LCDR2序列和包括SEQ ID NO:24的LCDR3序列。在一些实施方案中，所述VH区包含包括SEQ ID NO:17的HCDR1序列、包括SEQ ID NO:20的HCDR2序列和包括SEQ ID NO:19的HCDR3序列；并且所述VL区包含包括SEQ ID NO:22的LCDR1序列、包括SEQ ID NO:23的LCDR2序列和包括SEQ ID NO:24的LCDR3序列。在一些实施方案中，所述VH区包含包括SEQ ID NO:17的HCDR1序列、包括SEQ ID NO:21的HCDR2序列和包括SEQ ID NO:19的HCDR3序列；并且所述VL区包含包括SEQ ID NO:22的LCDR1序列、包括SEQ ID NO:25的LCDR2序列和包括SEQ IDNO:26的LCDR3序列。在一些实施方案中，所述VH区包含包括SEQ ID NO:17的HCDR1序列、包括SEQ ID NO:20的HCDR2序列和包括SEQ ID NO:19的HCDR3序列；并且所述VL区包含包括SEQ ID NO:27的LCDR1序列、包括SEQ ID NO:28的LCDR2序列和包括SEQ ID NO:26的LCDR3序列。在一些实施方案中，所述VH区与选自SEQ ID NO:29
‑
33的序列具有至少80％、85％、90％、95％、99％或100％的序列同一性。在一些实施方案中，所述VL区与选自SEQ ID NO:34
‑
38的序列具有至少80％、85％、90％、95％、99％或100％的序列同一性。在一些实施方案中，所述VH区与SEQ ID NO:30具有至少80％、85％、90％、95％、99％或100％的序列同一性，并且其中所述VL区与SEQ ID NO:34具有至少80％、85％、90％、95％、99％或100％的序列同一性。
[0007]在一些实施方案中，所述抗转铁蛋白受体抗体包括人源化抗体或其抗原结合片段，或嵌合抗体或其抗原结合片段，或多特异性抗体或其抗原结合片段。在一些实施方案中，所述抗转铁蛋白受体抗体包括IgG
‑
scFv、纳米抗体、BiTE、双抗体、DART、TandAb、scDiabody、scDiabody
‑
CH3、三抗体、微型抗体、微抗体、TriBi微抗体、scFv
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CH3KIH、Fab
‑
scFv
‑
Fc KIH、Fab
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scFv、scFv
‑
CH
‑
CL
‑
scFv、F(ab
’
)2、F(ab
’
)2
‑
scFv2、scFv
‑
KIH、Fab
‑
scFv
‑
Fc、四价HCAb、scDiabody
‑
Fc、diabody
‑
Fc、串联scFv
‑
Fc或胞内抗体。在一些实施方案中，所述抗转铁蛋白受体抗体包含IgG1框架。可替代地，在一些实施方案中，所述抗转铁蛋白受体抗体包含IgG2框架。在某些情况下，IgG2框架为IgG2b框架。可替代地，在一些实施方案中，所述抗转铁蛋白受体抗体包含IgG4框架。
[0008]在一些实施方案中，所述抗转铁蛋白受体抗体进一步包含在Fc区中的至少一个突变。在一些实施方案中，所述至少一个突变调节效应子功能，或减弱或消除Fc
‑
γ受体结合。在一些实施方案中，所述至少一个突变位于残基位置D265、N297、K322、L328或P329处，其中所述残基位置参考Ig本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】NO:29
‑
33的序列具有至少80％、85％、90％、95％、99％或100％的序列同一性。12.如权利要求2
‑
11中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述VL区与选自SEQ ID NO:34
‑
38的序列具有至少80％、85％、90％、95％、99％或100％的序列同一性。13.如权利要求2
‑
12中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述VH区与SEQ ID NO:30具有至少80％、85％、90％、95％、99％或100％的序列同一性，并且其中所述VL区与SEQ ID NO:34具有至少80％、85％、90％、95％、99％或100％的序列同一性。14.如权利要求1
‑
13中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述抗转铁蛋白受体抗体包括人源化抗体或其抗原结合片段，或者嵌合抗体或其抗原结合片段，或者多特异性抗体或其抗原结合片段。15.如权利要求1
‑
14中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述抗转铁蛋白受体抗体包括IgG
‑
scFv、纳米抗体、BiTE、双抗体、DART、TandAb、scDiabody、scDiabody
‑
CH3、三抗体、微型抗体、微抗体、TriBi微抗体、scFv
‑
CH3 KIH、Fab
‑
scFv
‑
Fc KIH、Fab
‑
scFv、scFv
‑
CH
‑
CL
‑
scFv、F(ab
’
)2、F(ab
’
)2
‑
scFv2、scFv
‑
KIH、Fab
‑
scFv
‑
Fc、四价HCAb、scDiabody
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Fc、diabody
‑
Fc、串联scFv
‑
Fc或胞内抗体。16.如权利要求1
‑
15中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述抗转铁蛋白受体抗体包含IgG1框架。17.如权利要求1
‑
15中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述抗转铁蛋白受体抗体包含IgG2框架。18.如权利要求17所述的多核酸分子缀合物，其中所述IgG2框架为IgG2b框架。19.如权利要求1
‑
15中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述抗转铁蛋白受体抗体包含IgG4框架。20.如权利要求1
‑
19中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述抗转铁蛋白受体抗体进一步包含在所述Fc区中的至少一个突变。21.如权利要求1
‑
20中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述至少一个突变调节效应子功能。22.如权利要求20
‑
21中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述至少一个突变减弱或消除Fc
‑
γ受体结合。23.如权利要求20
‑
22中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述至少一个突变位于残基位置D265、N297、K322、L328或P329处，其中所述残基位置参考IgG1。24.如权利要求20
