一种非人灵长类动物孤独症模型的构建方法技术

本发明专利技术公开了一种非人灵长类动物孤独症模型的构建方法，属于生物技术领域，本发明专利技术所述非人灵长类动物孤独症模型的构建方法，包括以下步骤：(1)定位非人灵长类动物的脑前额叶区；(2)向所述脑前额叶区注射AAV‑SaCas9‑MECP2敲除病毒液；(3)注射所述AAV‑SaCas9‑MECP2敲除病毒液8周后，对所述非人灵长类动物进行行为学测试。本发明专利技术通过CRISPR‑Cas9基因编辑技术在脑前额叶区注射AAV腺相关病毒，敲除甲基化CpG结合蛋白2基因，以敲除MECP2基因来诱导狨猴产生孤独症谱系障碍核心症状—语言交流障碍，利用对狨猴进行叫声行为学测试，评价孤独症语言交流障碍。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物，尤其涉及一种非人灵长类动物孤独症模型的构建方法。

技术介绍

1、孤独症谱系障碍(autism spectrum disorder，asd)是一类高度遗传的神经发育障碍性疾病，患者通常表现为在社会性和交流能力、语言能力存在问题以及仪式化的刻板行为。近年来，孤独症谱系障碍的患病率逐年上升，给患者及家庭社会造成了巨大负担。然而，由于孤独症的发病原因复杂、致病机制不清，目前仍无有效治疗方法。

2、目前，人类asd患者的研究主要是较低的时空分辨率非侵入性研究，难以深入揭示致病机制，因此孤独症动物模型的构建尤为重要。啮齿类动物被广泛地应用在孤独症的造模研究中，但由于其与人类亲缘关系较远，大脑的体积和复杂程度是无法和人类进行比拟的，能否准确模拟孤独症这类复杂的精神疾病存疑。而非人灵长类动物与人类具有很高的基因同源性，大脑结构和功能与人类较为相似，在社会属性上也具有相似性，是社交功能障碍疾病的良好动物模型。以非人灵长类为实验对象的asd研究也获得了一些进展，例如mecp2基因过表达的猕猴和shank3基因突变的猕猴均表现出重复刻板行为、社交本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种非人灵长类动物孤独症模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述非人灵长类动物为狨猴。

3.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，步骤(1)中所述定位采用7T磁共振扫描成像技术。

4.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，步骤(2)中所述注射的深度为1.5～3.5mm，所述注射的速度为150nL/min，所述注射的注射点有6个。

5.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，步骤(2)中所述AAV-SaCas9-MECP2敲除病毒液包括AAV9-hSyn-SaCas9-U6-...

【技术特征摘要】

1.一种非人灵长类动物孤独症模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述非人灵长类动物为狨猴。

3.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，步骤(1)中所述定位采用7t磁共振扫描成像技术。

4.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，步骤(2)中所述注射的深度为1.5～3.5mm，所述注射的速度为150nl/min，所述注射的注射点有6个。

5.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，步骤(2)中所述aav-sacas9-mecp2敲除病毒液包括aav9-hsyn-sacas9-u6-sgmecp2-a病毒液、aav9-hsyn-sacas9-u6-sgmecp2-b病毒液和aav9-hsyn-gfp病毒液；所述aav-sacas9-mecp2敲除病毒液在每个注射点的注射量为3μl。

6.根据权利要求5所述的构建方法，其特征在于，所述aav-sacas9-mecp2敲除病毒液中aav9-hsyn-sacas9-u6-sgmecp2-a病毒液、...

【专利技术属性】
技术研发人员：高利霞，李倩冰，李新建，王晓会，谢敏，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：