本发明专利技术公开了生物标志物在制备胰腺癌癌源性新发糖尿病预测和/或预后评估的试剂盒中的应用，属于生物技术领域。所述生物标志物包括Sorcin和Serpin E1中的至少一种。本发明专利技术联合生物标志物Sorcin和Serpin E1，基于伴新发糖尿病及不伴新发糖尿病的胰腺癌患者样本，利用免疫酶联吸附法检测外周血中Serpin E1的定量表达水平，并利用免疫组化检测术中切除的组织中Sorcin的半定量表达水平，发现Serpin E1表达超过80nIU/ml，并且组织中Sorcin表达中阳性及以上(++/+++)，提示其可能为癌源性新发糖尿病。尿病。尿病。
【技术实现步骤摘要】
生物标志物在制备胰腺癌源性新发糖尿病预测和/或预后评估的试剂盒中的应用
[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及生物标志物在制备胰腺癌源性新发糖尿病预测和/或预后评估的试剂盒中的应用。
技术介绍
[0002]胰腺导管腺癌(PDAC)是世界上第四大癌症死亡原因，5年生存率低于10％。根据统计数据显示，相较于肺癌和肠癌等常见肿瘤在早筛和化疗领域取得的显著进展和治疗成果，胰腺癌早筛和化疗几乎没有任何重大突破，其死亡率在过去的几十年里并没有降低。造成这种高死亡率的因素包括：起病隐匿，症状不明确，缺乏足够敏感和特异的诊断测试生物标志物。这意味着，当患者确诊为胰腺癌时已有80％的肿瘤已处于局部晚期或转移阶段，这类患者的手术机会较少，即使可行根治性切除，其中80％的患者在手术后会出现局部或远程复发。因此，为了改善预后，有必要在早期诊断、治疗选择、疾病监测、治疗反应评估和预后评估等方面开发更有效的工具。
[0003]CT作为目前胰腺癌最重要的诊断手段，总体敏感度达74％，然而对小于1cm的早期胰腺癌敏感度降至33％，相比影像学检查，液体活检以其低成本、无创、可重复的优势，发展势头迅猛。液体活检是一种通过采集并分析非固体生物组织来诊断癌症的新方法，这些非固体生物组织主要来自血液，但也来部分自其他体液，如尿液、唾液和脑嵴液等。液体活检在肿瘤的早期诊断，治疗选择，疾病监测，预后评估等多方面有重要的辅助作用，这是一种微创、无风险的操纵。在肿瘤领域应用液体活检检测的肿瘤生物标志物主要是能远距离反应疾病情况的肿瘤特异性分泌蛋白、外泌体、游离核酸(cfDNA和cfRNAs)等。目前，在临床上应用于胰腺癌诊断的液体活检指标主要是CA
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199，但是其用于筛选小于1cm的早期胰腺癌时预测值仅为0.9％，所以在胰腺癌的早期诊断上的意义不大。
[0004]虽然新近发表在Nature、Gut等权威杂志的系列标志物(GPC1、5hmC、FGA等)诊断胰腺癌的准确度达到95％以上。但这些靶标的研究都是基于进展期胰腺癌患者与健康人血液标本作为参照来进行的差异分析结果，并非能反映早期胰腺癌的生物学特征。在普通人群中筛查10万分之8的胰腺癌，即使是99％特异性的标志物也可能产生1000个假阳性结果，因而对普通人群筛查会导致潜在医疗成本超过可能的获益，2019年JAMA 在总结16年胰腺早癌筛查获益研究中指出：只有在胰腺癌高危人群进行早筛才有较高的科学、社会及经济前景。2020年Lancet子刊在总结全球胰腺癌早筛进展时进一步明确：仅10％的胰腺癌为家族遗传性，而在90％的非遗传性胰腺癌中，伴3年内新发糖尿病，也叫做胰腺癌相关新发糖尿病(Pancreatic cancer associated new
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onset diabetes，PCAND)是最常见的高危人群(约占80％)，应作为筛查早期无症状胰腺癌的第一重要人群，研究PCAND极有可能是提升胰腺癌早筛效率的关键突破点。
[0005]综上所述，现阶段的研究认为新发型糖尿病可能是胰腺癌的早期表现，但是根据2021年国际糖尿病联合会(IDF)的数据，2021年全球20
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79 岁人群糖尿病患病率估计为
10.5％(5.366亿人)，2045年将上升至12.2％ (7.832亿人)。对基数如此庞大的糖尿病人群进行胰腺癌筛查，从医疗和经济负担层面都难以开展。如果能区分癌源性新发糖尿病和其他类型的糖尿病，将有助于从基数庞大的糖尿病人群中筛选出有胰腺癌风险的人群。所以探究癌源性糖尿病发生的机制及其过程中可以辅助早期筛查的生物标志物，是当前胰腺癌研究的热点之一。目前已有部分研究基于胰腺癌源性的新发糖尿病，通过临床统计及生信分析等方法筛选出一些的有胰腺癌早筛潜能的生物标志物，包括胰腺癌细胞来源的肾上腺髓质素(AM)、血管非炎性蛋白1(VNN1)和基质金属蛋白酶9(MMP9)、编码缝隙连接蛋白connexin26、分泌蛋白Galectin
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3和S100A9、骨保护素OPG、 S
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100A8的N端肽段、脂肪酸结合蛋白FABP
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1等，但遗憾的是这些研究一部分缺乏系统的实验研究验证其在胰腺癌源性新发糖尿病的发生机制中的作用，一部分缺乏临床研究验证其在早期筛选胰腺癌源性新发糖尿病的能力。所以，目前尚无有效的基于筛选胰腺癌源性新发糖尿病的生物标志物可以进行胰腺癌的早期诊断。