‑
23中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述Fc区包含两个或更多个、三个或更多个或四个或更多个突变。25.如权利要求20
‑
24中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述Fc区包含L233和L234处的突变，其中所述残基对应于SEQ IDNO:39的第233和234位。26.如权利要求20
‑
25中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述Fc区包含D265和N297处的突变。27.如权利要求1
‑
26中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述抗转铁蛋白受体抗体包含选自SEQ ID NO:39
‑
62的重链(HC)序列和选自SEQ ID NO:63
‑
66的轻链(LC)序列。28.如权利要求1
‑
27中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述抗转铁蛋白受体抗体与人转铁蛋白受体(TfR)特异性结合。
29.如权利要求1
‑
28中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述有义链和所述反义链各自独立地包含至少一个2
’
修饰的核苷酸、至少一个修饰的核苷酸间连接或至少一个反向无碱基部分。30.如权利要求1
‑
29中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述有义链在5
’
端包含2
’‑
O
‑
甲基修饰的核苷酸。31.如权利要求1
‑
30中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述有义链在5
’
端包含至少两个连续的2
’‑
O
‑
甲基修饰的核苷酸。32.如权利要求1
‑
31中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述有义链在5
’
端包含至少三个、四个、五个或六个连续的2
’‑
O
‑
甲基修饰的核苷酸。33.如权利要求1
‑
32中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述有义链在5
’
端包含六个连续的2
’‑
O
‑
甲基修饰的核苷酸。34.如权利要求1
‑
33中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述有义链包含至少一个2
’‑
F修饰的核苷酸。35.如权利要求1
‑
33中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述有义链包含至少两个、至少三个2
’‑
F修饰的核苷酸。36.如权利要求1
‑
33中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述有义链包含至少两个、至少三个连续的2
’‑
F修饰的核苷酸。37.如权利要求1
‑
36中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述有义链在3
’
端包含2
’‑
O
‑
甲基修饰的核苷酸。38.如权利要求1
‑
37中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述有义链在3
’
端包含至少两个连续的2
’‑
O
‑
甲基修饰的核苷酸。39.如权利要求1
‑
38中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述有义链在3
’
端包含至少三个、四个、五个、六个、七个、八个、九个或十个连续的2
’‑
O
‑
甲基修饰的核苷酸。40.如权利要求1
‑
39中任一项所述多核酸分子缀合物，其中所述有义链在3
’
端包含十个连续的2
’‑
O
‑
甲基修饰的核苷酸。41.如权利要求1
‑
40中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述有义链包含至少两个硫代磷酸酯核苷酸间连接。42.如权利要求1
‑
41中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述有义链具有SEQ ID NO:3、5、7、9、11、13或15的序列。43.如权利要求1
‑
42中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述反义链在5
’
端包含2
’‑
O
‑
甲基修饰的核苷酸。44.如权利要求1
‑
43中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述反义链在3
’
端包含2
’‑
O
‑
甲基修饰的核苷酸。45.如权利要求1
‑
44中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述反义链在3
’
端包含至少两个、至少三个、至少四个、至少五个连续的2
’‑
O
‑
甲基修饰的核苷酸。46.如权利要求1
‑
45中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述反义链在3
’
端包含五个连续的2
’‑
O
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甲基修饰的核苷酸。47.如权利要求1
‑
46中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述反义链包含至少一个、至少两个、至少三个、至少四个2
’‑
F修饰的核苷酸。
48.如权利要求1
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47中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述反义链包含四个2
’‑
F修饰的核苷酸，其中所述四个2
’‑
F修饰的核苷酸中的任意两个都不是连续的。49.如权利要求1
‑
48中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述反义链在3
’
端包含两个突出端核苷酸。50.如权利要求1
‑
49中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述反义链包含至少两个、至少三个硫代磷酸酯核苷酸间连接。51.如权利要求1
‑
50中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述反义链具有SEQ ID NO:4、6、8、10、12、14或16的序列。52.如权利要求1
‑
51中任一项所述的多核酸分子缀合物，其中所述多核酸分子缀合...

【专利技术属性】
技术研发人员：文卡塔，
申请(专利权)人：艾维迪提生物科学公司，
类型：发明
国别省市：