一种制备富含鹅肌肽和谷胱甘肽的金枪鱼肽的方法技术

本发明专利技术公开了一种制备富含鹅肌肽和谷胱甘肽的金枪鱼肽的方法，属于活性肽制备技术领域。该方法包括以下步骤：在60～70℃条件下进行两次水提天然活性肽、用中性蛋白酶酶解肉渣并添加风味蛋白酶、灭活、离心、合并料液、两次板框压滤料液、经1级活性炭纤维膜在35℃条件下进行脱腥脱色、负压浓缩、瞬时喷雾干燥。本发明专利技术的有益之处在于：发酵时间短，适合工业化生产，制备得到的金枪鱼肽富含鹅肌肽和谷胱甘肽。肽。肽。

【技术实现步骤摘要】
一种制备富含鹅肌肽和谷胱甘肽的金枪鱼肽的方法


[0001]本专利技术涉及一种制备金枪鱼肽的方法，具体涉及一种制备富含鹅肌肽和谷胱甘肽的金枪鱼肽的方法，属于活性肽制备


技术介绍

[0002]金枪鱼是一种大型远洋性重要商品食用鱼，含有丰富的营养成分，尤其是优质蛋白和营养素，作为一种营养、健康的现代食品备受推崇，被欧美等发达国家所青睐，其健康功效包括：1、低脂肪、低热量，有益于保持身材和减肥；2、含有DHA，可以提高记忆力、增强脑细胞活力，提高视力，预防近视的形成等；3、含有生物活性成分，可以缓解压力，起到护肝、养肝、降血压、降血脂、降胆固醇的作用，预防心脑血管疾病；4、含有丰富的氨基酸和多种微量元素，可以促进人体的新陈代谢，促进蛋白质、铁等营养素的吸收，补铁，预防贫血。
[0003]随着人们对海洋生物的探索，金枪鱼除了被作为美食之外，还被发现可以从其肉质中提取活性肽。
[0004]金枪鱼肽是从金枪鱼肉中提取、精制而成的金枪鱼来源肽。金枪鱼肽中含有的活性物质主要是鹅肌肽。鹅肌肽存在于金枪鱼的肌肉中，是2种氨基酸（β
‑
丙氨酸、甲基组氨酸）结合而成的肽（β
‑
丙氨酰
‑1‑
甲基 L
‑
组氨酸，Anserine），是一种高度稳定的水溶性二肽，在低pH值（<3.0）下可保持完整。
[0005]金枪鱼一生能够持续不断游泳的原因之一是其肌肉中含有较多的鹅肌肽。金枪鱼在高强度持续运动时，肌肉以糖酵解为主要供能方式，会产生大量乳酸，由于鹅肌肽含咪唑基，所以在生理pH7左右具有明显的缓冲作用，可缓解疲劳。另外，金枪鱼在高强度的持续运动时，还会产生大量的自由基，机体产生氧化应激，进而导致肌细胞损失、肌张力下降，产生疲劳。鹅肌肽分子构象呈弯曲的“钳子”状，可将自由基包埋于其分子腔中形成稳定的复合物，从而清除自由基，进而抗疲劳。
[0006]目前，金枪鱼肽的提取方法主要是：酶解结合离心和醇沉，得到肽的粗提取物。然而，该方法得到的金枪鱼肽纯度不理想，往往伴随腥味，增加了后续处理难度，影响市场价值。
[0007]为了解决上述方法存在的问题，中国专利申请CN111418700A提供了一种优化的金枪鱼肽提取方法，具体的：向金枪鱼中加入复合蛋白酶（例如：木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶、其他菌株发酵所得到的中性或酸性蛋白酶）及产蛋白酶的微生物（例如：热带假丝酵母菌），同时进行发酵和酶解（能够有效消除异味，显著降低金枪鱼肽分子量，降低后续纯化难度），得到吸收液，吸收液经树脂纯化制备得到金枪鱼肽。采用该方法提取得到的金枪鱼肽属于小分子肽，纯度较高、没有异味，后续加工难度低，是一种高经济价值产品。然而，该方法由于对金枪鱼匀浆液直接进行发酵和酶解（30℃条件下发酵酶解72h），发酵和酶解
过程时间较长，一方面使得生产周期变长，时间成本和人力成本增加，不适合工业化生产，另一方面使得肌肉中更多的还原型谷胱甘肽（在溶液中不太稳定）被氧化，从而造成还原型谷胱甘肽损失。此外，该方法由于向金枪鱼匀浆液中接种了产蛋白酶的微生物——热带假丝酵母菌，虽然可以有效消除金枪鱼肽的苦腥味，但该热带假丝酵母菌发酵产生的蛋白外切酶会损坏鹅肌肽和谷胱甘肽的结构，使得鹅肌肽和谷胱甘肽的活性下降。

