用于重组大肠杆菌表达系统的蛋白发酵液预处理装置制造方法及图纸

技术编号:35996825 阅读:13 留言:0更新日期:2022-12-17 23:13
本实用新型专利技术涉及重组蛋白纯化技术领域,具体涉及一种用于重组大肠杆菌表达系统的蛋白发酵液预处理装置。用于重组大肠杆菌表达系统的蛋白发酵液预处理装置,包括缓冲液存储容器、可调节温度的发酵液存储容器、切向流过滤装置和功能储存容器;缓冲液存储容器通过第一管路与可调节温度的发酵液存储容器相连通;第一管路上设置第一泵体;可调节温度的发酵液存储容器与切向流过滤装置之间连通设置有第二管路和回流管路;第二管路上设置有第二泵体;切向流过滤装置通过第三管路与功能储存容器相连通;切向流过滤装置的内部设置超滤膜包。该装置可依次连续完成发酵液缓冲液置换,高温细胞破碎和含有目的蛋白的上清液/包涵体收集,简化流程并提高效率。简化流程并提高效率。简化流程并提高效率。

【技术实现步骤摘要】
用于重组大肠杆菌表达系统的蛋白发酵液预处理装置


[0001]本技术涉及重组蛋白纯化
,具体而言,涉及一种用于重组大肠杆菌表达系统的蛋白发酵液预处理装置。

技术介绍

[0002]大肠杆菌是第一个用于重组蛋白生产的宿主细胞,它有着遗传背景清晰、培养操作简单、生产繁殖快、成本低廉,可以快速大规模生产目的蛋白等优点,使目前应用最广的重组蛋白表达系统。
[0003]目的蛋白在大肠杆菌的主要表达方式主要包括胞内可溶性表达、包涵体表达和细胞周质空间表达等几种。大部分重组蛋白在大肠杆菌中的表达方式都以胞内可溶或包涵体为主,抗体片段如Fab、scFv等大都通过信号肽表达在细胞周质空间。目的蛋白在正式进入下游纯化工艺之前都需要对发酵液进行预处理。而预处理效率的高低对下游纯化的收率有着较大的影响。
[0004]传统发酵液处理过程主要步骤包括发酵液转移收集

菌体细胞离心收集

菌体缓冲液重悬

菌体高压均质破碎

离心收集上清/包涵体,中间涉及样品转移和离心等多个不连续处理过程,工艺相对复杂。
[0005]有鉴于此,特提出本技术。

技术实现思路

[0006]本技术的一个目的在于提供一种用于重组大肠杆菌表达系统的蛋白发酵液预处理装置,以解决传统大肠杆菌发酵液预处理工艺流程复杂,步骤多,效率低的问题。
[0007]为了实现本技术的上述目的,特采用以下技术方案:
[0008]用于重组大肠杆菌表达系统的蛋白发酵液预处理装置,包括缓冲液存储容器、可调节温度的发酵液存储容器、切向流过滤装置和功能储存容器;
[0009]所述缓冲液存储容器通过第一管路与所述可调节温度的发酵液存储容器相连通;所述第一管路上设置第一泵体;
[0010]所述可调节温度的发酵液存储容器与所述切向流过滤装置之间连通设置有第二管路和回流管路;所述第二管路上设置有第二泵体;
[0011]所述切向流过滤装置通过第三管路与所述功能储存容器相连通;
[0012]所述切向流过滤装置的内部设置有超滤膜包。
[0013]在一种实施方式中,所述缓冲液存储容器包括烧杯、存储瓶、存储袋、不锈钢桶和储液罐中的至少一种。
[0014]在一种实施方式中,所述可调节温度的发酵液存储容器包括储存容器本体结构和可调温度搅拌器。
[0015]在一种实施方式中,所述储存容器本体结构包括烧杯、存储瓶和发酵罐中的至少一种。
[0016]在一种实施方式中,所述可调温度搅拌器包括温控组件和搅拌组件。
[0017]在一种实施方式中,所述储存容器本体结构为存储瓶或发酵罐;所述储存容器本体结构的顶端设置有第一预留接口、第二预留接口和取样接口;
[0018]所述切向流过滤装置包括切向流过滤装置进口端、切向流过滤装置回流端和切向流过滤装置透过端;
[0019]所述第一预留接口与所述第一管路相连通;
[0020]所述第二预留接口通过所述回流管路与所述切向流过滤装置回流端相连通;
[0021]所述取样接口通过所述第二管路与所述切向流过滤装置进口端相连通;
[0022]所述切向流过滤装置透过端与所述功能储存容器相连通。
[0023]在一种实施方式中,所述第二管路的进液端口靠近所述储存容器本体结构的内部底面。
[0024]在一种实施方式中,所述超滤膜包为截留分子量大于或等于1000KD的超滤膜包。
[0025]在一种实施方式中,所述功能储存容器包括废液储存容器和/或样品收集容器。
[0026]在一种实施方式中,所述废液储存容器包括烧杯、存储瓶、存储袋、不锈钢桶和储液罐中的至少一种。
[0027]在一种实施方式中,所述样品收集容器包括烧杯、存储瓶、存储袋、不锈钢桶和储液罐中的至少一种。
[0028]在一种实施方式中,所述废液储存容器和样品收集容器的个数分别为一个或者多个。
[0029]与现有技术相比,本技术的有益效果为:
[0030]本技术中的处理装置适用于在大肠杆菌中表达的高热稳定蛋白发酵液的预处理,简化了大肠杆菌发酵液预处理过程中的发酵液转移收集

