一种测定甘露消毒丸GC指纹图谱的方法及其应用技术

本发明专利技术提供一种测定甘露消毒丸GC指纹图谱的方法。本发明专利技术还提供了上述测定甘露消毒丸GC指纹图谱方法在甘露消毒丸中成分的质量检测中的用途及其质量检测方法。本发明专利技术进一步提供了上述甘露消毒丸中5种成分含量的测定方法。本发明专利技术更进一步提供了一种甘露消毒丸中多味药材气相指纹图谱的筛选方法。本发明专利技术提供的一种测定甘露消毒丸GC指纹图谱的方法及其应用，建立了甘露消毒丸的气相指纹图谱，能够对甘露消毒丸中5个化学成分进行了定量分析，并对甘露消毒丸中各单味药材色谱峰进行了归属确证，能够从原料源头进行有效监测，严格控制原药材的质量，可用于生产过程的质量控制，从而保证临床用药的安全有效性。而保证临床用药的安全有效性。

【技术实现步骤摘要】
一种测定甘露消毒丸GC指纹图谱的方法及其应用


[0001]本专利技术属于中药成分检测的
，涉及一种测定甘露消毒丸GC指纹图谱的方法及其应用。

技术介绍

[0002]甘露消毒丸由11味药组成，分别为藿香、连翘、川贝母、茵陈、射干、豆蔻、木通、黄芩、滑石、石菖蒲和薄荷，为芳香化湿，清热解毒用药，收载于2020版《中华人民共和国药典》一部，临床用于暑湿蕴结，身热肢痠(suan)，胸闷腹胀，尿赤黄疸。临床研究发现甘露消毒丹对流感、流行性腮腺炎、非典型肺炎、呼吸道病毒感染、手足口病等传染病具有良好的治疗作用，实验也证明了其具有广谱抗病毒作用，对流感病毒、柯萨奇病毒、水痘
‑
带状疱疹病毒等均具有一定疗效，亦发现其对COVID
‑
19安全有效。
[0003]由于甘露消毒丸处方药材多，化学成分复杂，仅靠对单一化合物进行鉴别或含测，无法全面反映甘露消毒丸的物质基础和化学成分群的整体性和复杂性，难以全面控制甘露消毒丸的内在质量。中药指纹图谱具有整体、宏观、模糊分析等特点，可通过对中药整体特征的描述，采用适当模糊处理方式，达到整体质量控制的目的，因此成为中药质量控制的有效手段。其中色谱指纹图谱分析可以使中药所含多种化学组分的整体特征可视化，从而披露出常规检验难以发现的质量问题。指纹图谱是根据中药多组分、多靶点的整体综合作用的特点，从“全成分”的角度出发的一种现代重要质量控制方法，对非单一成分药物的质量控制更加全面。
[0004]甘露消毒丸含有大量的挥发性成分，目前缺乏系统的定性研究，因此有必要建立甘露消毒丸GC指纹图谱，能够完成对甘露消毒丸中挥发性成分的定性分析，以便有效全面的控制甘露消毒丸质量。

