一种奶茶样品茶多酚含量检测方法技术

本发明专利技术涉及一种奶茶样品茶多酚含量检测方法，在58～62℃对奶茶样品加热8～10min，再加入蛋白质沉淀剂沉淀蛋白质，得到的试液中茶多酚含量高，用于检测奶茶样品的茶多酚含量，相比现有的检测方法，测定结果更接近实际奶茶样品的茶多酚含量，准确性高。准确性高。

【技术实现步骤摘要】
一种奶茶样品茶多酚含量检测方法


[0001]本专利技术涉及茶类饮料中茶多酚的检测方法，具体涉及一种奶茶样品茶多酚含量检测方法。

技术介绍

[0002]我国国家标准GB/T 21733
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2008茶饮料中对茶类饮料中茶多酚含量检测方法作出了规定，给出了较浑浊的样液的试液制备方法，该试液制备方法具体地，先用95％乙醇作为蛋白质沉淀剂来沉淀样品中的蛋白质，再用慢速定量滤纸过滤去除蛋白质沉淀，得到的滤液即为试液，用分光光度计法测定该试液的吸光度，就能计算得到样液中茶多酚的含量。从市售的奶茶制品中取出的奶茶样品属于国标中规定的浑浊的样液，但市售的奶茶制品中除了添加乳制品(包括但不限于牛奶、奶粉、炼乳、奶油中的一种或多种)和茶汤以外，还会添加其它食品添加剂，如乳化剂、稳定剂等，导致使用国标中给出的方法用95％的乙醇沉淀蛋白，蛋白沉淀不完全，沉淀后过滤得到的滤液浑浊度高，影响测定结果的准确性。另外，由于奶茶制品中的茶多酚会和蛋白质产生结合，当使用国标中的试液制备方法对奶茶样品蛋白质进行沉淀时，已与蛋白质结合的茶多酚也会和蛋白质一起被沉淀，导致过滤后得到的试液中茶多酚的含量低于奶茶样品中实际的茶多酚含量，这也会影响测定结果的准确性。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的在于，提供一种奶茶样品茶多酚含量检测方法，制得的试液中茶多酚含量高，用于检测奶茶样品的茶多酚含量，准确性高。
[0004]现有研究表明，牛奶中乳球蛋白与茶多酚中EGC的结合强度随温度升高而增大，温度升高也有利于牛奶中β<br/>‑
酪蛋白与茶多酚中EGCG结合。专利技术人经试验发现，从常温状态开始，随着温度逐渐升高，测得奶茶样品中茶多酚的含量会减少，这表明确如上述研究所述，温度越高，奶茶样品中的蛋白质(包括现有研究中的乳球蛋白和β
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酪蛋白)与茶多酚(包括现有研究中的EGC和EGCG)的结合强度越强，茶多酚与蛋白质结合后和蛋白质一起被蛋白质沉淀剂沉淀，随温度升高，被沉淀的茶多酚逐渐增加，使检测试液中的茶多酚含量减少。然而专利技术人发现，随着温度继续升高，茶多酚含量反而会增加，到达一定温度后又再次减少，不同的奶茶样品，茶多酚含量达到最大时的温度基本落在60℃左右。据此，本专利技术给出如下技术方案：
[0005]提供一种奶茶样品茶多酚含量检测方法，包括试液制备步骤和茶多酚检测步骤，茶多酚检测步骤使用试液制备步骤制备得到的试液进行检测，试液制备包括以下步骤：取奶茶样品装入容器中，用58～62℃水浴加热8～10min，加热完毕后，立即往样品中加入蛋白质沉淀剂，边加入边摇匀，静置至沉淀不再增加，然后：
[0006]用滤纸过滤得到澄清滤液作为试液，沉淀的蛋白质留在滤纸上，茶多酚则留存在滤液中；或进行离心，取上清液作为试液。
[0007]进一步地，加入的蛋白质沉淀剂体积为奶茶样品体积的2～3倍。
[0008]进一步地，试液制备步骤加入的蛋白质沉淀剂温度＜15℃，以使蛋白质沉淀剂和样品的混合温度≤25℃。
[0009]进一步地，试液制备步骤采用的滤纸具体为定性滤纸。
[0010]进一步地，试液制备步骤中，离心具体是在3000r/min的转速下离心10min。
[0011]进一步地，试液制备步骤采用的蛋白质沉淀剂具体为乙醇、乙腈和丙酮当中的任一种。
[0012]进一步地，试液制备步骤采用的蛋白质沉淀剂为乙醇，用滤纸过滤具体地，过滤一次后，在留有蛋白质沉淀的滤纸上，再用4～6mL乙醇对滤纸上的沉淀进行洗涤，重复洗涤2～3次，用于洗涤的乙醇溶液温度为58～62℃。
[0013]进一步地，试液制备步骤中，加入蛋白质沉淀剂后，还加入用于促进沉淀的促进剂，充分摇匀后静置。
[0014]进一步地，试液制备步骤中，所述促进剂具体为盐酸溶液或氯化钾固体。
