本发明专利技术属于医药领域，具体公开了一种Prdx1IgG中和抗体，其主要由IgG与Prdx1蛋白特异性结合后得到。还公开了该Prdx1IgG中和抗体的制备方法和在制备急性器官损伤药物中应用。本发明专利技术利用重组prdx1蛋白免疫哺乳动物，获得血清IgG中和抗体(即Prdx1IgG中和抗体)，其有中和、阻断血清中Prdx1的促炎作用，能够治疗急性器官损伤，例如急性肝损伤、急性肾损伤、急性肺损伤和炎症性肠病活动期损伤。肺损伤和炎症性肠病活动期损伤。肺损伤和炎症性肠病活动期损伤。
【技术实现步骤摘要】
Prdx1 IgG中和抗体及其制备方法和在制备急性器官损伤药物中的应用
[0001]本专利技术属于医药领域，具体涉及Prdx1 IgG中和抗体及其制备方法和在制备急性器官损伤药物中的应用。
技术介绍
[0002]急性肝损伤(Acute Liver Injury,以下简称ALI)是由各种原因引起的肝脏损害，其病情发展迅速。研究表明，外源性物质，如病毒感染、滥用酒精或药物以及接触毒素都可能导致ALI。在我国急性肝损伤的首要病因是病毒感染，其次是药物。由于长期的肝损伤会导致慢性肝脏炎症和纤维化反应，而ALI所引起的坏死后型肝硬化更是不能治愈。这不仅严重影响患者的生活质量，同时也给国家带来了沉重的医疗负担。因此预防急性、慢加急性和/或慢性肝损伤对公共卫生非常重要。对于严重ALI，肝移植是最有效的治疗手段之一，但统计表明接受肝移植治疗的患者不足10％。当前国内外对急性肝衰竭的治疗十分有限，病死率非常高。因此，寻找ALI的替代疗法是一项迫切的医疗需求。
[0003]全球范围内已经开展了大量研究工作以寻找有效的防治ALI的药物，部分在临床使用较长时间，但目前这些药物的治疗效果依然差强人意。
[0004]急性肾损伤(Acute kidney injury，AKI)是一种临床常见的综合征，它的发生常伴随着患者住院时间延长，部分患者预后不良进一步发展为慢性肾脏病。全球每年约1300万人发生AKI(85％的患者生活在发展中国家)，约170万人死于AKI及其并发症。AKI可发生于临床多个学科，特别是在ICU中发病率超过50％。在我国，一项大样本多中心流行病学调查数据显示，按照KDIGO AKI的诊断标准和扩展标准，AKI发生率为0.99％和2.03％，而住院病死率高达12.4％。近年来，无论是高收入国家还是低收入国家，AKI的患病率均呈迅速上升趋势，且病死率居高不下，给国家和社会造成了巨大的经济负担。
[0005]长期以来临床对于AKI始终沿袭对症支持的治疗原则，静待肾脏病变自身的转归，迄今为止尚无一种可以用于在AKI中减轻肾组织损伤或促进肾脏修复或防止后期肾脏慢性纤维化的治疗药物获批上市。
技术实现思路
[0006]本专利技术所要解决的技术问题是，克服以上
技术介绍
中提到的不足和缺陷，提供Prdx1 IgG中和抗体及其制备方法和在制备急性器官损伤药物中的应用，用以解决目前医药领域对于急性肝损伤和急性肾损伤治疗药物的缺失的技术问题。
[0007]为解决上述技术问题，本专利技术提出的技术方案为：
[0008]一种Prdx1 IgG中和抗体，其主要由IgG与Prdx1蛋白特异性结合后得到。
[0009]上述的Prdx1 IgG中和抗体，优选的，所述Prdx1 IgG中和抗体包括Prdx1单克隆中和抗体或Prdx1多克隆中和抗体。
[0010]优选的，所述Prdx1 IgG中和抗体包括兔来源、人来源、小鼠来源、大鼠来源或人鼠
嵌合的Prdx1中和抗体。
[0011]Peroxiredoxin1(Prdx1，Prx1)是一种抗氧化蛋白，属于Peroxiredoxins(Prdxs)超家族。Prdx1是该家族中表达最为广谱、表达丰度最高的成员，被认为是体内最重要的抗氧化酶之一。经过前期的研究发现：Prdx1的中和抗体具有对于急性肝、肾损伤的潜在治疗作用。有望成为一种治疗急性肝、肾损伤的新药，用以解决目前医药领域对于急性肝损伤和急性肾损伤治疗药物的缺失的技术问题。
[0012]基于一个总的专利技术构思，还提供一种Prdx1 IgG中和抗体的制备方法，包括以下步骤：采用重组prdx1蛋白作为免疫原，免疫哺乳动物，获得表达Prdx1 IgG中和抗体的哺乳动物，最后制备和纯化Prdx1 IgG中和抗体。
[0013]上述的制备方法，优选的，具体包括以下步骤：
[0014](1)选取兔作为免疫动物，在制备中和抗体之前进行血清采集；
[0015](2)于第1天采用免疫原，即重组prdx1蛋白0.4
‑
0.6mg，并予以完全弗氏佐剂对免疫动物进行皮下注射免疫原；
