本发明专利技术提供一种低温诱导选育耐寒暗纹东方鲀的方法，先进行群种选育，再采用低温刺激性腺发育中的亲鱼和受精卵，提高卵细胞精子及受精卵在发育分裂过程中基因突变的概率，便于选择优良基因和性状；对选育出的耐寒暗纹东方鲀进行耐寒主效应基因挖掘，并进行基因测序，对比基因差异，发现确定耐寒主效应基因，确定耐寒主效应基因，便于后期进行耐寒暗纹东方鲀的选育。的选育。
【技术实现步骤摘要】
一种低温诱导选育耐寒暗纹东方鲀的方法
[0001]本专利技术涉及水产养殖品种良种选育的方法，具体来说是一种耐寒暗纹东方鲀的选育方法。
技术介绍
[0002]暗纹东方鲀是长江三鲜之首，是一条有着悠久文化的鱼，深受长江中下游人民喜爱，暗纹东方鲀是江海洄游鱼类，最适宜其生长的气温是25℃
‑
28℃，每年11月份气温在18℃左右，就洄游下海，12℃时停止摄食甚至死亡。基于暗纹东方鲀的此特性，在长江中下游地区的冬季，暗纹东方鲀很难在自然状况下存活。因此冬季养殖暗纹东方鲀，必须采用温室加温，保持温度在18℃左右，才能使暗纹东方鲀顺利过冬。
[0003]但是采用温室加温养殖暗纹东方鲀，暗纹东方鲀虽能越冬，但只能维持它的生命特征，所以人工温室养殖下的暗纹东方鲀生长缓慢，也严重增加了暗纹东方鲀的冬季养殖成本。
技术实现思路
[0004]针对上述
技术介绍
存在的难题，本专利技术提供一种低温诱导选育耐寒暗纹东方鲀的方法，能科学有效的选育出耐寒性能佳的暗纹东方鲀，进而提高暗纹东方鲀冬季的产量及重量，从而也降低暗纹东方鲀冬季养殖的成本。
[0005]本专利技术提供一种低温诱导选育耐寒暗纹东方鲀的方法，其特征在于，所述耐寒暗纹东方鲀的选育方法包括如下步骤：S01.暗纹东方鲀亲鱼的选育，具体操作如下：从群体中挑选满足体格健壮、色泽好、性腺发育良好、规格最大的目标成鱼作为繁殖的亲鱼。
[0006]S02.采用性腺发育期低温诱导方法对暗纹东方鲀进行诱导，具体操作如下：在S01挑选出的暗纹东方鲀性腺发育的Ⅱ期和Ⅲ期阶段，对所述暗纹东方鲀进行低温刺激。
[0007]S03.低温刺激发育中的暗纹东方鲀受精卵进行刺激，其包括对暗纹东方鲀受精卵受精后30min至120min进行低温刺激，刺激温度0℃
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4℃，刺激时间30秒至120秒。
[0008]S04.进行群体挑选生长速度快的暗纹东方鲀成鱼，具体操作如下：上述S03受精卵孵化成鱼苗，鱼苗经过6个月左右的养殖，在11月初
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12月初，鱼池水温12℃
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15℃时，选择预定养殖池，在每个养殖池挑选生长速度快，规格最大的预定数量的成鱼，转移暂养在的温室大棚内的养殖池中，并对每个养殖池进行编号。
[0009]S05.降温筛选耐寒的暗纹东方鲀成鱼，具体操作如下：调节养殖水温，进行梯度降温，将S04选出的成鱼按耐受温度挑选为耐12℃、耐10℃、耐8℃、耐7℃、耐6℃、耐5℃的小群体。
[0010]S06. 耐寒主效应基因的挖掘，具体操作如下：将S05挑选出的暗纹东方鲀按耐受温度分为6组群体，每组随机抽取预定数量的成鱼，进行基因测序，对比分析12℃和5℃这2组基因差异，发现确定3
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5个耐寒主效应基因，再对照分析10℃、8℃、7℃、6℃这4组基因发
