抗炎剂及具有抗炎作用的细胞外囊泡的制造方法技术

本发明专利技术的课题在于提供一种由治疗效果高的细胞外囊泡的群体构成的治疗用制剂、尤其抗炎剂。本发明专利技术涉及一种抗炎剂以及具有抗炎作用的细胞外囊泡的制造方法，所述抗炎剂将通过利用对磷脂酰丝氨酸具有亲和性的物质的方法从来源于间充质干细胞的细胞外囊泡获得的细胞外囊泡作为有效成分，所述具有抗炎作用的细胞外囊泡的制造方法包括通过使用对磷脂酰丝氨酸具有亲和性的物质的方法从间充质干细胞来源的细胞外囊泡获得细胞外囊泡的工序。源的细胞外囊泡获得细胞外囊泡的工序。源的细胞外囊泡获得细胞外囊泡的工序。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗炎剂及具有抗炎作用的细胞外囊泡的制造方法


[0001]本专利技术涉及一种使用了间充质干细胞来源细胞外囊泡的抗炎剂。

技术介绍

[0002]认为来源于细胞的作为由脂质二重膜构成的小型膜囊泡的细胞外囊泡(Extracellular vesicle)担负经由内含的mRNA或microRNA等核酸或者蛋白质的搬运进行的细胞间信息传递(非专利文献1)。
[0003]并且，间充质干细胞(Mesenchymal stem cell，以下有时简称为“MSC”)为来源于中胚层组织的成体干细胞。MSC能够从脂肪、骨髓及脐带基质等中分离，但认为均具有粘接性、CD105、CD73、CD90阳性、CD45、CD34、CD14、CD11b、CD79a、CD19、HLA
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Class II(DR)阴性、分化成骨、脂肪、软骨的能力等共同点。
[0004]近年来，启示了细胞外囊泡与各种疾病有关的可能性。并且，报告了通过超离心法从来源于间充质干细胞的细胞外囊泡获取的细胞外囊泡具有抗炎作用(抗炎效果)(非专利文献2)。
[0005]现有技术文献
[0006]专利文献
[0007]专利文献1：国际公开WO2016/088689
[0008]非专利文献
[0009]非专利文献1：Mathieu M,Martin
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Jaular L,Lavieu G,Thery C(2019)Specificities of secretion and uptake of exosomes and other extracellular vesicles for cell
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to
‑
cell communication.Nat Cell Biol,21(1)：9
‑
17
[0010]非专利文献2：SC Lo et al.(2017)Mesenchymal Stem Cell
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Derived Extracellular Vesicles as Mediators of Anti
‑
Inflammatory Effects：Endorsement of Macrophage Polarization.Stem Cells Transl Med,6(3)：1018
‑
1028