[0016](3)于第14天、第35天、第56天采用免疫原，即重组prdx1蛋白0.2
‑
0.3mg，并予以不完全弗氏佐剂对免疫动物进行皮下注射免疫；
[0017](4)于第63天，采集步骤(3)处理后的兔血液，提取血清，使用血清进行ELISA检测是否存在Prdx1 IgG中和抗体；
[0018](5)挑选出血清中表达Prdx1 IgG中和抗体的兔子，于第70天再次使用0.2
‑
0.3mg免疫原并予以不完全弗氏佐剂对免疫动物进行加免；
[0019](6)采集步骤(5)处理后的兔子血清，采用抗原亲和柱纯化抗体，即得到所述的Prdx1IgG中和抗体；并使用ELISA法检测其与Prdx1重组蛋白的亲和力；使用Western Blot法检测Prdx1 IgG中和抗体的特异性。
[0020]基于一个总的专利技术构思，还提供一种Prdx1 IgG中和抗体在制备急性器官损伤药物中应用。
[0021]优选的，所述急性器官损伤包括急性肝损伤、急性肾损伤、急性肺损伤或炎症性肠病活动期损伤。
[0022]更优选的，所述急性肝损伤包括但不限于脂多糖/D
‑
氨基半乳糖胺诱导或对乙酰氨基酚诱导的急性肝损伤；所述脂多糖/D
‑
氨基半乳糖胺诱导的急性肝损伤的主要表现为炎症、氧化应激/细胞坏死和凋亡；所述对乙酰氨基酚诱导的急性肝损伤为以药物或毒物中毒引起的急性肝损伤。
[0023]更优选的，所述急性肾损伤包括但不限于肾缺血再灌注损伤诱导的急性肾损伤。所述肾缺血再灌注损伤诱导的急性肾损伤的主要表现为氧化应激或炎症损伤。
[0024]所述急性肺损伤包括各种原因诱导的急性肺损伤；所述炎性肠病活动期损伤包括各种原因、病因引起的炎性肠病。
[0025]优选的，所述Prdx1 IgG中和抗体治疗急性器官损伤可用于小鼠或其他哺乳动物。
[0026]优选的，所述Prdx1 IgG中和抗体用于治疗急性肝损伤及急性肾损伤时，用于兔、鼠的给药剂量为300ug/只。
[0027]与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：
[0028]1.本专利技术利用重组prdx1蛋白免疫兔，获得血清IgG中和抗体(即Prdx1 IgG中和抗
体)，其有中和、阻断血清中Prdx1的促炎作用，能够治疗急性器官损伤，例如急性肝损伤、急性肾损伤、急性肺损伤和炎症性肠病活动期损伤。
[0029]2.本专利技术制备原材料易得，凡是哺乳类都可以免疫产生Prdx1 IgG中和抗体，提取或重组同源性所有的Prdx1蛋白都属于免疫原。
附图说明
[0030]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本专利技术的一些实施例，对于本本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种Prdx1 IgG中和抗体，其特征在于，其主要由IgG与Prdx1蛋白特异性结合后得到。2.根据权利要求1所述的Prdx1 IgG中和抗体，其特征在于，所述Prdx1 IgG中和抗体包括Prdx1单克隆中和抗体或Prdx1多克隆中和抗体。3.根据权利要求1或2所述的Prdx1 IgG中和抗体，其特征在于，所述Prdx1 IgG中和抗体包括兔来源、人来源、小鼠来源、大鼠来源或人鼠嵌合的Prdx1中和抗体。4.一种如权利要求1
‑
3中任一项所述的Prdx1 IgG中和抗体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：采用重组prdx1蛋白作为免疫原，免疫哺乳动物，获得表达Prdx1 IgG中和抗体的哺乳动物，最后制备和纯化Prdx1 IgG中和抗体。5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：(1)选取兔作为免疫动物，在制备中和抗体之前进行血清采集；(2)于第1天采用免疫原，即重组prdx1蛋白0.4
‑
0.6mg，并予以完全弗氏佐剂对免疫动物进行皮下注射免疫原；(3)于第14天、第35天、第56天采用免疫原，即重组prdx1蛋白0.2
‑
0.3mg，并予以不完全弗氏佐剂对免疫动物进行皮下注射免疫；(4)于第63天，采集步骤(3)处理后的兔血液，提取血清，使用血清进行ELISA检测是...
【专利技术属性】
技术研发人员：陶立坚，彭张哲，孟婕，阳惠湘，
申请(专利权)人：中南大学湘雅医院，
类型：发明
国别省市：
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