海藻酸-g-香豆素衍生物的合成及其制备负载阿霉素的Pickering乳液的方法技术

本发明专利技术涉及一种海藻酸

【技术实现步骤摘要】
海藻酸
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g
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香豆素衍生物的合成及其制备负载阿霉素的Pickering乳液的方法


[0001]本专利技术涉及一种海藻酸衍生物的合成，特别涉及一种海藻酸
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g
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香豆素衍生物的合成及其制备负载阿霉素的Pickering乳液的方法，属于疏水性药物制剂


技术介绍

[0002]两亲性聚合物在水溶液中能够自组装形成结构明确的聚合物胶束，可通过化学键合或物理包埋方式实现对药物的包载，尤其是可以将疏水性药物包埋到胶束的疏水内核中，实现对药物的有效增溶，从而提高药物药效，减小副作用。亲水性外壳可以起到稳定胶束的作用，使其在血液循环中免受RES吞噬，延长药物在血液中的循环时间。因此，两亲性聚合物胶束作为药物递送载体一直是药物递送领域的研究热点之一。然而，传统的药物递送载体在药物定位跟踪及药物在病灶部位的快速释放能力有限。
[0003]自1965年Hirayama等提出通过化学反应将荧光分子引入高分子主链或侧链用于开发荧光聚合物以来，研究者们对高分子荧光聚合物的研究越来越感兴趣。这类聚合物在光照作用下能够发光，既有高分子材料的特性，又有有机荧光小分子对光的强吸收性和发色性能。目前通常使用的荧光分子有香豆素、7
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硝基
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1,2,3
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苯并氧杂恶二唑(NBD)、荧光素和萘二甲酰亚胺等。在这些荧光分子中，香豆素由于具有荧光量子产率高、斯托克斯(Stokes)位移大、光学稳定性好和结构可修饰等特性，因而在物理、化学、医学和生物领域得到了广泛的应用。
[0004]Pickering乳液是一种通过颗粒吸附在界面上形成界面膜从而形成动力学稳定而热力学不稳定的分散体系，因而它具有良好的物理化学稳定性。两亲性海藻酸衍生物作为一种高效的乳化剂，可以像功能表面活性剂一样发挥重要作用。其胶束在油水界面具有很强的吸附能力，促进了弹性膜的形成，保证了乳液的长期稳定性。近年来，对Pickering乳液界面颗粒膜性能的研究引起了广泛的关注，通过引入一些荧光标记分子观察乳液得到详细的荧光特性，清晰直观地观察软颗粒稳定乳液的界面颗粒膜。Li等报道了用尼罗红染色的嵌段共聚物胶束稳定Pickering乳液的界面性质。Albert等用钙黄素和罗丹明分别对乳液的水相和纳米颗粒进行染色，研究了纳米颗粒在油滴周围的分布。然而，染料过多会影响体系的稳定性；染料过少会使染色效果不好，这会影响对乳液体系的性质的理解。为了更准确、更方便地了解Pickering乳液的油水界面性质，迫切需要开发一种新的方法。Pickering乳液由聚合物胶束粒子稳定，因此乳液的发光可以通过胶束自身发光来实现。原则上，如果胶束聚集能发光，则可以用荧光显微镜直接观察乳液液滴形态，可以实现乳液界面的直接可视化观测。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种海藻酸
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g
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香豆素衍生物(LSA
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SS
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DEAC)的合成方法，该方法制得的含发色基团的两亲性海藻酸衍生物(LSA
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SS
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DEAC)，其在水溶液中能够自组
装形成具有还原响应性的聚合物胶束，并可以有效负载抗肿瘤药物阿霉素(DOX)。
[0006]本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是：
[0007]一种海藻酸
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g
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香豆素衍生物(LSA
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SS
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DEAC)的合成方法，合成路线示意图如图1所示，该方法包括如下步骤：
[0008]S1、海藻酸钠
‑
胱胺的合成：
[0009]用pH为6.4
±
0.2的MES缓冲液配制0.01～0.05g/ml的LSA溶液，
[0010]加入EDC
·
HCl和NHS，充分搅拌以活化LSA中的羧基，然后加入胱胺二盐酸盐，继续搅拌反应24h以上，将反应液装入MWCO 3500Da透析袋，透析以去除残留的杂质，冷冻干燥，得到中间产物海藻酸钠
‑
胱胺(LSA
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CYS)；
[0011]LSA糖醛酸单体与EDC
·
HCl和NHS的摩尔比为1:(2～4):(2～4)，LSA糖醛酸单体和胱胺二盐酸盐的摩尔比为1:1～3；
[0012]S2、7
‑
(二乙氨基)香豆素
‑3‑
甲酸(DEAC)的合成：
[0013]4‑
(二乙氨基)水杨醛和米氏酸以摩尔比0.83～1.2：1混合，并加入适量无水乙醇，在70℃
±
10℃的温度下搅拌5h～6h，析出大量固体，抽滤，用少量无水乙醇洗涤3～5次，烘干，得到7
‑
(二乙氨基)香豆素
‑3‑
甲酸(DEAC
‑
COOH)；
[0014]S3、海藻酸
‑
g
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香豆素衍生物(LSA
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SS
‑
DEAC)的合成：
[0015]将DEAC
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COOH溶解在少量DMF中，依次加入EDC
·
