一种核酸提取裂解/结合液、核酸提取溶液体系及试剂盒制造技术

技术编号:36100828 阅读:96 留言:0更新日期:2022-12-28 13:59
本发明专利技术公开了一种核酸提取裂解/结合液、核酸提取溶液体系及试剂盒。所述核酸提取裂解/结合液包括:2

【技术实现步骤摘要】
一种核酸提取裂解/结合液、核酸提取溶液体系及试剂盒


[0001]本专利技术涉及核酸提取
,具体涉及一种核酸提取裂解/结合液、核酸提取溶液体系及试剂盒。

技术介绍

[0002]分子诊断以核酸作为检测对象,主要应用于临床各科的诊断中,如肿瘤、感染、遗传等方面,所有工作的基础是核酸提取。在特定条件下,固相载体磁珠表面包被有如硅基、氨基或羧基等,或固相硅胶膜载体,依靠静电、疏水和氢键作用,可实现核酸与磁珠的特异性结合,通过若干次洗涤实现非特异性杂质、盐类等的去除,然后将核酸从固相载体上洗脱下来实现提纯。
[0003]磁珠、硅胶膜固相载体上一般会残留一定量的蛋白、大分子和盐类,清洗步骤有助于去除这些杂质。通常有两种清洗方式,因样本而异。对于进行血浆cfDNA(游离DNA)的提取,通常分为两步洗涤,第一步会用中等浓度的离液盐和醇去除蛋白质,然后用乙醇清洗以除去盐类。通过相关产品说明书和公开的化学品安全说明书(MSDS),表1总结了目前市面常见的cfDNA提取试剂盒的操作和各组分情况。
[0004]表1
[0005][0006]本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种核酸提取裂解/结合液,其特征在于,所述裂解/结合液包括:2

5M异硫氰酸胍、0.1

4%SDS、5

40%N

甲基乙酰胺、10

50%四甘醇。2.如权利要求1所述的一种核酸提取裂解/结合液,其特征在于,所述裂解/结合液包括:3

5M异硫氰酸胍、1

2%SDS、15

20%N

甲基乙酰胺、20

30%四甘醇。3.如权利要求1所述的一种核酸提取裂解/结合液,其特征在于,所述裂解/结合液还包括:5

20%Triton X

100、10

100mM Tris

HCl、0

50mM EDTA
·
2Na、0.1

5mg/mL硅羟基磁珠,所述Tris

HCl的pH范围为6

9。4.如权利要求2所述的一种核酸提取裂解/结合液,其特征在于,所述裂解/结合液还包括:7.5

10%Triton X

100、25

50mM Tris

HCl、10

15mM EDTA
·
2Na、0.5

1mg/mL硅羟基磁珠,所述Tris

HCl的pH范围为7.5

8.5。5.一种核酸提取溶液体系,其特征在于,该溶液体系包括:权利要求1

4任一项所述的核酸提取裂解/结合液、蛋白酶K、洗涤液1、洗涤液2、洗脱液;所述蛋白酶K的浓度范围:15

25mg/mL;所述洗涤液1的成分和浓度范围为:1

3M异硫氰酸胍、100

【专利技术属性】
技术研发人员:王臣谢正华
申请(专利权)人:上海思路迪生物医学科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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