[0015]有益效果：在58～62℃对奶茶样品加热8～10min，再加入蛋白质沉淀剂沉淀蛋白质，得到的试液中茶多酚含量高，用于检测奶茶样品的茶多酚含量，相比现有的检测方法，测定结果更接近实际奶茶样品的茶多酚含量，准确性高。
具体实施方式
[0016]以下结合具体实施方式对本专利技术创造作进一步详细说明。
[0017]一、探究加热温度对奶茶样品中茶多酚含量的影响
[0018](1)为探究水浴加热温度对奶茶样品中茶多酚含量的影响，选取5种不同品牌的奶茶饮料，分别记为A、B、C、D、E品牌，对每种奶茶样品按以下步骤进行第一个实验：
[0019]S1、准备12个烧瓶，分别称取10g(奶茶的密度大约为1g/mL，根据体积计算公式V＝m/ρ，奶茶的质量约等于其体积)奶茶样品装入各烧瓶中，然后分别把各烧瓶置于35℃、40℃、45℃、50℃、55℃、60℃、65℃、70℃、75℃、80℃、85℃、90℃水浴锅中加热9min，加热完毕后，对应各烧瓶中样品的温度，立即往各烧瓶中加入20mL一定温度的无水乙醇和1g氯化钾，以使无水乙醇和样品的混合温度下降到25℃，边加入边摇匀，然后静置至沉淀不再增加，就使用定性滤纸进行过滤，得到的澄清滤液作为试液，共获得12份试液。
[0020]S2、准备12个25mL容量瓶，分别从步骤S1获得的每份试液中称取2g，装入相应的容量瓶中，然后往每个容量瓶中加入4mL蒸馏水、5mL酒石酸亚铁，充分摇匀后，用pH7.5的磷酸缓冲液定容至刻度。用10mm比色皿，在波长540处，以试剂空白作参比，测得试液显色后的吸光度A1。
[0021]S3、另外准备12个25ml容量瓶，分别从步骤S1获得的每份试液中称取2g，装入相应的容量瓶中，然后往每个容量瓶中加入4mL蒸馏水，再用pH7.5的磷酸缓冲液定容至刻度。用10mm比色皿，在波长540处，以试剂空白作参比，测得试液底色的吸光度A2。
[0022]S4、把步骤S2测得的A1和步骤S3测得的A2代入下式中计算各奶茶样品中茶多酚的含量：
[0023][0024]式中：
[0025]X——奶茶样品中茶多酚的含量，单位为mg/kg；
[0026]1.957——用10mm比色皿，当吸光度等于0.50时，1mL茶汤中茶多酚的含量相当于1.957mg；
[0027]K——稀释倍数；
[0028]m——用于测定吸光度称取的试液质量，单位为g，本实施例为2g。
[0029]计算得到5种奶茶样品茶多酚含量如下表1所示：
[0030]表1
[0031][0032][0033]现有研究表明，牛奶中乳球蛋白与茶多酚中EGC的结合强度随温度升高而增大，温度升高也有利于牛奶中β
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酪蛋白与茶多酚中EGCG结合，且茶多酚中EGCG更易与变性蛋白结合，且结合强度增大。
[0034]本次实验结果表明，随着水浴温度逐渐升高，在35～45℃范围内，各品牌奶茶样品中茶多酚含量逐渐减少，这表明在该温度范围内，确如现有研究所述，温度越高，奶茶样品中的蛋白质(包括现有研究中的乳球蛋白和β...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种奶茶样品茶多酚含量检测方法，包括试液制备步骤和茶多酚检测步骤，茶多酚检测步骤使用试液制备步骤制备得到的试液进行检测，其特征在于，试液制备包括以下步骤：取奶茶样品装入容器中，用58～62℃水浴加热8～10min，加热完毕后，立即往样品中加入蛋白质沉淀剂，边加入边摇匀，然后静置至沉淀不再增加，然后：用滤纸过滤得到澄清滤液作为试液，沉淀的蛋白质留在滤纸上，茶多酚则留存在滤液中；或进行离心，取上清液作为试液。2.根据权利要求1所述的奶茶样品茶多酚含量检测方法，其特征在于，加入的蛋白质沉淀剂体积为奶茶样品体积的2～3倍。3.根据权利要求2所述的奶茶样品茶多酚含量检测方法，其特征在于，试液制备步骤加入的蛋白质沉淀剂温度＜15℃，以使蛋白质沉淀剂和样品的混合温度≤25℃。4.根据权利要求1所述的奶茶样品茶多酚含量检测方法，其特征在于，试液制备步骤采用的滤纸具体为定性滤纸。5.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：康丽洁，聂云宸，林子芳，
申请(专利权)人：喜茶深圳企业管理有限责任公司，
类型：发明
国别省市：