预防革兰氏阳性致病菌的重组蛋白、疫苗、药物制造技术

本发明专利技术涉及生物医药领域，涉及预防革兰氏阳性致病菌的重组蛋白、疫苗、药物，具体涉及一种抑制链球菌和/或预防链球菌感染的重组亚单位疫苗。本发明专利技术提供的疫苗，其活性成分由Sda1活性突变体mu

【技术实现步骤摘要】
预防革兰氏阳性致病菌的重组蛋白、疫苗、药物


[0001]本专利技术涉及生物医药领域，特别涉及预防革兰氏阳性致病菌的重组蛋白、疫苗、药物。

技术介绍

[0002]A族链球菌(Group A Streptococcus，以下简称A链菌)是一种重要的革兰氏阳性条件致病菌。A链菌通过人体上呼吸道粘膜和皮肤部位感染引起多种疾病，轻者包括咽炎、猩红热、脓疱病、丹毒及蜂窝组织炎，重者可导致全身扩散和侵袭性感染危及生命，如肺炎、菌血症、中毒性休克和急性坏死性肌膜炎等；A链菌感染还诱发风湿热和风湿性心脏病等自身免疫疾病。据世界卫生组织统计全球约有A链菌疾病患者，每年新增病例超过178万，死亡病例约为50万。此外A链菌感染导致风湿热和风湿性心脏病是造成心血管疾病死亡病例的首要原因，因此一直为世界卫生组织和科学家所重视。
[0003]A链菌的广泛传播，感染诱发的自身免疫疾病和侵袭性感染导致的高死亡率，造成了世界公共卫生和医疗的巨大负担，迫切需要开发安全、有效、广谱的A链菌疫苗。由于A链菌血清型众多，针对一种血清型产生的免疫力，而对另一种血清型无保护作用。此外，A链菌感染与自身性免疫疾病密切相关，这些严重阻碍了A链菌疫苗的研发进程。
[0004]A链菌在感染过程中表达多种毒力因子，包括逃逸免疫清除。中亿粒细胞在抗A链菌的感染中具有重要作用，通过释放含自身DNA形成含有大量具有抗菌活性的蛋白水解酶(例如弹性蛋白酶等)的纤维网状结构(NETs，Neutrophil Extracellular Traps)，捕获并杀死细菌。A链菌分泌多种脱氧核糖核酸酶降解NETs的DNA，逃逸中性粒细胞NETs的捕获和清除作用。Sda1是一种具有Dnase活性的分泌型毒力因子，在A链菌临床分离株中广泛存在(尤其是近年来全球范围内广泛传播的M1T1株)，通过降解中性粒细胞NETs中的DNA破坏NETs逃逸免疫清除。敲除Sda1基因或者缺失Sda1基因的A链菌株致病性显著下降。蛋白序列和系统进化分析显示：在C族链球菌(S.equisimilis)，肺炎球菌(S.pneumoniae)，金黄色葡萄球菌(S.aureus)等人类重要的致病菌中均含有Sda1的同源蛋白，说明Sda1在病原菌致病过程中具有重要作用。