菌体细胞离心收集

菌体缓冲液重悬

高压均质破碎

离心收集上清液/包涵体等复杂步骤,可大大提高工作效率;同时,本装置取材容易、组装方便、放大简单,适用于特定产品的工业化放大生产。
附图说明
[0031]为了更清楚地说明本技术具体实施方式或现有技术中的技术方案,下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图是本技术的一些实施方式,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0032]图1为用于重组大肠杆菌表达系统的蛋白发酵液预处理装置的正视面结构示意图;
[0033]图2为可调节温度的发酵液存储容器的结构示意图;
[0034]图3为切向流过滤装置的结构示意图。
[0035]附图标记:
[0036]1‑
缓冲液存储容器、2

第一蠕动泵、3

发酵液存储容器、4

第二蠕动泵、5

切向流过滤装置、6

超滤膜包、7

废液储存容器、8

样品收集容器、9

温控组件、10

搅拌组件、11

第一预留接口、12

第二预留接口、13

取样接口、14

切向流过滤装置进口端、15

切向流过滤装置回流端、16

切向流过滤装置透过端、17

第一管路、18

第二管路、19

回流管路、20

第三管路、21

发酵罐、22

功能存储容器。
具体实施方式
[0037]在本技术的描述中,需要说明的是,术语“中心”、“上”、“下”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系,或者是该技术产品使用时惯常摆放的方位或位置关系,仅是为了便于描述本技术和简化描述,而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作,因此不能理解为对本技术的限制。此外,术语“第一”、“第二”、“第三”等仅用于区分描述,而不能理解为指示或暗示相对重要性。
[0038]在本技术的描述中,还需要说明的是,除非另有明确的规定和限定,术语“设置”、“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解,例如,可以本文档来自技高网
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.用于重组大肠杆菌表达系统的蛋白发酵液预处理装置,其特征在于,包括缓冲液存储容器、可调节温度的发酵液存储容器、切向流过滤装置和功能储存容器;所述缓冲液存储容器通过第一管路与所述可调节温度的发酵液存储容器相连通;所述第一管路上设置第一泵体;所述可调节温度的发酵液存储容器与所述切向流过滤装置之间连通设置有第二管路和回流管路;所述第二管路上设置有第二泵体;所述切向流过滤装置通过第三管路与所述功能储存容器相连通;所述切向流过滤装置的内部设置有超滤膜包。2.根据权利要求1所述的用于重组大肠杆菌表达系统的蛋白发酵液预处理装置,其特征在于,所述缓冲液存储容器包括烧杯、存储瓶、存储袋、不锈钢桶和储液罐中的至少一种。3.根据权利要求1所述的用于重组大肠杆菌表达系统的蛋白发酵液预处理装置,其特征在于,所述可调节温度的发酵液存储容器包括储存容器本体结构和可调温度搅拌器。4.根据权利要求3所述的用于重组大肠杆菌表达系统的蛋白发酵液预处理装置,其特征在于,所述储存容器本体结构包括烧杯、存储瓶和发酵罐中的至少一种;所述可调温度搅拌器包括温控组件和搅拌组件。5.根据权利要求3所述的用于重组大肠杆菌表达系统的蛋白发酵液预处理装置,其特征在于,所述储存容器本体结构为存储瓶或发酵罐;所述储存容器本体结构的顶端设置有第一预留接口、第二预留接...

【专利技术属性】
技术研发人员:徐岩赵海伟潘曼曼徐志豪樊鹏程
申请(专利权)人:英脉生物医药杭州有限公司
类型:新型
国别省市:

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