技术实现思路

[0011]专利技术要解决的技术课题
[0012]然而，本专利技术人对通过超离心法从来源于间充质干细胞的细胞外囊泡获取的细胞外囊泡的抗炎作用进行了验证的结果，得知该作用较弱，且不足以进行产业利用。鉴于所述情况，本专利技术的课题在于提供一种由治疗效果更高的细胞外囊泡的群体构成的治疗用制剂、尤其抗炎剂。
[0013]用于解决技术课题的手段
[0014]本专利技术人等为了解决上述课题，对通过各种细胞外囊泡的获取方法选择性回收的细胞外囊泡进行深入研究的结果，发现通过利用了对磷脂酰丝氨酸(PS)具有亲和性的物质的方法(PS亲和法)获取的具有PS阳性等特点的细胞外囊泡的群体作为抗炎剂具有高效果，从而完成了本专利技术。
[0015]即本专利技术中，其基本方式为如下：
[0016](1)一种抗炎剂，其将通过利用对磷脂酰丝氨酸具有亲和性的物质的方法从来源于间充质干细胞的细胞外囊泡获得的细胞外囊泡作为有效成分；
[0017](2)根据上述(1)所述的抗炎剂，其中，所述间充质干细胞为来源于iPS细胞的细胞、或者来源于选自包含脐带、脐带血、骨髓、脂肪、肌肉、神经、皮肤、羊膜及胎盘的组中的1种以上的组织的细胞；
[0018](3)根据上述(1)或(2)所述的抗炎剂，其中，对磷脂酰丝氨酸具有亲和性的物质为Tim蛋白质；
[0019](4)根据上述(3)所述的抗炎剂，其中，Tim蛋白质为选自Tim4蛋白质、Tim3蛋白质及Tim1蛋白质的蛋白质。
[0020]并且本专利技术也是这种抗炎剂的制造方法，具体而言如下：
[0021](5)一种具有抗炎作用的细胞外囊泡的制造方法，其包括：通过使用对磷脂酰丝氨酸具有亲和性的物质的方法从间充质干细胞来源的细胞外囊泡获得细胞外囊泡的工序；
[0022](6)根据上述(5)所述的细胞外囊泡的制造方法，其中，对磷脂酰丝氨酸具有亲和性的物质为Tim蛋白质；
[0023](7)根据上述(6)所述的细胞外囊泡的制造方法，其中，Tim蛋白质为选自Tim4蛋白质、Tim3蛋白质及Tim1蛋白质的蛋白质。
[0024]专利技术效果
[0025]根据本专利技术，提供一种将来自间充质干细胞的具有抗炎作用的细胞外囊泡作为有效成分的抗炎剂。本专利技术所提供的抗炎剂由于例如抑制肿瘤坏死因子(TNF
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α)、白细胞介素
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6(IL
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6)等炎性细胞因子的过度的产生，或者抑制TGFβ1等抗炎性细胞因子的产生下降，因此能够成为对由这些细胞因子的产生量变化引起的类风湿性关节炎、溃疡性结肠炎等慢性炎症、克罗恩病、甚至2型糖尿病、抑郁症、肥胖症、败血症、动脉粥样硬化症、皮炎、痴呆症、精神分裂症、帕金森病等各种疾病有效的治疗药。
附图说明
[0026]图1是表示通过NTA法(纳米粒子追踪分析法)分析了通过PS亲和法及超离心法(超离心分离法)所获取的MSC来源细胞外囊泡的粒径分布的结果的图。
[0027]图2是表示通过蛋白质印迹法检测了通过PS亲和法及超离心法所获取的MSC来源细胞外囊泡的CD9、CD63及CD81的结果的图。
[0028]图3是表示定量PCR中所使用的引物的图。
[0029]图4是表示以TNFα的mRNA显现量为指标评价了骨髓MSC来源细胞外囊泡的抗炎作用的结果的图。
[0030]图5是表示以IL
‑
6的mRNA显现量为指标评价了骨髓MSC来源细胞外囊泡的抗炎作用的结果的图。
[0031]图6是表示以TGFβ1的mRNA显现量为指标评价了骨髓MSC来源细胞外囊泡的抗炎作用的结果的图。
[0032]图7是表示以TNFα的mRNA显现量为指标评价了脐带MSC来源细胞外囊泡及脂肪MSC来源细胞外囊泡的抗炎作用的结果的图。
[0033]图8是表示以IL
‑
6的mRNA显现量为指标评价了脐带MSC来源细胞外囊泡及脂肪MSC来源细胞外囊泡的抗炎作用的结果的图。
[0034]图9是表示以TGFβ1的mRNA显现量为指标评价了脐带MSC来源细胞外囊泡及脂肪MSC来源细胞外囊泡的抗炎作用的结果的图。
具体实施方式
[0035]如上所述，本专利技术的基本为将通过利用对磷脂酰丝氨酸具有亲和性的物质的方法从来源于间充质干细胞的细胞外囊泡获得的细胞外囊泡作为有效成分的抗炎剂。
[0036]细胞外囊泡(以下，有时简称为“EV”)为来源于细胞的由脂质二重膜构成的小型膜囊泡。该细胞外囊泡中，通常可举本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种抗炎剂，其将通过利用对磷脂酰丝氨酸具有亲和性的物质的方法从来源于间充质干细胞的细胞外囊泡获得的细胞外囊泡作为有效成分。2.根据权利要求1所述的抗炎剂，其中，所述间充质干细胞为来源于iPS细胞的细胞、或者来源于选自由脐带、脐带血、骨髓、脂肪、肌肉、神经、皮肤、羊膜及胎盘组成的组中的1种以上的组织的细胞。3.根据权利要求1所述的抗炎剂，其中，对磷脂酰丝氨酸具有亲和性的物质为Tim蛋白质。4.根据权利要求3所述的抗炎剂，其中，Tim蛋白质为选...

【专利技术属性】
技术研发人员：石止贵将，山根昌之，
申请(专利权)人：富士胶片株式会社，
类型：发明
国别省市：