现并确定耐寒主效应基因在各组中的基因纯合度，确定耐寒主效应基因。
[0011]S07.建立耐寒5℃亲鱼种群，具体操作如下：挑选纯合耐寒主效应基因含有量3组以上的成鱼作为后备亲鱼。
[0012]S08.繁殖耐寒F1代，进行耐寒能力验证，具体操作如下：后备亲鱼性成熟后按常规方法繁殖鱼苗养成成鱼，随机挑选预定数量鱼池，每池挑选预定数量的成鱼，根据上述降温筛选耐寒暗纹东方鲀的育种方法，验证F1代成鱼的耐寒性状。
[0013]进一步的，在所述S02步骤中，采用性腺发育期低温诱导方法对暗纹东方鲀进行选育亲鱼，具体操作如下：选择预定数量雌雄各半的基础亲鱼，从18℃开始控制降温，每次降温1℃
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2℃，保持此温度24h，以此循环，降温至12℃，保持温度48h，淘汰劣种亲鱼，恢复至18℃以上，继续培育。
[0014]进一步的，在所述S03步骤中，低温刺激发育中的暗纹东方鲀受精卵进行育种，具体包括：S0301进行第一批受精卵刺激，受精卵10万粒，受精30分钟后，放入0℃水中浸泡30秒，取出受精卵转入孵化桶，按正常温度进行孵化，鱼苗分3个鱼池进行养殖，并对鱼池进行编号；S0302进行第二批受精卵刺激，受精卵10万粒，受精30分钟后，放入0℃水中浸泡60秒，取出受精卵转入孵化桶，按正常温度进行孵化，鱼苗分3个鱼池进行养殖，并对鱼池进行编号；S0303进行第三批受精卵刺激，受精卵10万粒，受精30分钟后，放入0℃水中浸泡120秒，取出受精卵转入孵化桶，按正常温度进行孵化，鱼苗分3个鱼池进行养殖，并对鱼池进行编号；S0304进行第四批受精卵刺激，受精卵10万粒，受精60分钟后，放入4℃水中浸泡60秒，取出受精卵转入孵化桶，按正常温度进行孵化，鱼苗分3个鱼池进行养殖，并对鱼池进行编号；S0305进行第五批受精卵刺激，受精卵10万粒，受精90分钟后，放入4℃水中浸泡90秒，取出受精卵转入孵化桶，按正常温度进行孵化，鱼苗分3个鱼池进行养殖，并对鱼池进行编号；S0306进行第六批受精卵刺激，受精卵10万粒，受精120分钟后，放入4℃水中浸泡120秒，取出受精卵转入孵化桶，按正常温度进行孵化，鱼苗分3个鱼池进行养殖，并对鱼池进行编号。
[0015]进一步的，在所述S05步骤中，降温筛选耐寒的暗纹东方鲀成鱼，具体特征在于：每次降1℃
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2℃，每个温度梯度保持24h，降至5℃，淘汰耐寒性状差的暗纹东方鲀。
[0016]有益效果：本专利技术所述选育耐寒暗纹东方鲀育种方法，具有以下优点：1.本专利技术采用低温刺激性腺发育中的亲鱼和受精卵，提高卵细胞精子及受精卵在发育分裂过程中基因突变的概率，便于选择优良基因和性状。
[0017]2.本专利技术通过对选育出的耐寒暗纹东方鲀进行耐寒主效应基因挖掘，并进行基因测序，对比基因差异，发现确定耐寒主效应基因，确定耐寒主效应基因，便于后期进行耐寒暗纹东方鲀的选育。
[0018]3.通过本专利技术所述的育种方法繁殖的暗纹东方鲀具有耐寒的特性，提高了自然条
件下暗纹东方鲀冬季养殖的效率，进一步也降低了冬季养殖暗纹东方鲀的成本。
具体实施方式
[0019]下面结合具体实施例对本专利技术作进一步说明。
[0020]本专利技术提供一种低温诱导选育耐寒暗纹东方鲀的方法，其特征在于，所述耐寒暗纹东方鲀的育种方法包括如下步骤：S01.暗纹东方鲀亲鱼的选育，其包括从群体中挑选满足体格健壮、色泽好、性腺发育良好、规格最大的目标成鱼作为繁殖的亲鱼。
