生物标志物在制备肿瘤诊断产品中的应用制造技术

本发明专利技术涉及生物标志物在制备肿瘤诊断产品中的应用，属于肿瘤医药领域。所述产品主要包括检测生物标志物表达水平的试剂，其中生物标志物为FBP1S124O

【技术实现步骤摘要】
生物标志物在制备肿瘤诊断产品中的应用


[0001]本专利技术涉及生物标志物在制备肿瘤诊断产品中的应用，属于肿瘤医药领域。

技术介绍

[0002]众所周知，肿瘤已成为威胁我国人民生命健康的首要原因，据2022年国家癌症中心发布的全国癌症报告显示，2000
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2016年间，我国整体癌症粗发病率和粗死亡率仍持续上升，反映出我国癌症实际负担沉重。肿瘤治疗关键在于是否能做到早发现、早诊断，以便采取相应的治疗措施，目前肿瘤只有争取早期治疗，才有可能被彻底治愈，如果肿瘤发展到中、晚期，肿瘤组织扩大或已发生转移，即使采取了各种治疗手段也很根治；相反，如果在早期或相对早期以及发生转移之前就能发现肿瘤并及时给予合理治疗，相当部分的病人能取得满意的治疗效果，甚至可达到根治效果。
[0003]目前肿瘤诊断的方法分为5级：
①
临床诊断：根据临床症状、体征以及影像学检查，参考疾病发展规律做出的推测诊断；
②
手术诊断：经手术或各种内镜检查，仅以肉眼看到的肿物而做出的判断，未经病理学证实；
③
理化诊断：在临床上符合癌症表现，并有理化检查阳性结果支持，如X线、B超、CT和MRI核磁共振检查，或癌胚抗原、甲胎蛋白测定等；
④
细胞病理学诊断：根据各种脱落细胞、穿刺细胞检查而做出的诊断；
⑤
组织病理学诊断：经粗针穿刺后获得的组织，制成病理切片，进行病理分析后得到的诊断。在这5级中，其诊断的可靠性依次增加，以第五级最为理想。但上述方法无法实现对肿瘤的早发现和早诊断，更多的是在肿瘤发展到一定程度后，甚至患者出现严重的病状体征，此时往往会错失最佳治疗时期，使后期治疗处于极大的被动状态，并且，诊断效果较好的病理学诊断需要穿刺取细胞或组织切片，对患者的精神和身体存在较大损害和消极影响。
[0004]由于肿瘤发生、发展的机制十分复杂，相关研究存在很多不足，严重阻碍了对于肿瘤的诊断和治疗新手段的开发。代谢是影响肿瘤发生发展的关键因素，肿瘤在发生发展的过程中会出现肿瘤细胞代谢模式的改变，这被称为“代谢重编程”。作为肿瘤的重要特征之一，代谢重编程满足了肿瘤细胞的三个关键需求：持续增长所需的能量，充足的用于合成核酸、蛋白质、脂类的生物大分子，以及氧化还原稳态的维持。只有更全面系统地了解和认识肿瘤代谢的机理，才能找到针对肿瘤代谢的生物标志物，才能突破目前我们在肿瘤诊断方面研究的瓶颈，真正从代谢异常这个角度实现对肿瘤的早期诊断。
[0005]肿瘤细胞中，代谢酶基因的突变或表达水平的变化，会导致细胞内代谢产物含量发生显著改变，这种“经典”代谢重编程在肿瘤演进中发挥关键作用。然而，近年来越来越多的证据表明，一些代谢酶和代谢小分子也可以通过非代谢途径依赖的“非经典”功能参与到肿瘤细胞的各个重要的生命过程中，从而促进肿瘤的发生发展。瓦博格效应是肿瘤细胞的重要代谢特征，它是指即使在氧气充足的情况下，肿瘤细胞仍主要通过糖酵解获得能量的现象。作为糖酵解的逆反应，糖异生是指生物体将多种非糖物质转变成葡萄糖或糖原的过程。果糖
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1,6
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二磷酸酶(fructose
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1，6
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bisphosphatase，FBP1)是糖异生的限速酶，它可以催化果糖
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1，6
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二磷酸水解为果糖
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磷酸。代谢酶FBP1不仅能够通过促进糖异生并阻遏糖
酵解来发挥抑制肿瘤的功能，同时它还具有多样的亚细胞定位，并可以通过非经典功能抑制肿瘤的发生发展。此外，有研究发现，肿瘤细胞中端粒酶的表达及活性都呈上调趋势，以此来保证肿瘤细胞的端粒长度及其不断增殖的能力。端粒酶逆转录酶(telomerase reverse tranase，TERT)是端粒酶中具有生物活性作用的催化亚基，对端粒酶维持端粒长度起重要作用，TERT高表达和高活性与众多恶性肿瘤的发生、发展呈正相关，并且与恶性肿瘤的预后不良有关，抑制TERT活性则抑制肿瘤的发展。虽然研究记载了FBP1和TERT在肿瘤发生发展中的作用，但其作用的分子机制还不清楚，无法确定对肿瘤做早期诊断的生物标志物。