技术实现思路
[0006]鉴于上述，本专利技术目的是提供生物标志物在制备胰腺癌源性新发糖尿病预测和/或预后评估的试剂盒中的应用，提供了一系列可以筛选胰腺癌源性新发糖尿病并进行胰腺癌早期诊断及胰腺癌预后评估的生物标志物，以解决胰腺癌早期诊断困难、从基数庞大的糖尿病人群中筛选胰腺癌源性新发糖尿病困难的问题，最终期望实现改善胰腺癌的预后。
[0007]为实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
[0008]本专利技术提供了生物标志物在制备胰腺癌源性新发糖尿病预测和/或预后评估的试剂盒中的应用，所述生物标志物包括可溶性耐药相关钙结合蛋白(Sorcin)和纤溶酶原激活物抑制因子
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1(Serpin E1)中的至少一种。
[0009]本专利技术提供了检测生物标志物的试剂在制备胰腺癌源性新发糖尿病预测和/或预后评估的试剂盒中的应用，所述生物标志物包括可溶性耐药相关钙结合蛋白和纤溶酶原激活物抑制因子
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1中的至少一种。
[0010]所述试剂包括通过实时荧光定量PCR、荧光染料法、酶联免疫吸附法、共振光散射法、测序、检测芯片、生物质谱法或蛋白质印迹法检测样本中生物标志物表达水平的试剂。
[0011]所述样本包括组织样本、石蜡包埋样本、腹水及灌洗液样本、尿液样本、血液样本、细胞涂片样本、组织或细胞活检样本。
[0012]检测样本中可溶性耐药相关钙结合蛋白表达水平时，使用的样本为组织活检样本；检测样本中纤溶酶原激活物抑制因子
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1蛋白表达水平时，使用的样本为血液样本。
[0013]所述检测样本中生物标志物表达水平包括检测样本中生物标志物的蛋白表达量和/或mRNA表达量。
[0014]纤溶酶原激活物抑制因子
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1的表达水平高于80nIU/ml为高表达，可溶性耐药相关钙结合蛋白表达中阳性及以上(++/+++)为高表达；纤溶酶原激活物抑制因子
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1高表达和/或可溶性耐药相关钙结合蛋白高表达的，具有高胰腺癌源性新发糖尿病概率，其中，中阳性及以上为评分高于4分，评分标准如下：
[0015]阳性着色强度评分：
[0016](1)细胞不着色记为0分，(2)浅黄色记为1分，(3)细胞中黄色/ 棕色且背景不着
色，或细胞深棕色且背景浅棕色记为2分，(4)细胞棕色 /深棕色且背景不着色记为3分；
[0017]阳性细胞百分比评分：
[0018](1)阳性细胞＝0％记为0分，(2)0％＜阳性细胞≤25％本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.生物标志物在制备胰腺癌源性新发糖尿病预测和/或预后评估的试剂盒中的应用，所述生物标志物包括可溶性耐药相关钙结合蛋白和纤溶酶原激活物抑制因子
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1中的至少一种。2.检测生物标志物的试剂在制备胰腺癌源性新发糖尿病预测和/或预后评估的试剂盒中的应用，所述生物标志物包括可溶性耐药相关钙结合蛋白和纤溶酶原激活物抑制因子
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1中的至少一种。3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述试剂为通过实时荧光定量PCR、荧光染料法、酶联免疫吸附法、共振光散射法、测序、检测芯片、生物质谱法或蛋白质印迹法检测样本中生物标志物表达水平的试剂。4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述样本为组织样本、石蜡包埋样本、腹水及灌洗液样本、尿液样本、血液样本、细胞涂片样本、组织或细胞活检样本。5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，检测样本中可溶性耐药相关钙结合蛋白表达水平时，使用的样本为组织活检样本；检测样本中纤溶酶原激活物抑制因子
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1蛋白表达水平时，使用的样本为血液样本。6.如权利要求3所述的应用，其特征在于，检测样本中生物标志物表达水平为检测样本中生物标志物的蛋白表达量和/或mRNA表达量。7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，纤溶酶原激活物抑制因子
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1的表达水平高于80nIU/ml为高表达，可溶性耐药相关钙结合蛋白表达中阳性及以上为高...
【专利技术属性】
技术研发人员：吴育连，龚嘉俐，吴健，冯增誉，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：
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