[0021]S02.采用性腺发育期低温诱导方法对暗纹东方鲀进行诱导，在S01挑选出的暗纹东方鲀性腺发育的Ⅱ期和Ⅲ期阶段，对暗纹东方鲀进行低温刺激，选择2000雌雄各半的基础亲鱼，，从18℃开始控制降温，第一次降温1℃，保持此温度24h，第二次降温1.5℃，保持此温度24h，第三次降温2℃，保持此温度24h，第四次降温1.5℃，即降温至12℃，保持温度48h，淘汰耐寒性状差的暗纹东方鲀，恢复至18℃以上，继续培育。
[0022]S03.低温刺激发育中的鱼种受精卵进行刺激，其包括对鱼种受精卵受精后30min至120min进行低本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种低温诱导选育耐寒暗纹东方鲀的方法，其特征在于：具体步骤如下：S01、暗纹东方鲀亲鱼的选育，其包括从群体中挑选满足体格健壮、色泽好、性腺发育良好、规格最大的目标成鱼作为繁殖的亲鱼;S02、采用性腺发育期低温诱导方法对暗纹东方鲀进行诱导，其包括在S01挑选出的暗纹东方鲀性腺发育的Ⅱ期和Ⅲ期阶段，对所述暗纹东方鲀进行低温刺激;S03、低温刺激发育中的暗纹东方鲀受精卵进行刺激，其包括对暗纹东方鲀受精卵受精后30min至120min进行低温刺激，刺激温度0℃
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4℃，刺激时间30秒至120秒;S04、进行群体挑选生长速度快的暗纹东方鲀成鱼，具体操作如下：上述S03步骤中受精卵孵化成鱼苗，鱼苗经过6个月左右的养殖，在11月初
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12月初，鱼池水温12℃
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15℃时，选择预定养殖池，在每个养殖池挑选生长速度快，规格最大的预定数量的鱼，转移暂养在温室大棚内的养殖池，并对每个养殖池进行编号;S05、降温筛选耐寒的暗纹东方鲀成鱼，具体操作如下：调节养殖水温，进行梯度降温，将S04选出的暗纹东方鲀成鱼按耐受温度挑选为耐12℃、耐10℃、耐8℃、耐7℃、耐6℃、耐5℃的小群体;S06、耐寒主效应基因的挖掘，具体操作如下：所述S05挑选出的暗纹东方鲀成鱼分为的6组群体，每组随机抽取预定数量的暗纹东方鲀，进行基因测序，对比分析12℃和5℃这2组基因差异，发现确定3
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5个耐寒主效应基因，再对照分析10℃、8℃、7℃、6℃这4组基因发现并确定耐寒主效应基因各组中的基因纯合度，确定耐寒主效应基因;S07、建立耐寒5℃亲鱼种群，具体操作如下：挑选纯合耐寒主效应基因含有量3组以上的暗纹东方鲀成鱼作为后备亲鱼;S08、繁殖耐寒F1代，进行耐寒能力验证，具体操作如下：后备亲鱼性成熟后按常规方法繁殖鱼苗养成成鱼，随机挑选预定数量鱼池，每池挑选预定数量的成鱼，根据上述S05步骤降温筛选耐寒成鱼的育种方法，验证F1代成鱼的耐寒性状。2.根据权利要求1所述的一种...
【专利技术属性】
技术研发人员：卢玉平，朱新鹏，涂翰卿，陈良标，韩爽，
申请(专利权)人：南通龙洋水产有限公司，
类型：发明
国别省市：
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