技术实现思路

[0008]为解决现有技术的不足，本专利技术提供一种发酵时间短、适合工业化生产且可制备出富含鹅肌肽和谷胱甘肽的金枪鱼肽的方法。
[0009]为了实现上述目标，本专利技术采用如下的技术方案：一种制备富含鹅肌肽和谷胱甘肽的金枪鱼肽的方法，包括以下步骤：Step1：将金枪鱼用高压匀浆机搅碎均质，将匀浆液倒入酶解罐中并与蒸馏水混合，于60～70℃搅拌30min后自然沉降，得到上清料液1；将酶解罐中的肉渣与蒸馏水混合，于60～70℃搅拌20min后自然沉降，得到上清料液2；将上清料液1和上清料液2混合得到料液3；Step2：向装有肉渣的酶解罐中加入蒸馏水，升温至50～60℃，加入中性蛋白酶搅拌酶解3h，最后加入风味蛋白酶，得到料液4；Step3：将料液4加热灭活，得到料液5；Step4：将料液5离心，得到料液6；Step5：将料液3和料液6混合，得到料液7；Step6：将料液7泵入到装有助滤剂的板框压滤机内，压滤料液7，得到料液8；Step7：将料液8泵入到装有助滤剂的板框压滤机内，压滤料液8，得到料液9；Step8：将料液9经微孔孔径为1nm的活性炭纤维膜进行脱腥脱色处理，得到料液10；Step9：将料液10泵入到单效蒸发器内于50℃、负压0.1MPa条件下进行负压浓缩，得到料液11；Step10：将料液11快速升温到90℃，然后泵入到干燥塔中进行瞬时喷雾干燥，得到金枪鱼肽粉。
[0010]优选的，在Step2中，中性蛋白酶的添加量为肉渣质量的1～3
‰
，风味蛋白酶的添加量为肉渣质量的0.5～1
‰
。
[0011]优选的，在Step3中，灭活温度为85～90℃，保持时间8～10min。
[0012]优选的，在Step4中，选用卧式螺旋沉降离心机进行离心，转速调至4800r/min，生产能力调至0.8m3/h。
[0013]优选的，在Step6中，所述助滤剂选用ZX616
#
硅藻土。
[0014]优选的，在Step7中，所述助滤剂选用SX821
#
硅藻土。
[0015]优选的，在Step8中，对料液9进行脱腥脱色处理的方法具体为：将料液9的温度升高至35℃，然后泵入到不锈钢骨架的活性炭纤维膜脱色装置中，经活性炭纤维膜对料液9进行脱腥脱色处理，脱色效率为2.5m3/h，得到料液10。
[0016]优选的，在Step9中，进行负压浓缩时，每20min排放蒸发冷凝水，去除料液10 90%
以上的水分。
[0017]优选的，在Step10中，于140～155℃条件下进行瞬时喷雾干燥。
[0018]本专利技术的有益之处在于：（1）通过对金枪鱼原料进行两次水提，实现了天然活性肽的最大化提取；（2）通过使用1级活性炭纤维膜，既实现了有针对性的脱腥脱色，又最大限度地减少了鹅肌肽和谷胱甘肽的损失；（3）制备得到的金枪鱼肽粉呈白色，颗粒细腻且均匀，粒径在100～150目范围内，无腥味和苦味，鹅肌肽含量达10.27%，还原型谷胱甘肽含量达6.51%。
附图说明
[0019]图1是鹅肌肽标品的高效液相色谱图；图2是还原型谷胱甘肽标品的高效液相色谱图；图3是实施例1制备得到的金枪鱼肽粉的高效液相色谱图；图4是实施例2制备得到的金枪鱼肽粉的高效液相色谱图。
具体实施方式
[0020]以下结合附图和具体实施例对本专利技术作具体的介绍。
[0021]实施例1Step1：水提天然活性肽用清水清洗金枪鱼，去除内脏及泥沙，用高压匀浆机搅碎均质，得到匀浆液。
[0022]将匀浆液倒入装有蒸馏水的酶解罐中，匀浆液与蒸馏水的质量比本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种制备富含鹅肌肽和谷胱甘肽的金枪鱼肽的方法，其特征在于，包括以下步骤：Step1：将金枪鱼用高压匀浆机搅碎均质，将匀浆液倒入酶解罐中并与蒸馏水混合，于60～70℃搅拌30min后自然沉降，得到上清料液1；将酶解罐中的肉渣与蒸馏水混合，于60～70℃搅拌20min后自然沉降，得到上清料液2；将上清料液1和上清料液2混合得到料液3；Step2：向装有肉渣的酶解罐中加入蒸馏水，升温至50～60℃，加入中性蛋白酶搅拌酶解3h，最后加入风味蛋白酶，得到料液4；Step3：将料液4加热灭活，得到料液5；Step4：将料液5离心，得到料液6；Step5：将料液3和料液6混合，得到料液7；Step6：将料液7倒入到装有助滤剂的板框压滤机内，压滤料液7，得到料液8；Step7：将料液8倒入到装有助滤剂的板框压滤机内，压滤料液8，得到料液9；Step8：将料液9经微孔孔径为1nm的活性炭纤维膜进行脱腥脱色处理，得到料液10；Step9：将料液10泵入到单效蒸发器内于50℃、负压0.1MPa条件下进行负压浓缩，得到料液11；Step10：将料液11快速升温到90℃，然后泵入到干燥塔中进行瞬时喷雾干燥，得到金枪鱼肽粉。2.根据权利要求1所述的制备富含鹅肌肽和谷胱甘肽的金枪鱼肽的方法，其特征在于，在Step2中，中性蛋白酶的添加量为肉渣质量的1～3
‰
，风味蛋白酶的添加量为肉渣质量的0.5～1
‰
...

【专利技术属性】
技术研发人员：于雁飞，张娟娟，李亚，刘力宁，王桂萍，
申请(专利权)人：蓝鲲海洋生物科技烟台有限公司，
类型：发明
国别省市：