技术实现思路

[0005]鉴于以上所述现有技术的缺点，本专利技术的目的在于提供一种测定甘露消毒丸GC指纹图谱的方法及其应用，采用优化条件的前处理及气相色谱方法，建立了甘露消毒丸的气相指纹图谱，从不同侧面突出反映不同类别化学成分对甘露消毒丸气相指纹图谱的系统贡献，较全面的反映甘露消毒丸中各成分的现状，并对甘露消毒丸中多种特定指标成分进行检测，为整体控制和评价甘露消毒丸质量提供参考依据。
[0006]为实现上述目的及其他相关目的，本专利技术第一方面提供一种测定甘露消毒丸GC指纹图谱的方法，包括以下步骤：
[0007]1)供试品的制备：将甘露消毒丸样品进行顶空进样，获得供试品；
[0008]2)对照品溶液的制备：将α
‑
蒎烯、桉油精、芳樟醇、薄荷脑、白秋李醇对照品中的至少一种，加入溶剂溶解并定容，配成对照品溶液；
[0009]3)测定：采用相同色谱条件的气相色谱(GC)法分别测定供试品和对照品溶液，将获得的供试品的气相指纹图谱与对照品溶液的气相指纹图谱进行比较，对供试品的气相指
纹图谱中的指标成分进行归属定位，从而获得甘露消毒丸的气相指纹图谱。
[0010]优选地，步骤1)中，所述甘露消毒丸样品为将甘露消毒丸生药粉碎后过筛，获得的甘露消毒丸粉末。
[0011]优选地，步骤1)中，所述顶空进样中，进样量为0.01
‑
0.5g，优选为0.05
‑
0.2g，更优选为0.1g。
[0012]优选地，步骤1)中，所述顶空进样中，加热箱温度为100
‑
150℃，优选为120
‑
140℃，更优选为130℃。
[0013]优选地，步骤1)中，所述顶空进样中，定量环温度为120
‑
150℃，优选为130
‑
140℃，更优选为135℃。
[0014]优选地，步骤1)中，所述顶空进样中，传输线温度为130
‑
150℃，优选为135
‑
145℃，更优选为140℃。
[0015]优选地，步骤1)中，所述顶空进样中，顶空平衡时间为10
‑
20min，优选为12
‑
18min，更优选为15min。
[0016]优选地，步骤2)中，所述α
‑
蒎烯的CAS号为80
‑
56
‑
8，所述桉油精的CAS号为470
‑
82
‑
6，所述芳樟醇的CAS号为78
‑
70
‑
6，所述薄荷脑的CAS号为89
‑
78
‑
1，所述白秋李醇的CAS号为5986
‑
55
‑
0。
[0017]优选地，步骤2)中，所述溶剂为无水乙醇。
[0018]优选地，步骤3)中，所述供试品的气相指纹图谱与对照品溶液的气相指纹图谱进行比较，是根据对照品溶液的气相指纹图谱中的已知特征峰，通过相对保留时间，指认出供试品的气相指纹图谱中的相应特征峰，从而对供试品的气相指纹图谱中的指标成分进行归属定位。
[0019]优选地，步骤3)中，所述气相色谱法中采用的色谱柱为Agilent HP
‑
5色谱柱(30m
×
0.25mm，0.25μm)。
[0020]优选地，步骤3)中，所述气相色谱法中采用的检测器为火焰离子化检测器(FID)。
[0021]优选地，步骤3)中，所述气相色谱法中，采用的升温程序为：初始温度为58
‑
62℃，以0.8
‑
1.2℃/min的速率升温至68
‑
72℃；以9
‑
11℃/min的速率升温至93
‑
97℃；以0.8
‑
1.2℃/min的速率升温至99
‑
101℃；以1.8
‑
2.2℃/min的速率升温至109
‑
111℃，保持2
‑
4min；以18
‑
22℃/min的速率升温至134
‑
136℃；以0.8
‑
1.2℃/min的速率升温至139
‑
141℃，保持24
‑
26min；以2.8
‑
3.2℃/min的速率升温至169
‑
171℃，保持1.8
‑
2.2min；以24
‑
26℃/min的速率升温至239
‑
241℃，保持4.8
‑
5.2min。
[0022]更优选地，所述气相色谱法中，采用的升温程序为：初始温度为60℃，以1℃/min的速率升温至70℃；以10℃/min的速率升温至95℃；以1℃/min的速率升温至100℃；以2℃/min的速率升温至110℃，保持3min；以20℃/min的速率升温至135℃；以1℃/min的速率升温至140℃，保持25min；以3℃/min的速率升温至170℃，保持2min；以25℃/min的速率升温至240℃本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种测定甘露消毒丸GC指纹图谱的方法，包括以下步骤：1)供试品的制备：将甘露消毒丸样品进行顶空进样，获得供试品；2)对照品溶液的制备：将α
