一种尿液中游离醛固酮的检测方法技术

本发明专利技术提供一种尿液中游离醛固酮的检测方法。所述检测方法包括以下步骤：(1)通过液固联合萃取对尿液样本进行前处理；(2)通过超高效液相串联质谱仪对步骤(1)处理后的尿液样本进行检测，得到游离醛固酮的含量；其中，所述检测中流动相A为体积百分含量为0.05

【技术实现步骤摘要】
一种尿液中游离醛固酮的检测方法


[0001]本专利技术属于激素检测
，涉及一种尿液中游离醛固酮的检测方法。

技术介绍

[0002]醛固酮(Ald)是一种在肾上腺皮质内以胆固醇为原料经各级催化酶解反应生成的类固醇激素，其主要生物学作用是维持机体血压稳定和电解质平衡。醛固酮异常增高可发生在多种疾病中，临床上主要见于原发性醛固酮增多症(PA)。因此Ald准确定量对PA的筛查和确诊两方面均具有重要的临床价值。
[0003]由于放射免疫分析法存在放射污染、同位素标记物不稳定、实验室间结果差异大等技术局限性，目前基本已被各国临床实验室淘汰，由酶联免疫法和各类化学发光法替代。对于醛固酮这类人体样本中含量极低的小分子激素，欧美等发达国家多是采用气相色谱串联质谱(GC
‑
MS)或液相串联质谱(LC
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MS/MS)法检测。液相色谱串联质谱技术利用液相色谱的高效分离能力和质谱方法的高灵敏度检测能力而具有高灵敏度、高特异性、线性范围宽、样本用量少等优势，并已逐步得到了临床的高度认可。例如通过LCr/>‑
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种尿液中游离醛固酮的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：(1)将尿液样本、硫酸锌甲醇溶液和磷酸水溶液混合后，离心，收集上清液；将上清液加入含阴离子交换填料的固相萃取多孔板中，使用磷酸水溶液、含氨水的甲醇水溶液和纯水进行淋洗，再使用甲醇水溶液进行洗脱，得到纯化后的尿液样本；(2)通过超高效液相串联质谱仪对步骤(1)处理后的尿液样本进行检测，得到游离醛固酮的含量；其中，所述检测中流动相A为体积百分含量为0.05
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0.2％的甲酸水溶液，流动相B为乙腈。2.根据权利要求1所述的尿液中游离醛固酮的检测方法，其特征在于，步骤(1)中，所述硫酸锌甲醇溶液的浓度为0.05
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0.2mol/L；所述尿液样本和硫酸锌甲醇溶液的体积比为(1
‑
3):1。3.根据权利要求1或2所述的尿液中游离醛固酮的检测方法，其特征在于，步骤(1)中，所述离心前还包括涡旋，所述涡旋的时间为1
‑
5min；优选地，步骤(1)中，所述离心的转速为7000
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15000rpm，所述离心的时间为3
‑
10min。4.根据权利要求1
‑
3任一项所述的尿液中游离醛固酮的检测方法，其特征在于，所述阴离子交换填料包括季铵基和/或叔胺基化学键合的聚苯乙烯/二乙烯基苯；优选地，步骤(1)中，所述含阴离子交换填料的固相萃取多孔板包括Oasis MAX SPE板。5.根据权利要求1
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4任一项所述的尿液中游离醛固酮的检测方法，其特征在于，步骤(1)中，所述淋洗具体包括以下步骤：依次使用0.01
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0.1vol％的磷酸水溶液、含0.05
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0.2wt％氨水的5
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15vol％甲醇水溶液和纯水进行淋洗；优选地，步骤(1)中，所述磷酸水溶液、含氨水的甲醇水溶液和纯水的体积比为(1
‑
2):(1
‑
2):(1
‑
2)。6.根据权利要求1
‑
5任一项所述的尿液中游离醛固酮的检测方法，其特征在于，所述洗脱具体包括以下步骤：使用体积百分含量为60
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80％的甲醇水溶液进行洗脱至纯水中；优选地，所述甲醇水溶液和纯水的体积比为(1
‑
1.5):1。7.根据权利要求1
‑
6任一项所述的尿液中游离醛固酮的检测方法，其特征在于，步骤(2)中，所...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡滨，陈宝荣，李廷华，于蕾，张利杰，夏苗苗，彭宝生，候生根，
申请(专利权)人：北京金域医学检验实验室有限公司，
类型：发明
国别省市：