一种具有抑制炎症因子表达作用的组合物及应用制造技术

本发明专利技术公开了一种具有抑制炎症因子表达作用的组合物及应用，一种具有抑制炎症因子表达作用的组合物，其由矢车菊素和蓝莓花色苷提取物组成。本发明专利技术使用脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)对小鼠巨噬细胞RAW264.7构建细胞免疫损伤模型，将矢车菊素单体与蓝莓花色苷提取物进行组合，使其在抑制RAW264.7细胞炎症因子TNF

【技术实现步骤摘要】
一种具有抑制炎症因子表达作用的组合物及应用


[0001]本专利技术涉及了生物医药
，特别是涉及了一种具有抑制炎症因子表达作用的组合物及应用。

技术介绍

[0002]炎症反应是宿主在内外因素刺激之下产生的一种防御性反应，过度的、慢性的炎症反应将导致机体多种组织损伤。炎症反应过程中，巨噬细胞的炎症相关信号通路被激活，诱导一系列的促炎症因子表达，从而参与炎症性疾病的发生与发展。TNF
‑
α是炎症反应中最常见的一个炎症因子，它不仅可以激活放大炎症反应，还可以诱导细胞的凋亡，研究发现多数中药是通过抑制炎症因子TNF
‑
α的表达来发挥其抗炎作用。
[0003]如中国专利技术专利CN102727654A公开了一种对炎症因子表达具有抑制作用的药物组合物，由第1提取物、第2提取物和第3提取物组成，所述提取物的制备方法如下：a)将原料药金银花、玄参、当归、甘草按照重量比2.5～4∶2.5～4∶1.5～2.5∶0.5～1.5的比例混匀；b)将所述原料药中加入水或40～60％的乙醇作为提取溶剂，所述原料药与所述提取溶剂的固液比为1∶5～10，提取2次以上，每次1.5～4.5小时，过滤后合并滤液，得到提取液和残渣；c)将所述提取液浓缩至干，后加水混悬，上大孔树脂，采用水、30％乙醇、60％乙醇和95％乙醇作为洗脱液进行连续淋洗，分别得到30％乙醇淋洗物即为所述第1提取物，60％乙醇淋洗物即为所述第2提取物、95％乙醇淋洗物即为所述第3提取物；d)将所述第1、2、3提取物混合，得到所述药物组合物。
[0004]目前研究中药的抗炎作用较普遍的是从中药方剂和中药提取液这两个方向进行的，从中药单体这个方向进行的研究并不多。而蓝莓花色苷提取物中除花色苷外还含有其他活性成分，但这些活性成分的在疾病治疗中所起的具体药效却不明确。目前也尚未见到有关矢车菊素与蓝莓花色苷提取物的组合物对抑制炎症因子TNF
‑
α表达起协同作用的任何报道。