技术实现思路

[0006]本专利技术要解决的技术问题是，提供用于制备肿瘤早期诊断产品的生物标志物，通过检测生物标志物的表达水平，可以对受试者患肿瘤的情况进行早期诊断。
[0007]本专利技术提供了生物标志物在制备肿瘤诊断产品中的应用，所述生物标志物为FBP1 S124 O
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糖基化、FBP1 S170磷酸化、TERT S227磷酸化和TERT T1039磷酸化的一种或多种；
[0008]其中，FBP1 S124 O
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糖基化指的是FBP1的氨基酸序列124位发生O
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糖基化，FBP1 S170磷酸化指的是FBP1氨基酸序列170位磷酸化，TERT S227磷酸化指的是TERT的227位磷酸化，TERT T1039磷酸化指的是TERT的1039位磷酸化；FBP1的NCBI序列号：NP_000498.2，TERT的NCBI序列号：NP_937983.2。
[0009]所述产品包括检测样品中生物标志物表达水平的试剂。
[0010]所述试剂包括第一抗体和第二抗体。
[0011]所述第一抗体为FBP1 S124 O
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糖基化抗体FBP1 S124 O
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GlcNAc、FBP1 S170磷酸化抗体FBP1 pS170、TERT S227磷酸化抗体TERT pS227或TERT T1039磷酸化抗体TERT pT1039。
[0012]所述第二抗体为与第一抗体同源且带有辣根过氧化酶标记的抗体。
[0013]所述产品的检测方法为Elisa或Western Blot。
[0014]所述样品为静脉外周血、癌旁组织或肿瘤组织。采集静脉外周血后，需于冰上静置15min，再经3500rpm离心15min得到血清或者血浆，进行检测或
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80℃保存，未能即时检测的样品均需要保存在
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80℃，检测时置于冰上解冻。
[0015]所述产品主要为试剂盒。试剂盒包括检测生物标志物表达水平的试剂，以及选自下组的一种或多种物质：容器、使用说明书、阳性对照物、阴性对照物、缓冲剂、助剂或溶剂。其中，使用说明书记载了如何采用试剂盒进行检测，和如何利用检测结果对肿瘤发展进行判断、对治疗方案进行选择。试剂盒的组分可以水介质的形式或以冻干的形式来包装。
[0016]所述诊断产品可应用于以下肿瘤疾病早期、中期或晚期的诊断：口腔癌、口咽癌、鼻咽癌、呼吸系统癌症、泌尿生殖系统癌症、胃肠癌、中枢或周围神经系统组织癌、内分泌或神经内分泌系统癌症或造血系统癌症、胶质瘤、肉瘤、上皮癌、淋巴瘤、黑素瘤、纤维瘤、脑脊膜瘤、脑癌、肾癌、胆道系统癌症、嗜铬细胞瘤、胰岛细胞癌、利
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弗劳梅尼瘤、甲状腺癌本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.生物标志物在制备肿瘤诊断产品中的应用，其特征在于：生物标志物为FBP1 S124 O
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糖基化、FBP1 S170磷酸化、TERT S227磷酸化和TERT T1039磷酸化的一种或多种。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述产品包括检测样品中生物标志物表达水平的试剂。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述试剂包括第一抗体和第二抗体。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：第一抗体为FBP1 S124 O
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糖基化抗体FBP1S124 O
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GlcNAc、...

【专利技术属性】
技术研发人员：吕志民，许大千，王征，李敏，
申请(专利权)人：浙江大学医学院附属第一医院，
类型：发明
国别省市：