‑
蒎烯、桉油精、芳樟醇、薄荷脑、白秋李醇对照品中的至少一种，加入溶剂溶解并定容，配成对照品溶液；3)测定：采用相同色谱条件的气相色谱法分别测定供试品和对照品溶液，将获得的供试品的气相指纹图谱与对照品溶液的气相指纹图谱进行比较，对供试品的气相指纹图谱中的指标成分进行归属定位，从而获得甘露消毒丸的气相指纹图谱。2.根据权利要求1所述的测定甘露消毒丸GC指纹图谱的方法，其特征在于，步骤1)或2)中，包括以下条件中任一项或多项：A1)在步骤1)中，所述甘露消毒丸样品为将甘露消毒丸生药粉碎后过筛，获得的甘露消毒丸粉末；A2)在步骤1)中，所述顶空进样的条件为：进样量为0.01
‑
0.5g；加热箱温度为100
‑
150℃；定量环温度为120
‑
150℃；传输线温度为130
‑
150℃；顶空平衡时间为10
‑
20min；A3)在步骤2)中，所述溶剂为无水乙醇。3.根据权利要求1所述的测定甘露消毒丸GC指纹图谱的方法，其特征在于，在步骤3)中，所述气相色谱法的检测条件为：色谱柱为Agilent HP
‑
5色谱柱，30m
×
0.25mm，0.25μm；检测器为火焰离子化检测器；采用的升温程序为：初始温度为58
‑
62℃，以0.8
‑
1.2℃/min的速率升温至68
‑
72℃；以9
‑
11℃/min的速率升温至93
‑
97℃；以0.8
‑
1.2℃/min的速率升温至99
‑
101℃；以1.8
‑
2.2℃/min的速率升温至109
‑
111℃，保持2
‑
4min；以18
‑
22℃/min的速率升温至134
‑
136℃；以0.8
‑
1.2℃/min的速率升温至139
‑
141℃，保持24
‑
26min；以2.8
‑
3.2℃/min的速率升温至169
‑
171℃，保持1.8
‑
2.2min；以24
‑
26℃/min的速率升温至239
‑
241℃，保持4.8
‑
5.2min。4.根据权利要求1所述的测定甘露消毒丸GC指纹图谱的方法，其特征在于，在步骤3)中，所述气相色谱法还包括以下检测条件：样口温度为230
‑
250℃；进样量为0.5
‑
2μL；载气为高纯氦气，载气纯度≥99.999％；载气流速为0.1
‑
1.0mL/min；进样方式为分流进样，分流比为5
‑
15:1。5.根据权利要求1
‑
4任一所述的一种测定甘露消毒丸GC指纹图谱方法在甘露消毒丸中成分的质量检测中的用途。6.一种甘露消毒丸的质量检测方法，包括采用权利要求1
‑
4任一所述的测定甘露消毒丸GC指纹图谱方法获得甘露消毒丸的气相指纹图谱，将得到的甘露消毒丸的气相指纹图谱与相同指纹图谱检测条件下获得的甘露消毒丸的标准气相指纹图谱进行相似度比较。7.根据权利要求6所述的甘露消毒丸的质量检测方法，其特征在于，采用与权利要求1
‑
4任一所述的测定甘露消毒丸GC指纹图谱方法相同的条件得到甘露消毒丸的标准气相指纹图谱，所述甘露消毒丸的标准气相指纹图谱包括20个共有指纹峰，以18号峰为参照峰S峰，相对保留时间为1.000，相对峰面积为1.000；其他19个共有指纹峰的相对保留时间和相对峰面积依次为：1号峰，相对保留时间为0.242
±
0.002，相对峰面积为0.106
±
0.003；2号峰，相对保留时间为0.274
±
0.003，相对峰面积为0.336
±
0.010；3号峰，相对保留时间为0.314
±
0.003，相对峰面积为0.148
±
0.004；
4号峰，相对保留时间为0.318
±
0.003，相对峰面积为2.147
±
0.064；5号峰，相对保留时间为0.348
±
0.003，相对峰面积为0.180
±
0.005；6号峰，相对保留时间为0.375
±
0.004，相对峰面积为0.174
±
0.005；7号峰，相对保留时间为0.377
±
0.004，相对峰面积为0.119
±
0.003；8号峰，相对保留时间为...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈丹萍，张正光，温方方，姜鹏，詹常森，
申请(专利权)人：上海和黄药业有限公司，
类型：发明
国别省市：