技术实现思路

[0005]为了弥补已有技术的缺陷，本专利技术提供了一种具有抑制炎症因子表达作用的组合物及应用。
[0006]本专利技术所要解决的技术问题通过以下技术方案予以实现：
[0007]第一方面，一种具有抑制炎症因子表达作用的组合物，其由矢车菊素和蓝莓花色苷提取物组成。
[0008]根据本专利技术的实施方式之一，所述矢车菊素的质量终浓度设为0.3125～40μg/mL，所述蓝莓花色苷提取物的质量终浓度设为12.5～800μg/mL。
[0009]根据本专利技术的实施方式之一，所述矢车菊素的质量终浓度设为2.5～10μg/mL，所述蓝莓花色苷提取物的质量终浓度设为40～400μg/mL。
[0010]根据本专利技术的实施方式之一，所述矢车菊素与蓝莓花色苷提取物的质量比为1:20
～1:60。
[0011]根据本专利技术的实施方式之一，所述矢车菊素与蓝莓花色苷提取物的质量比为1:40。
[0012]根据本专利技术的实施方式之一，所述矢车菊素的质量终浓度设为2.93μg/mL，所述蓝莓花色苷提取物的质量终浓度设为118.68μg/mL。
[0013]根据本专利技术的实施方式之一，所述矢车菊素选自纯度98.66％的矢车菊素；所述蓝莓花色苷提取物通过以下方法制得：蓝莓打浆，离心处理获得汁液和果渣；汁液按照1:2(v/v)和无水乙醇混合，得到蓝莓乙醇溶液，以及将果渣在乙醇水溶液中进行超声萃取20～30min，得到蓝莓花色苷提取液；将蓝莓乙醇溶液和蓝莓花色苷提取液混合过滤，分离液通过装有HP2MGL大孔树脂的分离柱进行吸附分离，至吸附饱和；然后用70％乙醇洗脱，收集洗脱液，将洗脱液浓缩后进行真空冷冻干燥，即可得到粉末状的蓝莓花色苷提取物，备用。
[0014]需要说明的是，上述质量终浓度(μg/mL)是指每一毫升的培养基加1ug重量的矢车菊素或蓝莓花色苷提取物达到预设浓度。
[0015]第二方面，一种组合物在制备抑制炎症因子药物方面的应用，其中，所述组合物如任一上述的组合物。
[0016]根据本专利技术的实施方式之一，所述药物为炎症因子活性抑制剂。
[0017]根据本专利技术的实施方式之一，所述炎症因子为肿瘤坏死因子
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α。
[0018]与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：
[0019]本专利技术使用脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)对小鼠巨噬细胞RAW264.7构建细胞免疫损伤模型，将矢车菊素单体与蓝莓花色苷提取物进行组合，使其在抑制RAW264.7细胞炎症因子TNF
‑
αmRNA表达方面能够产生明显的协同配伍作用，降低了矢车菊素单味药使用剂量、毒性与成本，同时协同增强蓝莓花色苷提取物中各活性成分的作用效果，此项专利技术既明确了药物单体的使用剂量，又有效利用了提取物中的多种活性成分，为抵抗炎症提供新的药物候选来源和提高抗炎临床治疗效果方面具有重要意义。
附图说明
[0020]图1示出了不同浓度LPS对RAW264.7细胞活性的影响，注：与正常组相比，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001；
[0021]图2示出了不同浓度矢车菊素对RAW264.7细胞活性的影响，注：与正常组相比，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001；
[0022]图3示出了不同浓度蓝莓花色苷提取物对RAW264.7细胞活性的影响，注：与正常组相比，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001；
[0023]图4示出了不同质量比的矢车菊素+蓝莓花色苷提取物组合物对RAW264.7细胞中炎症因子TNF
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α的影响，注：与模型组相比，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001；
[0024]图5示出了矢车菊素与蓝莓花色苷提取物及二者组合物抑制炎症因子TNF
‑
α表达的量效关系曲线，注：组合物药物质量浓度以组合中矢车菊素的质量浓度作图；
[0025]图6示出了矢车菊素与蓝莓花色苷提取物在质量比1：40配伍下的Fa
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C曲线图。
具体实施方式
[0026]本专利技术中所用原料、设备，若无特别说明，均为本领域的常用原料、设备；本专利技术中所用方法，若无特别说明，均为本领域的常规方法。
[0027]如无特殊说明，本说明书中的术语的含义与本领域技术人员一般理解的含义相同，但如有冲突，则以本说明书中的定义为准。
[0028]本文中“包括”、“包含”、“含”、“含有”、“具有”或其它变体意在涵盖非封闭式包括，这些术语之间不作区分。术语“包含”是指可加入不影响最终结果的其它步骤和成分。术语“包含”还包括术语“由
…
组成”和“基本上由
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种具有抑制炎症因子表达作用的组合物，其特征在于，其由矢车菊素和蓝莓花色苷提取物组成。2.根据权利要求1所述的具有抑制炎症因子表达作用的组合物，其特征在于，所述矢车菊素的质量终浓度设为0.3125～40μg/mL，所述蓝莓花色苷提取物的质量终浓度设为12.5～800μg/mL。3.根据权利要求1所述的具有抑制炎症因子表达作用的组合物，其特征在于，所述矢车菊素的质量终浓度设为2.5～10μg/mL，所述蓝莓花色苷提取物的质量终浓度设为40～400μg/mL。4.根据权利要求1所述的具有抑制炎症因子表达作用的组合物，其特征在于，所述矢车菊素与蓝莓花色苷提取物的质量比为1:20～1:60。5.根据权利要求1所述的具有抑制炎症因子表达作用的组合物，其特征在于，所述矢车菊素与蓝莓花色苷提取物的质量比为1:40。6.根据权利要求1所述的具有抑制炎症因子表达作用的组合物，其特征在于，所述矢车菊素的质量终浓度设为2.93μg/mL，所述蓝莓花色苷提取物的质量终...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘韵乐，陈伙带，雷红涛，王杰，叶林，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：