HCl和NHS，室温搅拌充分以活化DEAC
‑
COOH中的羧基基团，备用，其中DEAC
‑
COOH与EDC
·
HCl和NHS的摩尔比为1:1:1；
[0016]将S1得到的LSA
‑
CYS在溶剂中溶解，剧烈搅拌下滴入上述活化好的DEAC
‑
COOH溶液，所述LSA
‑
CYS糖醛酸单体与DEAC
‑
COOH的摩尔比为1:1～5，室温机械搅拌48h以上，将反应液装入MWCO 3500Da透析袋进行透析，以除去小分子原料试剂和有机溶剂，冷冻干燥，得海藻酸
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g
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香豆素衍生物(LSA
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SS
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DEAC)。
[0017]本专利技术以疏水性荧光分子7
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(二乙氨基)香豆素
‑3‑
甲酸(DEAC)作为疏水改性剂，采用水溶性的碳二亚胺化学法，通过胱胺二盐酸盐(构建二硫键)将其连接到亲水性的低分子量海藻酸钠(LSA,M
W
≤80000)骨架上，合成一种新型的含发色基团的两亲性海藻酸衍生物(LSA
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SS
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DEAC)，其在水溶液中能够自组装形成具有还原响应性的聚合物胶束，并可以有效负载抗肿瘤药物阿霉素(DOX)。进而以自组装的载药LSA
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SS
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DEAC胶束为软颗粒乳化剂，通过超声乳化法构建了稳定性好且具有荧光特性的载药Pickering乳液，在谷胱甘肽(GSH)的作用下可实现肿瘤部位药本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种海藻酸
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香豆素衍生物(LSA
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SS
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DEAC)的合成方法，其特征在于该方法包括如下步骤：S1、海藻酸钠
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胱胺的合成：用pH为6.4
±
0.2的MES缓冲液配制0.01～0.05g/ml的LSA溶液，加入EDC
·
HCl和NHS，充分搅拌以活化LSA中的羧基，然后加入胱胺二盐酸盐，继续搅拌反应24h以上，将反应液装入MWCO 3500Da透析袋，透析以去除残留的杂质，冷冻干燥，得到中间产物海藻酸钠
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胱胺(LSA
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CYS)；LSA糖醛酸单体与EDC
·
HCl和NHS的摩尔比为1:(2～4):(2～4)，LSA糖醛酸单体和胱胺二盐酸盐的摩尔比为1:1～3；S2、7
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(二乙氨基)香豆素
‑3‑
甲酸(DEAC)的合成：4
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(二乙氨基)水杨醛和米氏酸以摩尔比0.83～1.2：1混合，并加入适量无水乙醇，在70℃
±
10℃的温度下搅拌5h～6h，析出大量固体，抽滤，用少量无水乙醇洗涤3～5次，烘干，得到7
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(二乙氨基)香豆素
‑3‑
甲酸(DEAC
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COOH)；S3、海藻酸
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香豆素衍生物(LSA
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DEAC)的合成：将DEAC
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COOH溶解在少量DMF中，依次加入EDC
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HCl和NHS，室温搅拌充分以活化DEAC
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COOH中的羧基基团，备用，其中DEAC
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COOH与EDC
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HCl和NHS的摩尔比为1:1:1；将S1得到的LSA
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CYS在溶剂中溶解，剧烈搅拌下滴入上述活化好的DEAC
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COOH溶液，所述LSA
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CYS糖醛酸单体与DEAC
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COOH的摩尔比为1:1～5，室温机械搅拌48h以上，将反应液装入MWCO 3500Da透析袋进行透析，以除去小分子原料试剂和有机溶剂，冷冻干燥，得海藻酸
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香豆素衍生物(LSA
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DEAC)。2.根据权利要求1所述的合成方法，其特征在于：S1中所述的海藻酸盐质均分子量Mw≤80000，其单体古洛糖醛...

【专利技术属性】
技术研发人员：颜慧琼，陈秀琼，林强，文彦诗，孙秀英，宫翠宇，李娟，王秋叶，
申请(专利权)人：海南师范大学，
类型：发明
国别省市：