技术实现思路

[0005]有鉴于此，本专利技术提供了预防革兰氏阳性致病菌的重组蛋白、疫苗、药物。
[0006]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
[0007]本专利技术提供了Sda1作为靶标在制备预防致病菌感染的疫苗，检测致病菌的试剂，预防和/或治疗致病菌感染所致疾病的药物中的应用；所述致病菌包括：抑制表达Sda1和/或与其同源的DNA酶的致病菌；所述感染包括：人粘膜系统感染。在本专利技术的一些具体实施方案中，所述致病菌包括革兰氏阳性致病菌；所述革兰氏阳性致病菌包括链球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎球菌中的一种或多种；所述链球菌包括A型链球菌、B型链球菌、C型链球菌、G型链球菌、肺炎链球菌、猪链球菌或马链球菌中的一种或多种；所述人粘膜系统包括呼吸系
统、消化系统、泌尿系统、泌尿生殖系统或皮肤中的一种或多种。
[0008]本专利技术还提供了重组蛋白mu
‑
Sda1，其具有：
[0009](I)、如SEQ ID No.6所示氨基酸序列自N末端第3至354位的氨基酸残基；或
[0010](II)、如(I)所述的氨基酸序列经取代、缺失或添加一个或两个氨基酸残基获得的氨基酸序列，且与(I)所示的氨基酸序列功能相同或相似的氨基酸序列；或
[0011](III)、与(I)或(II)所述序列具有至少90％序列一致性，且与(I)所示的氨基酸序列功能相同或相似的氨基酸序列。
[0012]在本专利技术的一些具体实施方案中，所述重组蛋白mu
‑
Sda1具有：
[0013](I)、如SEQ ID No.6所示的氨基酸序列；或
[0014](II)、如(I)所述的氨基酸序列经取代、缺失或添加一个或两个氨基酸残基获得的氨基酸序列，且与(I)所示的氨基酸序列功能相同或相似的氨基酸序列；或
[0015](III)、与(I)或(II)所述序列具有至少90％序列一致性，且与(I)所示的氨基酸序列功能相同或相似的氨基酸序列。
[0016]此外，本专利技术还提供了编码所述重组蛋白mu
‑
Sda1的核酸分子，具有
[0017](I)、如SEQ ID No.5所示核苷酸序列的7bp～1062bp或
[0018](II)、如SEQ ID No.5所示核苷酸序列的7bp～1062bp的互补核苷酸序列；或
[0019](III)、与(I)或(II)的核苷酸序列编码相同蛋白质，但因遗传密码的简并性而与(I)或(II)的核苷酸序列不同的核苷酸序列；或
[0020](IV)、与(I)、(II)或(III)所示的核苷酸序列经取代、缺失或添加一个或两个核苷酸序列获得的核苷酸序列，且与(I)、(II)或(III)所示的核苷酸序列功能相同或相似的核苷酸序列；或
[0021](V)、与(I)、(II)、(III)或(IV)所述核苷酸序列具有至少90％序列一致性的核苷酸序列。
[0022]本专利技术还提供了包含所述核酸分子的重组载体。
[0023]本专利技术还提供了包含所述重组载体的宿主。
[0024]在本专利技术的一些具体实施方案中，所述宿主包括大肠杆菌、酵母或哺乳动物细胞中的一种或多种。
[0025]此外，本专利技术还提供了所述重组蛋白mu
‑
Sda1在制备预防致病菌感染的疫苗，检测致病菌的试剂，预防和/或治疗致病菌感染所致疾病的药物中的应用；所述致病菌包括：抑制表达Sda1和/或与其同源的DNA酶的致病菌；所述感染包括：人粘膜系统感染。
[0026]在本专利技术的一些具体实施方案中，所述致病菌包括革兰氏阳性致病菌；所述革兰氏阳性致病菌包括链球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎球菌中的一种或多种；所述链球菌包括A型链球菌、B型链球菌、C型链球菌、G型链球菌、肺炎链球菌、猪链球菌或马链球菌中的一种或多种；所述人粘膜系统包括呼吸系统、消化系统、泌尿系统、泌尿生殖系统或皮肤中的一种或多种。
[0027]本专利技术还提供了疫苗，包括所述重组蛋白mu
‑
Sda1以及可接受的佐剂。在本专利技术的一些具体实施方案中，所述佐剂包括CpG。在本专利技术的一些具体实施方案中，所述重组蛋白mu
‑
Sda1与所述CpG的质量比为1∶1。在本专利技术的一些具体实施方案中，所述疫苗的使用方式包括鼻腔吸入、口服、皮下注射、皮内注射、泌尿生殖道注入或肛内注入。
[0028]本专利技术还提供了抗体，取所述的疫苗免疫动物，获得所述抗体。
[0029]本专利技术还提供了药物，包括所述抗体以及药学上可接受的辅料。
[0030]本专利技术还提供了检测试剂或检测试剂盒，包括所述抗体以及检测学上可接受的助剂。
[0031]本专利技术利用本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.Sdal作为靶标在制备预防致病菌感染的疫苗，检测致病菌的试剂，预防和/或治疗致病菌感染所致疾病的药物中的应用；所述致病菌包括：抑制表达Sdal和/或与其同源的DNA酶的致病菌；所述感染包括：人粘膜系统感染。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述致病菌包括革兰氏阳性致病菌；所述革兰氏阳性致病菌包括链球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎球菌中的一种或多种；所述链球菌包括A型链球菌、B型链球菌、C型链球菌、G型链球菌、肺炎链球菌、猪链球菌或马链球菌中的一种或多种；所述人粘膜系统包括呼吸系统、消化系统、泌尿系统、泌尿生殖系统或皮肤中的一种或多种。3.重组蛋白mu
‑
Sdal，其特征在于，其具有：(I)、如SEQ ID No.6所示氨基酸序列自N末端第3至354位的氨基酸残基；或(II)、如(I)所述的氨基酸序列经取代、缺失或添加一个或两个氨基酸残基获得的氨基酸序列，且与(I)所示的氨基酸序列功能相同或相似的氨基酸序列；或(III)、与(I)或(II)所述序列具有至少90％序列一致性，且与(I)所示的氨基酸序列功能相同或相似的氨基酸序列。4.如权利要求3所述的重组蛋白mu
‑
Sdal，其特征在于，其具有：(I)、如SEQ ID No.6所示的氨基酸序列；或(II)、如(I)所述的氨基酸序列经取代、缺失或添加一个或两个氨基酸残基获得的氨基酸序列，且与(I)所示的氨基酸序列功能相同或相似的氨基酸序列；或(III)、与(I)或(II)所述序列具有至少90％序列一致性，且与(I)所示的氨基酸序列功能相同或相似的氨基酸序列。5.编码如权利要求3或4所述重组蛋白mu
‑
Sdal的核酸分子，其特征在于，具有(I)、如SEQ ID No.5所示核苷酸序列的7bp～1062bp或(II)、如SEQ ID No.5所示核苷酸序列的7bp～1062bp的互补核苷酸序列；或(III)、与(I)或(II)的核苷酸序列编码相同蛋白质，但因遗传密码的简并性而与(I)或(II)的核苷酸序列不同的核苷酸序列；或(IV)、与(...

【专利技术属性】
技术研发人员：王北难，毕帅，
申请(专利权)人：中国科学院微生物研究所，
类型：发明
国别省市：